9. Методы определения показателей фагоцитоза.

ИССЛЕДОВАНИЕ ФАГОЦИТАРНЫХ КЛЕТОК

А. Прямым морфологическим методом. Микробы смешиваются с фагоцитами в пробирке или в организме лабораторных животных, через 15—120 минут из смеси приготавливаются микропрепараты на предметных стеклах, окрашиваются по Романовскому-Гимзе и подсчитываются число фагоцити­рующих фагоцитов и число фагоцитированных микробов. По ним производят расчет следующих показателей:

ФАГОЦИТАРНЫЙ ПОКАЗАТЕЛЕЛЬ = 100%*(число фагоцитирующих фагоцитов/общее число фагоцитов)

ФАГОЦИТАРНОЕ ЧИСЛО = (число фагоцитированных микробов/число активных фагоцитов)

ПОКАЗАТЕЛЬ ЗАВЕРШЕННОСТИ ФАГОЦИТОЗА= (ФЧ(через 15мин)-ФЧ(через 120мин))/ФЧ(через15мин)*100%

Б. Непрямыми методами

Они основаны на определении функциональной активности различных стадий фагоцитарного процесса: определение хемотаксического индекса позволяет установить способность фагоцитов к направленному передвижению в сторону хемоаттрактанта -активированного комплемента, экстракта микробов, казеината натрия и др. Подсчитывается отношение количества фагоцитов, проникающих через микропористые фильтры в опыте и в контроле. Аттракция фагоцитирующегося объекта к поверхности фагоцита определяется по изменению степени метаболизма фагоцита, которая суммарно определяется в тесте хемилюминесценции. Бактерицидность фагоцитов определяется по активности бактерицидных систем, заключенных в гранулах клеток: перекиси водорода - пероксидазы, супероксидных ионов - супероксиддесмутазы, лизоцима и др. Переваривающая способность фагоцитов оценивается по активности лизосомальных ферментов, кислой и щелочной фосфатаз, катепсина и др.

10. Иммунный ответ и факторы, определяющие его выраженность. Генетический контроль гуморального и клеточного иммунного ответа.

Иммунный ответ - это сложная многокомпонентная кооперативная реакция ИС организма, индуцированная антигеном и направленная на его элиминацию. Явление иммунного ответа лежит в основе иммунитета.

Иммунный ответ зависит от: 1 Антигена - свойства, состав, молекулярная масса, доза, кратность попадания, длкгеганость контакта; 2 Состояния организма - иммунологическая реактивность; 3 Условий внешней среды.

Для иммунного ответа характерно: 1 Клональность - есть клоны Т- и В-лимфоцитов, которые специфичны по отношению к определенным эпитопам (их совокупность называется детерминантной группой); 2 Специфичность; 3 Разнообразие AT и TCR; 4 Формирование в клетках и молекулах эффекторов и клеток памяти; 5 Специфические механизмы действия совместимы с неспецифичными; 6 Контролирование геномом, 7 Деление на естественный и искусственный;

Компоненты иммунного ответа: 1 Антигены; 2 Антигенперерабатывающие и антигенпрезентирующие клетки (имакрофаги); 3 Антигенраспознающие клетки (В- и Т-лимфоциты и их субпопуляции), 4 Антигенраспознающие молекулы (ВЦР, молекулы главного комплекса гистосовместимости); 5 Цитокины - гемопоэтические, ростовые, регуляторные, рецепторные.

Иммунный ответ развивается в периферических лимфоидных органах. В ИО участвуют макрофаги, Т- и В-лимфоциты, фибробласты, ретикулярные клетки. Различают гуморальный, клеточный и смешанннный иммунный ответ, развитие которых происходит в несколько этапов.

ГИО (антителообразование) - Основой гуморального иммунного ответа является активация В-лимфоцитов и их дифференцировка в плазматические клетки (плазмоциты), которые синтезируют специфические к вызвавшему иммунный ответ антигену антитела (иммуноглобулины).

КИО - сложная кооперативная реакция организма, индуцируемая антигеном и реализуемая посредством Т-системы иммунитета в кооперации с АПК, которая завершается формированием антигенспецифических Т-лимфоцитов, выполняющих регуляторные и эффекторные функции. Задачи КИО: Развитие и регуляция гуморального и клеточного ответа. Элиминация антигена из организма.

Зрелые макрофаги имеют рецепторы к антигенам (Fc), СЗЬ-рецепторы, антигены гистосовместимости. Макрофаги участвуют как в естественном, так и в специфическом ИО. На ранней стадии ИО макрофаги выполняют функцию презентации антигена - в результате фагоцитоза антиген расщепляется, а его эпитоп выносится на мембрану в комплексе с белком МНС2. На конечной стадии ИО макрофаг активируется лимфокинами. В-лимфоциты - распознают антигены, участвуют в гуморальном ИО, имеют рецепторы к эритроцитам мышей, Fc, СЗЬ, к антигенам гистосовместимости.

Они не имеют специфичных антигенраспознающих рецепторов. Антиген-распознающим рецептором является молекула иммуноглобулина. Т- лимфоциты - разделяются на четыре основные субпопуляции - Т-хелперы, Т-супрессоры, Т-киллеры, и Т -эффекторы. Все они имеют рецепторы к эритроцитам барана, к иммуноглобулинам, белкам системы комплемента (но не имеют рецепторов к СЗЬ), к интерферонам, к антигенам, имеют антигены MHC1 и МНС2. Субпопуляции Т-лимфоцитов неоднородны, так, Т-хелперы разделяются на две группы - Т-хелперы 1 и, Т-хелперы 2 . Первые являются активаторами КИО, а вторые - ГИО. Т-лимфоциты обеспечивают клеточный, антивирусный, антибактериальный иммунитет, ГЗТ. В зависимости от путей реализации иммунный ответ разделяется на гуморальный (ГИО) и клеточный (КИО), однако в чистом виде ни один из них не проявляется ГИО контролируется красным костным мозгом, а КИО - тимусом.