4

ВЯТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по учебной практике

студентов 4 курса обучения

по специальности 012400 «Микробиология»

специализация 012405 «Биотехнология»

Экспериментальное производство колибактерина

Входной контроль сырья, материалов и

реактивов

Киров 2005

Составители:

к.б.н., Лауреат Государственной премии РФ Г.В. Комоско;

д.т.н. А.А. Лещенко

В подготовке материалов принимали участие:

к.м.н. М.Ю. Луб;

м.н.с. О.А. Чигринова

Рецензенты:

к.м.н., с.н.с., Лауреат премии Правительства РФ А.Н. Шевцов, начальник научного отдела НИИ микробиологии МО РФ;

к.т.н., с.н.с. С.С. Анкер, руководитель лаборатории госконтроля качества препаратов крови, кровезаменителей и консервирующих растворов Кировского НИИ гематологии и переливания крови.

1. Краткие сведения о колибактерине

Колибактерин сухой представляет собой микробную массу живых колибацилл, лиофилизированных с добавлением одной из защитных сред: сахарозо-желатиновой или сахарозо-крахмальной.

Выпускается в сухом виде в ампулах или флаконах.

Препарат в ампулах или флаконах – кристаллическая или пористая масса желтовато-бежевого цвета.

Лечебный эффект препарата обусловлен антагонистическим действием микробных клеток колибацилл по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам.

Колибактерин сухой предназначен для лечения детей и взрослых, страдающих хроническими колитами различной этиологии, в том числе неспецифическими язвенными колитами, осложненными дисбактериозами, возникшими в результате применения антибиотиков, сульфаниламидных препаратов и других причин.

Специальным сырьем для приготовления колибактерина сухого является маточная культура производственного штамма E. coli М-17 и питательные среды.

Производственный штамм E. coli М-17 принадлежит к виду Escherichia coli семейства Enterobacteriaceae (Кауфман, 1959). Штамм представляет собой подвижные грамотрицательные короткие палочки с закругленными концами. Штамм E. coli М-17 является аэробом, хорошо растет на простых питательных средах. На мясо-пептонном агаре через 12…18 часов штамм образует круглые, с ровными краями, мутноватые, выпуклые колонии. При выращивании штамма в мясо-пептонном бульоне происходит равномерное помутнение среды через 2…4 часа. На среде Эндо штамм образует розовые колонии с металлическим блеском. Штамм расщепляет с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, манит, мальтозу, сахарозу. Желатина не разжижает. Оптимальная температура для роста микроба – 36…37 ⁰С. Штамм E. coli М-17 обладает антагонистической активностью в отношении шигелл и ряда других патогенных и условнопатогенных микроорганизмов кишечной группы. Антагонистическую активность производственного штамма E. coli М-17 оценивают в смешанных культурах по отношению к двум штаммам шигелл Флекснера и одному-двум штаммам шигелл Зоне. Антагонистический показатель по отношению к тест-штаммам шигелл Флекснера должен быть не ниже 60, а по отношению к тест-штаммам шигелл Зоне – не ниже 3.

Структурно процесс приготовления колибактерина сухого включает семь последовательных технологических стадий, представленных на рисунке. Этап приготовления питательных сред выполняется на стадии 2 перед получением нативной микробной взвеси.

Схема

процесса производства колибактерина

Входной контроль сырья, материалов, реактивов
Приготовление питательных сред
Приготовление производственной культуры штамма E.coli М-17
Глубинное культивирование
Мембранное концентрирование с использованием установки «Сартокон - мини»
Лиофильное высушивание

Рисунок