- •1 Кинетика процессов утилизации субстрата, образования продуктов метаболизма и биомассы в культурах клеток
- •1.1 Идеальные реакторы для изучения кинетики клеточного роста
- •1.2 Идеальный реактор периодического действия
- •1.3 Идеальный проточный реактор с полным перемешиванием (прпп)
- •1.2 Кинетика сбалансированного роста
- •Рост филаментозных организмов
- •Структурированные модели кинетики клеточного роста
- •Компартментальные модели
- •Неструктурированные модели
- •Химически структурированные модели кинетики образования продуктов жизнедеятельности клеток
- •Кинетика образования продуктов жизнедеятельности филаментозными организмами
- •Кинетика тепловой гибели клеток и спор
- •Заключение
- •Вопросы для самоконтроля.
- •2 Проектирование и расчет биологических реакторов
- •1. Идеальные биореакторы
- •1.1. Реакторы периодического действия с добавлением субстрата
- •1.2. Реакции в прпп, катализируемые ферментами
- •1.3. Проточные реакторы с полным перемешиванием для культур клеток и пристеночный рост клеток
- •9.1.4. Идеальный трубчатый реактор полного вытеснения (трпв)
- •3. Реакторы с неидеальным перемешиванием
- •3.1. Время выравнивания концентраций в реакторах с перемешиванием
- •3.4. Взаимосвязь между перемешиванием и биологическими превращениями
- •4. Стерилизаторы
- •4.1. Периодическая стерилизация
- •4.2. Непрерывная стерилизация
- •5. Иммобилизованные биокатализаторы
- •5.1. Типы биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток и их свойства
- •5.2. Применение биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток
- •7. Технология микробиологических процессов
- •7.1. Подбор состава среды
- •7.2. Проектирование типичного асептического аэробного микробиологического процесса и его ведение
- •7.3. Биореакторы других типов
- •8. Особенности технологии процессов с участием растительных и животных клеток и соответствующих реакторов
- •8.1. Культивирование животных клеток; требования к среде
- •8.2. Промышленные реакторы для крупномасштабных процессов с участием животных клеток
- •8.3. Культивирование растительных клеток
- •1. Детекторы для определения физических и химических параметров среды и газов
- •1.1. Детекторы для определения физических свойств среды и газов
- •1.2. Детекторы для определения химического состава среды
- •1.3. Газовый анализ
- •2. Детекторы для непрерывного контроля характеристик популяции клеток
- •3. Автономные методы анализа
- •3.1. Определение свойств среды
- •3.2. Анализ состава популяции клеток
- •4. Эвм и интерфейсы
- •4.1. Основные элементы цифровых эвм
- •4.2. Интерфейсы и периферийные устройства эвм
- •4.3. Системы программного обеспечения
- •5. Анализ данных
- •5.1. Сглаживание и интерполяция данных
- •6. Управление процессами биохимической технологии
- •6.1. Непосредственное управление процессами
- •6.2. Каскадное управление метаболизмом
1.3. Газовый анализ
Концентрация СО2 в отходящих газах биореактора, содержащего культуру клеток, связана с дыхательной или иной ферментативной активностью клеток. Неудивительно, что этот параметр широко и успешно применяется для контроля и регулирования биореакторов. Концентрацию СО2 в отходящих газах биореактора чаще всего определяют с помощью инфракрасного спектрофотометра. Для предотвращения повреждений стекол ячейки анализируемый газ до поступления в спектрофотометр необходимо высушить. Концентрацию СО2 в потоке газа можно также определять по теплопроводности, методом газовой хроматографии или масс-спектрометрии.
Парциальное давление кислорода в газовом потоке обычно измеряют с помощью парамагнитного анализатора. Приборы этого типа также требуют предварительного высушивания и тщательного регулирования скорости газового потока; только в этом случае обеспечиваются минимальный дрейф и достаточная надежность результатов. Парамагнитные анализаторы, кроме того, очень чувствительны даже к небольшим колебаниям общего атмосферного давления, поэтому необходим одновременный контроль барометрического давления, чтобы внести, соответствующие поправки в результаты анализа на кислород. В силу дрейфа показаний парамагнитных анализаторов их применение в микробиологических процессах часто требует повторной калибровки в ходе процесса.
С помощью газовой хроматографии можно определять несколько компонентов отходящих газов: О2, СО2, СН4 (образующегося, например, в анаэробных процессах) и Н2 (выделяемого, например, культурами Hydrogenomonas). Этим методом можно также определять парциальное давление летучих компонентов газовой фазы — этанола, ацетальдегида и карбоновых кислот. Таким образом, газовая хроматография дает ценную информацию о ходе микробиологического процесса в целом, а также о концентрациях перечисленных выше веществ в жидкой фазе. Применению газовой хроматографии для контроля; процессов в нестационарном состоянии препятствует периодический характер измерений, поскольку интервал между двумя последовательными измерениями составляет примерно 15 мин.
Д
ля
контроля состава газового потока в
последнее время все чаще применяют
масс-спектрометрический
метод.
Появление сравнительно недорогих
серийных масс-спектрометров позволило
расширить область применения этих
приборов в исследовательских работах,
а выпуск надежных, устойчивых к внешним
воздействиям промышленных масс-спектрометров
обусловил целесообразность их
использования в промышленности.
Масс-спектрометры
выгодно отличаются малым временем
отклика (менее 1 мин), высокой
чувствительностью (предел обнаружения
около 10-5
М), способностью определять несколько
компонентов одновременно, линейной
зависимостью отклика от концентрации
в достаточно широком диапазоне и очень
малым дрейфом калибровки. Ввиду
высокой стоимости масс-спектрометров
целесообразно обслуживать одним прибором
несколько биореакторов с помощью
управляемого ЭВМ переключающего
устройства, которое последовательно
вводит в масс-спектрометр потоки из
различных реакторов (рис. 4). Как показано
на рис. 4, с помощью этой же ЭВМ можно
управлять и процессом (здесь показаны
три реактора, но практически один
масс-спектрометр может обслуживать до
30 реакторов).
РИС. 4. Схема управляемой ЭВМ системы отбора проб при использовании масс-спектрометра для контроля процессов в нескольких реакторах. (Воспроизведено с разрешения из работы: Buckland R. С., Fastert Я., Analysis of Fermentation Exhaust Gas Using a Mass Spectrometer, in Computer Applications in Fermentation Technology, p. 119, Society of Chemical Industry, London, 1982.)
Часто в анализах принимают, что поступающий в систему воздух имеет стандартный состав (20,91% O2, 0,03% СО2), однако иногда в целях повышения надежности и достоверности результатов измерений целесообразно определять состав и поступающего в реактор воздуха, включив, как это показано на рис. 4, его поток в распределяющее устройство. Конечно, такое комплексное и многостороннее использование аналитических приборов с помощью распределяющих устройств выгодно не только в случае масс-спектрометров.
