
- •33. Конечные стадии получения целевого продукта.
- •35. Методы дезинтеграции клеток.
- •37. Стадии концентрирования, обезвоживания, модификации и стабилизации целевых продуктов биотехнологических процессов.
- •38. Применение и источники ферментов
- •40. Ферментационные технологии
- •41. Иммобилизованные ферменты
- •42. Методы иммобилизации ферментов.
- •43. Использование иммобилизации ферментов в промышленности и медицине.
- •45. Основы клеточной инженерии
- •46. Методы и условия культивирования тканей и клеток растений.
- •47. Дифференцировка клеток как основа каллусогенеза
- •49.Морфогенез в каллусных тканях как проявление тотипотентности растительной клетки
- •50.Изолированные протопласты, их получение и культивирование.
- •52. Биотехнологии,облегчающие селекционный процесс.
- •54.Задачи экологической биотехнологии.
- •55. Производство этанола.
- •56. Методы очистки сточных вод.
- •57. Аэробная и анаэробная переработка отходов
- •58. Биодеградация ксенобиотиков в окружающей среде.
- •63. Получение инсулина и соматостатина на основе методов генетической инженерии.
- •65.Получение интерферонов.
33. Конечные стадии получения целевого продукта.
Существует 5 стадий биотехнологического производства.
Две начальные стадии включают подготовку сырья и биологически действующего начала. В процессах инженерной энзимологии они обычно состоят из приготовления раствора субстрата с заданными свойствами (рН, температура, концентрация) и подготовки партии ферментного препарата данного типа, ферментного или иммобилизованного. При осуществлении микробиологического синтеза необходимы стадии приготовления питательной среды и поддержания чистой культуры, которая могла бы постоянно или по мере необходимости использоваться в процессе. Поддержание чистой культуры штамма-продуцента - главная задача любого микробиологического производства, поскольку высокоактивный, не претерпевший нежелательных изменений штамм может служить гарантией получения целевого продукта с заданными свойствами.
Третья стадия - стадия ферментации, на которой происходит образование целевого продукта. На этой стадии идет микробиологическое превращение компонентов питательной среды сначала в биомассу, затем, если это необходимо, в целевой метаболит.
На четвертом этапе из культуральной жидкости выделяют и очищают целевые продукты. Для промышленных микробиологических процессов характерно, как правило, образование очень разбавленных растворов и суспензий, содержащих, помимо целевого, большое количество других веществ. При этом приходится разделять смеси веществ очень близкой природы, находящихся в растворе в сравнимых концентрациях, весьма лабильных, легко подвергающихся термической деструкции.
Заключительная стадия биотехнологического производства - приготовление товарных форм продуктов. Общим свойством большинства продуктов микробиологического синтеза является их недостаточная стойкость к хранению, поскольку они склонны к разложению и в таком виде представляют прекрасную среду для развития посторонней микрофлоры. Это заставляет технологов принимать специальные меры для повышения сохранности препаратов промышленной биотехнологии. Кроме того, препараты для медицинских целей требуют специальных решений на стадии расфасовки и укупорки, так должны быть стерильными. Далее приводится характеристики каждой из стадий промышленного микробиологического синтеза.
34. Отделение биомассы. Разделениекультуральной жидкости и биомассы- сепарация. Это 1-ый этап очисткицелевого продукта. Иногда сепарации предшествуют спец. Обработка культуры- изменение рН, нагревание, добавление коагулянтовбелков.
Виды сепарации:
1. Флотация. Если клетки продуцента в биореакторе из-за низкой смачиваемости накапливаются в поверхностных слоях жидкости, то жидкость предварительно вспенивают, затем отделяют ее верхний слой с клетками. Флотаторы различных конструкций сцеживают, откачивают или соскребают пену, состоящую из пузырьков газа с прилипшими к ним клетками. Флотацию широко используют как первый этап отделения дрожжевой массы для осветления культуральной жидкости.
2. Фильтрация - задержание биомассы на пористой фильтрующей перегородке. Применяют фильтры однократного или многократно использования: барабанные, дисковые, ленточные, тарельчатые, карусельные, вакуум-фильтры, фильтр-прессы различных конструкций, мембранные фильтры. Диаметр пор может превышать размеры клеток. Иногда биомассу сдувают с поверхности фильтра сжатым воздухом или срезают специальным ножом.
3. Центрифугирование - осаждение взвешенных в жидкости частиц с применением центробежной силы. Требует более дорогостоящего оборудования, чем фильтрование. Поэтому оно оправдывает себя, если: а) суспензия фильтруется медленно; б) поставлена задача максимального освобождения культуральной жидкости от содержащихся частиц; в) необходимо наладить непрерывный процесс сепарации в условиях, когда фильтры рассчитаны только на периодическое действие.
Центрифугирование и фильтрация иногда реализуются в комбинации, в фильтрационных центрифугах. Перспективны для осаждения биомассы центрифуги-сеператоры, в которых биомасса оседает на стенках вращаемого цилиндра или на тарелках специальной тарельчатой вставки.