- •1 Кинетика процессов утилизации субстрата, образования продуктов метаболизма и биомассы в культурах клеток
- •1.1 Идеальные реакторы для изучения кинетики клеточного роста
- •1.2 Идеальный реактор периодического действия
- •1.3 Идеальный проточный реактор с полным перемешиванием (прпп)
- •1.2 Кинетика сбалансированного роста
- •Рост филаментозных организмов
- •Структурированные модели кинетики клеточного роста
- •Компартментальные модели
- •Неструктурированные модели
- •Химически структурированные модели кинетики образования продуктов жизнедеятельности клеток
- •Кинетика образования продуктов жизнедеятельности филаментозными организмами
- •Кинетика тепловой гибели клеток и спор
- •Заключение
- •Вопросы для самоконтроля.
- •2 Проектирование и расчет биологических реакторов
- •1. Идеальные биореакторы
- •1.1. Реакторы периодического действия с добавлением субстрата
- •1.2. Реакции в прпп, катализируемые ферментами
- •1.3. Проточные реакторы с полным перемешиванием для культур клеток и пристеночный рост клеток
- •9.1.4. Идеальный трубчатый реактор полного вытеснения (трпв)
- •3. Реакторы с неидеальным перемешиванием
- •3.1. Время выравнивания концентраций в реакторах с перемешиванием
- •3.4. Взаимосвязь между перемешиванием и биологическими превращениями
- •4. Стерилизаторы
- •4.1. Периодическая стерилизация
- •4.2. Непрерывная стерилизация
- •5. Иммобилизованные биокатализаторы
- •5.1. Типы биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток и их свойства
- •5.2. Применение биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток
- •7. Технология микробиологических процессов
- •7.1. Подбор состава среды
- •7.2. Проектирование типичного асептического аэробного микробиологического процесса и его ведение
- •7.3. Биореакторы других типов
- •8. Особенности технологии процессов с участием растительных и животных клеток и соответствующих реакторов
- •8.1. Культивирование животных клеток; требования к среде
- •8.2. Промышленные реакторы для крупномасштабных процессов с участием животных клеток
- •8.3. Культивирование растительных клеток
- •1. Детекторы для определения физических и химических параметров среды и газов
- •1.1. Детекторы для определения физических свойств среды и газов
- •1.2. Детекторы для определения химического состава среды
- •1.3. Газовый анализ
- •2. Детекторы для непрерывного контроля характеристик популяции клеток
- •3. Автономные методы анализа
- •3.1. Определение свойств среды
- •3.2. Анализ состава популяции клеток
- •4. Эвм и интерфейсы
- •4.1. Основные элементы цифровых эвм
- •4.2. Интерфейсы и периферийные устройства эвм
- •4.3. Системы программного обеспечения
- •5. Анализ данных
- •5.1. Сглаживание и интерполяция данных
- •6. Управление процессами биохимической технологии
- •6.1. Непосредственное управление процессами
- •6.2. Каскадное управление метаболизмом
4.1. Периодическая стерилизация
Изучение процессов стерилизации мы начнем с анализа закрытого сосуда с полным перемешиванием, содержащего суспензию клеток или спор. Жидкость должна стерилизоваться при нагревании, а затем охлаждаться до температуры, отвечающей требованиям дальнейших этапов процесса. Концентрацию организмов, оставшихся жизнеспособными после такой обработки, можно вычислить по уравнениям (7.125) и (7.126):
(92)
В это уравнение в явной форме включена зависимость температуры жидкости от времени. Путем разделения переменных в уравнении (9.92) и интегрирования находим
(93)
Индекс f указывает, что данный параметр отражает конечные условия.
Конструкция стерилизатора периодического действия обычно включает одно или несколько нагревающих устройств, где нагревание может осуществляться путем барботирования пара (пропускания острого пара через стерилизуемую среду), с помощью электрических нагревателей, посредством нагревания или охлаждения в жидкостном теплообменнике. Дейндорфер и Хамфри* предложили подразделять различные способы нагревания или охлаждения в соответствии с формой кривой изменения температуры во времени (температурным профилем);
* Deindoerfer F. Н., Humphrey А. Е., Analytical Method for Calculating Heat Sterilization Times; Appl. Microbiol., 7, 256 (1959).
соответствующие функции приведены в табл. 4. Интеграл в правой части уравнения (93) можно определить, разделив весь диапазон интегрирования на три интервала — нагревание (повышение температуры), выдержку и охлаждение. В конечном счете мы получим четыре интегральных уравнения, одно из которых описывает интервал постоянной температуры, а три других — интервалы изменения температуры по гиперболическому, линейному или экспоненциальному законам.
