
- •4Хромосомные болезни
- •Аномалии числа хромосом [править] Болезни, обусловленные нарушением числа аутосом [править]
- •Болезни, связанные с нарушением числа половых хромосом [править]
- •Болезни, причиной которых является полиплоидия [править]
- •Нарушения структуры хромосом [править]
- •6 Опухоль
- •Доброкачественные опухоли [править]
- •Злокачественные опухоли [править]
- •Типы роста опухолей [править]
- •Метастазирование опухолей [править]
- •Влияние опухоли на организм [править]
- •Этиология опухолей [править]
- •7Онкоген
- •10 Генная инженерия
- •11Этапы генной инженерии
- •12Трансгенный организм
- •13Молекулярно-генетические методы
- •14Полимеразная цепная реакция
- •История [править]
- •Проведение пцр [править]
- •Компоненты реакции [править]
- •Праймеры [править]
- •Амплификатор [править]
- •Ход реакции [править]
- •Денатурация [править]
- •Отжиг [править]
- •Элонгация [править]
- •Разновидности пцр [править]
- •Применение пцр [править]
- •Криминалистика [править]
- •Установление отцовства [править]
- •Медицинская диагностика [править]
- •Персонализированная медицина [править]
- •Клонирование генов [править]
- •Секвенирование днк [править]
- •Мутагенез [править]
- •15Система рестрикции-модификации
- •История открытия [править]
- •Номенклатура [править]
- •Ферментативная активность [править] Эндонуклеазная [править]
- •Метилтрансферазная [править]
- •Классификация [править]
- •Тип I [править]
- •Тип II [править]
- •Тип III [править]
- •Тип IV [править]
- •18Флуоресцентная гибридизация in situ (fish)
Применение пцр [править]
ПЦР используется во многих областях для проведения анализов и в научных экспериментах.
Криминалистика [править]
ПЦР используют для сравнения так называемых «генетических отпечатков пальцев». Необходим образец генетического материала с места преступления — кровь, слюна, сперма, волосы и т. п. Его сравнивают с генетическим материалом подозреваемого. Достаточно совсем малого количества ДНК, теоретически — одной копии. ДНК расщепляют на фрагменты, затем амплифицируют с помощью ПЦР. Фрагменты разделяют с помощью электрофореза ДНК. Полученную картину расположения полос ДНК и называют генетическим отпечатком пальцев (англ. genetic fingerprint).
Установление отцовства [править]
Рис. 3: Результаты электрофореза ДНК-фрагментов, амплифицированных с помощью ПЦР. (1) Отец. (2) Ребёнок. (3) Мать. Ребёнок унаследовал некоторые особенности генетического отпечатка обоих родителей, что дало новый, уникальный отпечаток.
Хотя «генетические отпечатки пальцев» уникальны (за исключением случая однояйцевых близнецов), родственные связи все же можно установить, сделав несколько таких отпечатков (рис. 3). Тот же метод можно применить, слегка модифицировав его, для установленияэволюционного родства среди организмов.
Медицинская диагностика [править]
ПЦР дает возможность существенно ускорить и облегчить диагностику наследственных и вирусных заболеваний. Нужный ген амплифицируют с помощью ПЦР с использованием соответствующих праймеров, а затем секвенируют для определения мутаций. Вирусные инфекции можно обнаруживать сразу после заражения, за недели или месяцы до того, как проявятся симптомы заболевания.
Персонализированная медицина [править]
Иногда лекарства оказываются токсичными или аллергенными для некоторых пациентов. Причины этого — отчасти в индивидуальных различиях в восприимчивости и метаболизме лекарств и их производных. Эти различия детерминируются на генетическом уровне. Например, у одного пациента определенный цитохром (белок печени, отвечающий за метаболизм чужеродных веществ) может быть более активен, у другого — менее. Для того, чтобы определить, какой разновидностью цитохрома обладает данный пациент, предложено проводить ПЦР-анализ перед применением лекарства.[источник не указан 1286 дней] Такой анализ называют предварительным генотипированием (англ. prospective genotyping).
Клонирование генов [править]
Клонирование генов (не путать с клонированием организмов) — это процесс выделения генов и, в результате генноинженерных манипуляций, получения большого количества продукта данного гена. ПЦР используется для того, чтобы амплифицировать ген, который затем вставляется ввектор — фрагмент ДНК, переносящий чужеродный ген в тот же самый или другой, удобный для выращивания, организм. В качестве векторов используют, например, плазмиды или вирусную ДНК. Вставку генов в чужеродный организм обычно используют для получения продукта этого гена — РНК или, чаще всего, белка. Таким образом в промышленных количествах получают многие белки для использования в сельском хозяйстве, медицине и др. (1) Хромосомная ДНК организма A. (2) ПЦР. (3) Множество копий гена организма А. (4) Вставка гена в плазмиду. (5) Плазмида с геном организма А. (6) Введение плазмиды в организм В. (7) Умножение количества копий гена организма А в организме В.