2.3 Методика блокирования медиаторных систем мозга и нтоксикации крыс

С целью интоксикации крысам некоторых групп вводили сульфат ртути, а для изменения функциональной активности дофаминергической системы мозга блокатор D₂-рецепторов галоперидол. Животным различных групп делали внутрибрюшинные инъекции веществ согласно табл. 1. Все вещества были разведены в физиологическом растворе, объем одной инъекции для крысы составлял 0,2 мл. Контрольной группе вводили физиологический раствор также в объеме 0,2 мл. В зависимости от введенных веществ, каждая группа крыс получила условное обозначение, что отражено в таблице.

Таблица 1. Группы животных, дозы и продолжительность получаемых ими инъекций.

Группы крыс	«контроль»	«Hg»	«Hg/D2»	«D2»
Введенные вещества, их доза и период проведения инъекций	Физраствор 7 дней + 3 дня	HgSO4 20 мг/кг 7 дней	HgSO4 20 мг/кг 7 дней + галоперидол 2,5 мг/кг 3 дня	Галоперидол 2,5 мг/кг 3 дня

2.2 Моделирование болевых реакций у крыс

Исследование болевых реакций тестируемых соединений проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 200 – 250 г, содержащихся в стандартных условиях вивария по 10 животных в 7 группах, в пластиковом ящике размером 403020 см. Доступ к воде не ограничивался. Тестирование проводилось в утреннее время. При проведении экспериментов биоэтические нормы соблюдены.

2.2.2. Тест «горячая пластина»

Тест «горячая пластина» – щадящая модель исследования аналгезии по отношению к животному, которая позволяет определять изменения болевой чувствительности практически на пороговом уровне.

Животное помещали на металлическую площадку (1), поверхность которой помощью нагревательного элемента (2) предварительно подвергали равномерному постепенному нагреванию до 45 ⁰С (рис. 2.1).

Р ис. 2.1. Схема регистрации термического порога болевой чувствительности у крыс в тесте «горячая пластина».

Примечание: 1 – металлическая площадка, 2 – нагревательный элемент, 3 – регулятор температуры.

Регистрировали болевой порог – время, по истечении которого появлялись первые болевые реакции у животных (отдергивание и лизание конечностей).

2.2.3. Тест «электростимуляция»

Тест «электростимуляция» («отдергивание лап», «hind paw withdrawal») является одним из распространенных методов стимуляционной электроалгометрии, который широко применяется в физиологии боли и анестезиологии.

В нашем эксперименте крысу помещали в камеру 20  30  20 см (1), пол которой был изготовлен из медной проволочной площадки, через которую пропускали электрический ток, генерируемый с помощью ЭСЛ – 2 (частота 45 Гц). Болевой порог (БП) определяли по минимальному значению напряжения (В), вызывающему реакцию отдергивания конечностей или подскок животного.

2.3 Статистические методы

Статистическую обработку полученных результатов планируется осуществлять с помощью пакета программ Statistica 6.0, уровень значимости p≤0,05. Экспериментальные данные сравнивались по непараметрическому критерию Манна-Уитни (достоверность различия средних значений p≤0,05).