Таблица 9.4. Температурные профили периодических процессов стерилизации'
Здесь целесообразно изучить также математическую модель другого процесса, а именно тепловой стерилизации твердых тел или жидкостей в состоянии покоя. Одной из областей использования тепловой стерилизации является разрушение токсичных организмов в герметично упакованных пищевых продуктах. Часто возникает необходимость и в максимальном удалении популяций микроорганизмов, способных разлагать или каким-либо другим образом вызывать порчу продуктов в закрытых контейнерах. В подлежащих стерилизации жидкостях часто содержатся суспендированные твердые частицы или скопления микроорганизмов. Если внутри этих частиц или скоплений имеются нежелательные организмы, то они труднее поддаются тепловой обработке, и поэтому для их стерилизации необходимо более продолжительное нагревание или более высокая температура.
Р
ассчитанные
с помощью этих уравнений профили
распределения температур в сфере при
различных
t
представлены
на рис.
23. Что касается процессов стерилизации,
то наиболее важным выводом из обсуждаемой
модели является наличие лаг-фазы между
временем приложения высокой температуры
к поверхности твердого тела и установлением
аналогичной температуры во всем объеме
тела. Следовательно, в общем случае
разрушение организмов в центре твердого
тела будет менее полным, чем на его
поверхности. Качественно этот вывод
сохраняет свою силу для тел любой другой
геометрии и любых начальных и граничных
условий. Не имея возможности углубляться
в детали проблемы теплопроводности в
различных системах в
нестационарных условиях, мы рекомендуем
читателю монографию Карслоу и Егера,
содержащую много дополнительной
информации,
описывающей теории и аналитические
решения.
РИС. 23. Температурные профили в сфере радиусом R в зависимости от относительного времени kt/ρCpR2 (обозначено цифрами на каждой кривой). Т0 — начальная температура в любой точке сферы, а Т1 — температура наружной поверхности сферы при t>0.
Если зависимость температуры от времени и положения внутри твердого тела определена, то затем можно рассчитать и долю погибших микроорганизмов и спор в этом теле. Для этой цели в пищевой промышленности использовались два подхода. В первом из них рассматривается концентрация организмов в центре твердого тела. Поскольку центр нагревается в последнюю очередь, то, если его нагреть до соответствующей температуры, будет обеспечена достаточная степень стерилизации и всего твердого тела. Далее для расчета доли выживших организмов в центре нам достаточно ввести в уравнение (93) функцию зависимости температуры от времени в этой же точке и вычислить соответствующий интеграл. Последнюю операцию часто удобнее выполнять в численной или графической форме, поскольку зависимость Т от t обычно выражается довольно сложным уравнением, например (106).
В другом подходе описанные выше вычисления повторяют много раз и таким путем определяют концентрацию выживших организмов в каждой точке внутри твердого тела. Затем, интегрируя эти концентрации по всему объему твердого тела, можно определить численность выжившей популяции или вероятность выживания организмов. Хотя принцип такого подхода очевиден и несложен, соответствующие расчеты довольно трудоемки. Поэтому для решения конкретных задач пищевой промышленности были разработаны упрощенные методики расчета, основанные на том же принципе. Объяснение этих методик невозможно без введения новых понятий и определений; интересующийся этой проблемой читатель может ознакомиться с ней детальнее в книге Чарма [30].
Преимущество периодической стерилизации состоит в относительной простоте процесса, но вместе с тем ей свойствен и ряд недостатков. Один из них связан с продолжительным нагреванием и охлаждением, другой вытекает из первого и заключается в возможности разрушения полезных компонентов стерилизуемой системы. Действительно, при нагревании разрушаются многие витамины, а белки подвергаются денатурации. Необходимо подчеркнуть, что кинетика разрушения этих компонентов системы часто описывается теми же уравнениями, что и кинетика гибели организмов [уравнение (9.92)], а энергия активации этих нежелательных побочных превращений обычно намного ниже энергии «реакции» стерилизации. Приведенные в табл. 5 величины, например, на 50—100 ккал/моль меньше энергии, обычно необходимой для разрушения клеток и спор.
Поскольку энергия активации необходимого процесса выше энергии активации побочной реакции, то повышение температуры благоприятно влияет на отношение скоростей необходимого и побочного процессов. Отсюда следует, что для подавления реакции Майяра или предотвращения разрушения лабильных соединений процесс стерилизации нужно проводить при возможно более высокой температуре в течение минимального времени, обеспечивающего гибель нежелательных организмов (высокотемпературная кратковременная обработка, или режим ВТКВ). В процессах периодической стерилизации при медленном нагревании и медленном охлаждении эти цели не достигаются. В рассматриваемой ниже непрерывной стерилизации в потоке режим ВТКВ обеспечивается значительно легче.
Таблица.5. Приближенные величины энергии активации некоторых нежелательных побочных реакций, происходящих при тепловой обработке
