- •1 Кинетика процессов утилизации субстрата, образования продуктов метаболизма и биомассы в культурах клеток
- •1.1 Идеальные реакторы для изучения кинетики клеточного роста
- •1.2 Идеальный реактор периодического действия
- •1.3 Идеальный проточный реактор с полным перемешиванием (прпп)
- •1.2 Кинетика сбалансированного роста
- •Рост филаментозных организмов
- •Структурированные модели кинетики клеточного роста
- •Компартментальные модели
- •Неструктурированные модели
- •Химически структурированные модели кинетики образования продуктов жизнедеятельности клеток
- •Кинетика образования продуктов жизнедеятельности филаментозными организмами
- •Кинетика тепловой гибели клеток и спор
- •Заключение
- •Вопросы для самоконтроля.
- •2 Проектирование и расчет биологических реакторов
- •1. Идеальные биореакторы
- •1.1. Реакторы периодического действия с добавлением субстрата
- •1.2. Реакции в прпп, катализируемые ферментами
- •1.3. Проточные реакторы с полным перемешиванием для культур клеток и пристеночный рост клеток
- •9.1.4. Идеальный трубчатый реактор полного вытеснения (трпв)
- •3. Реакторы с неидеальным перемешиванием
- •3.1. Время выравнивания концентраций в реакторах с перемешиванием
- •3.4. Взаимосвязь между перемешиванием и биологическими превращениями
- •4. Стерилизаторы
- •4.1. Периодическая стерилизация
- •4.2. Непрерывная стерилизация
- •5. Иммобилизованные биокатализаторы
- •5.1. Типы биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток и их свойства
- •5.2. Применение биокатализаторов на основе иммобилизованных клеток
- •7. Технология микробиологических процессов
- •7.1. Подбор состава среды
- •7.2. Проектирование типичного асептического аэробного микробиологического процесса и его ведение
- •7.3. Биореакторы других типов
- •8. Особенности технологии процессов с участием растительных и животных клеток и соответствующих реакторов
- •8.1. Культивирование животных клеток; требования к среде
- •8.2. Промышленные реакторы для крупномасштабных процессов с участием животных клеток
- •8.3. Культивирование растительных клеток
- •1. Детекторы для определения физических и химических параметров среды и газов
- •1.1. Детекторы для определения физических свойств среды и газов
- •1.2. Детекторы для определения химического состава среды
- •1.3. Газовый анализ
- •2. Детекторы для непрерывного контроля характеристик популяции клеток
- •3. Автономные методы анализа
- •3.1. Определение свойств среды
- •3.2. Анализ состава популяции клеток
- •4. Эвм и интерфейсы
- •4.1. Основные элементы цифровых эвм
- •4.2. Интерфейсы и периферийные устройства эвм
- •4.3. Системы программного обеспечения
- •5. Анализ данных
- •5.1. Сглаживание и интерполяция данных
- •6. Управление процессами биохимической технологии
- •6.1. Непосредственное управление процессами
- •6.2. Каскадное управление метаболизмом
1.3. Проточные реакторы с полным перемешиванием для культур клеток и пристеночный рост клеток
Для повышения выхода биомассы и продуктов жизнедеятельности организмов в единице объема реактора в единицу времени ПРПП можно снабдить сепаратором (гл. 11) и устройством для рециркуляции концентрированной суспензии клеток. В соответствии с принятыми на рис. 9.4 обозначениями, символами F0 и Fr мы будем обозначать объемные скорости потоков поступающих в систему питательных веществ и рециркуляции соответственно, а символами x1, х0 и x — концентрации биомассы в реакторе, рециркулирующем потоке и в выходящем из реактора потоке соответственно. Эти величины могут различаться в силу специфики работы сепаратора (которым может быть, например, отстойник), расположенного в точке разделения потока, вытекающего из реактора. При a= Fr/F0 и
b = x0/x1 в стационарном состоянии уравнение материального баланса по биомассе для системы с рециркуляцией выглядит следующим образом:
(9.7)
Тогда общая (или внешняя) скорость разведения D (равная F0/Vr) составит:
(9.8)
РИС. 4. Схема ПРПП с рециркуляцией.
Поскольку концентрация микроорганизмов в циркулирующем потоке обычно выше концентрации на выходе из реактора, то b>1. В этом случае, как показывает уравнение (9.8), скорость разведения выше удельной скорости роста организмов. Следовательно, рециркуляция при той же скорости роста организмов позволяет перерабатывать за единицу времени больше питательных веществ в единице объема реактора. Эта особенность проточных реакторов с рециркуляцией с большим успехом используется в процессах биологической переработки отходов, подробнее рассматриваемых в гл. 14. (Каков эффект рециркуляции при b=1? Объясните физический смысл полученного вами результата.)
Другие важные преимущества системы с рециркуляцией обнаруживаются после ряда преобразований уравнений материального баланса по компонентам системы. Если принять, что экономический коэффициент постоянен, то уравнение материального баланса по субстрату можно записать в виде
(9)
Из уравнений (9.9) и (9.8) нетрудно найти, что скорость образования биомассы в единице объема реактора (μx1) равна:
(10)
Эта величина больше скорости образования биомассы без рециркуляции в [1—a(b—1)]-1 раз. Если принять, что [μ подчиняется уравнению Моно, то можно показать, что и скорость разведения в точке вымывания при рециркуляции возрастает во столько же раз.
В экспериментах с растущими популяциями клеток в ПРПП иногда и в отсутствие рециркуляции можно добиться более высоких скоростей разведения без вымывания по сравнению с величиной, предсказываемой теорией идеальных ПРПП. Это явление может быть обусловлено ростом организмов на стенках реактора (так называемым пристеночным ростом). В общем случае в реакторе может быть несколько центров образования твердых пленок организмов. Колонии микроорганизмов могут возникать, например, над уровнем жидкой фазы там, где разбрызгиваемые капли культуры попадают на стенки резервуара, или в трещинах и щелях в относительно неперемешиваемых (застойных) зонах биореактора. Если допустить, что концентрация клеток в пленках на стенках реактора xf постоянна во времени, то размножение организмов в этих пленках должно сопровождаться переносом клеток со стенок в жидкую перемешиваемую культуру. В этом случае уравнения материального баланса для стационарного состояния в проточном реакторе примут следующую общую форму:
(9.11)
(12)
Здесь μf и Yf — удельная скорость клеточного роста и экономический коэффициент в пленке соответственно. Эти параметры по целому ряду причин отличаются от соответствующих параметров основной массы культуры μ и Y, в том числе из-за влияния диффузии на скорость реакции.
Здесь необходимо отметить, что слагаемое μfxf в уравнении (11) отражает второй источник поступления клеток в культуральную жидкость, который практически не зависит от D, поэтому пристеночный рост организмов предотвращает вымывание. В этой связи следует также подчеркнуть, что у лабораторных реакторов отношение поверхности к объему значительно выше, чем у крупномасштабных промышленных реакторов, и, следовательно, вклад пристеночного роста в лабораторных установках также в общем случае должен быть большим.
Таким образом, для систем, в которых наблюдается существенный пристеночный рост организмов, последний необходимо учитывать при масштабном переходе от данных по кинетике роста микроорганизмов, полученных в лаборатории, к промышленным реакторам большого объема.
