Вариант 8

1. При изучении тропин-эстеразной активности сыворотки крови кролика измеряли количество кислоты, освобождающейся при гидролизе атропинсульфата. Опыты проводили на pH-метре, регистрируя освобождение кислоты (в безбуферной среде, pH 8,4) путем титрования 0,02 М раствором NaOH. Приведенные ниже данные показывают зависимость тропин-эстеразной активности от температуры (продолжительность опытов 30 мин, концентрация сыворотки 2,5%, концентрация атропинсульфата 0,25%; субстрат имелся в избытке):

Количество 0,02М р-ра NaOH за 30 мин, мл		Температура, C	Количество 0,02М р-ра NaOH за 30 мин,мл		Температура, C
Фермент	контроль		Фермент	Контроль
0,09	0,03	20	0,255	0,09	38
0,14	0,06	28	0,264	0,10	40
0,175	0,07	32	0,291	0,125	44,5
0,24	0,08	36

Рассчитать энергию активации тропин-эстеразной реакции.

2. Под действием ультразвука происходит необратимая инактивация фермента -химотрипсина. В таблице приведены значения ферментативной активности при различных временах озвучивания раствора фермента. Найти порядок реакции и константу скорости инактивации.

Время озвучивания, мин	Активность фермента, условн. Ед
0	1,80
15	1,44
20	1,30
40	0,99
50	0,85

3. Скорость реакции распада (Апродукт) подчиняется уравнению второго порядка. При изучении изменения концентрации во времени получены следующие результаты:

t,c	0	200	400	600	800
концентрация, мг/cм3	16,4	15,0	13,4	12,8	11,5

Рассчитайте константу скорости реакции второго порядка.

4. Трансаминаза катализирует реакцию: Глутамат + Оксалоацетат-Кетоглутарат +Аспартат. Коферментом этого каталитического процесса служит пиридоксальфосфат (ПФ). Рассчитайте величину K_m и V_max всеми известными методами для комплекса апофермент-кофермент, исходя из приведенных ниже данных, полученных, когда концентрация ПФ менялась, а все остальные условия и, в частности, концентрации глутамата и оксалоацетата, оставались постоянными

Скорость исчезновения глутамата, мг*мин-1	0,17	0,27	0,43	0,6	0,73	0,78	0,83	0,95
Количество добавленного ПФ, мкМ	0,30	0,50	1,0	2,0	3,0	4,0	5,0	10,0

Вариант 9

1. В таблице приведены кинетические данные обесцвечивания красителя профлавина под действием ультрафиолетового света. Определить порядок реакции и значение константы скорости обесцвечивания красителя.

Время, мин	0	2	4	7	11	15	20
D	0,63	0,56	0,51	0,44	0,38	0,32	0,25

2. В таблице приведены температурные зависимости констант скоростей реакций глицилглицина и гадразина с малахитовым зеленым. Рассчитать энергию активации каждой реакции. Можно ли достичь в условиях эксперимента такой температуры, при которой значения констант скоростей этих двух реакций будут одинаковыми.

Реагент	t С	k, М-1*мин-1
	7,0	1060
Гидразин	14,8	1580
	23,8	2480
	30,0	3750
	38,4	4680
	7,0	31,4
	14,8	52,1
Глицилглицин	23,8	90,2
	30,0	133
	38,4	199

3. Кинетику реакции щелочного гидролиза анилидов исследовали титрованием проб смеси одинакового объема щелочью. Определите порядок реакции всеми возможными способами и вычислите среднее значение константы скорости этой реакции на основании следующих данных:

Время, мин	0	30	60	90	120	150
Объем титранта	12,7	13,81	14,73	15,52	16,8	20,22

4. В опыте по определению сродства тропинэстеразы к субстрату (атропинсульфат) были получены приведенные ниже данные. Ход реакции регистрировали манометрическим методом в бикарбонатном буфере, измеряя количество CO₂, выделяющегося при образовании кислоты в результате гидролиза атропинсульфата. Источником фермента служила сыворотка крови кролика (2,5%), реакцию проводили при 30С и pH 7,4

Концентрация атропинсульфата, мМ	Количество CO2, выделившегося за 100 мин, мм3	Концентрация атропинсульфата, мМ	Количество CO2, выделившегося за 100 мин, мм3
7,4	28,5	0,37	25,0
3,00	28,0	0,30	23,5
1,50	28,0	0,15	20,3
0,74	26,6

Определить константу Мехаэлиса и максимальную скорость реакции методами Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти и Хейнса.