
- •Общая характеристика
- •Материал для микробиологического исследования
- •Стафилококковой инфекции
- •Морфология и микроскопия
- •Культивирование и культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Ферментация маннита
- •Плазмокоагулазную активность
- •Фибринолитическая способность
- •Продуцирование лецитиназы
- •Скрытая гемолитическая способность
- •Определение продуцирования стафилококками фермента днк-азы.
- •Биологическая проба
- •Дифференциальная диагностика
- •Факторы патогенности
- •Антигенная структура
- •Устойчивость
- •Оценка антибиотикочувствительности Staphylococcus spp. Препараты 1-го ряда ß -лактамные антибиотики
- •Оценка чувствительности к бензилпенициллину
- •Оценка чувствительности к оксациллину
- •Макролиды и линкозамиды
- •Патогенез
- •Эпизоотологический анализ
- •Метод дисков
- •Иммунитет
- •Биопрепараты
- •Лечение стафилококковой инфекции
- •Профилактика стафилококковой инфекции
Устойчивость
Стафилококки - относительно резистентные микроорганизмы. Прямые солнечные лучи убивают их только через несколько часов. В пыли они сохраняются 50-100 сут, в высушенном гное – более 200 сут, в бульонной культуре 3-4 мес, на полужидком агаре – 6 мес. В жидкой среде при 70°С погибают через один час, при 85°С - через 30 мин, при 100°С – за несколько секунд. Из дизинфектантов 1%-й раствор формалина и 2% -й раствор гидроксида натрия убивают их в течение 1 ч, 1% -й раствор хлорамина – через 2-5 мин. Стафилококки обладают высокой чувствительностью к бриллиантовому зеленому и пиоктанину.
Стафилококк золотистый разрушает перекись водорода. Стафилококк способен выживать в растворах натрия хлорида — поваренной соли. Стафилококк может выжить в потовой железе (вырабатывает фермент липазу, которая разрушает жиры и сальную пробку в устье волосяного мешочка).
Многие штаммы чувствительны к антибиотикам – бензилпенициллину, полусинтетическим пенициллинам, стрептомицину, левомицетину, тетрациклину, фузидину и другим, а также нитрофурановым препаратам. Однако довольно часто встречаются и резистентные к антибиотикам штаммы. Они, как правило, характеризуются множественной лекарственной устойчивостью, которая контролируется R-плазмидой и может распространяться путем трансдукции. Стафилококки, синтезирующие пенициллиназу (бета-лактамазу), способны разрушать некоторые пенициллины. Бета-лактамаза – фермент, гидролизирующий бета-лактамовое кольцо в окружающую среду, что приводит к снижению концентрации препарата. В этом случае для стафилококков характерна популяционная резистентность – большая доза инфекционного агента определяет более интенсивное развитие устойчивости. Ферменты кодируют индуцибельные гены, то есть ферменты более интенсивно синтезируются в присутствии препарата.
Резистентность, опосредованная хромосомным аппаратом, обычно связана с мутациями в локусе гена, кодирующего чувствительность к лекарственному препарату: на фоне применения антибактериального средства часто имеет место естественная селекция штаммов, способствующая выживанию и последующему доминированию популяций бактерий с хромосомной резистентностью. Подобным путем устойчивость к метициллину вырабатывают некоторые штаммы S. aureus. Большинство штаммов, устойчивых к метициллину, содержит ген (mecA), кодирующий низкий аффинитет пенициллинсвязывающих белков к бета-лактамовым антибиотикам. Их появление связывают с селекцией одного или нескольких штаммов-предшественников. Предположительно, штаммы-предшесвенники получили ген случайно из вне, но он стабильно закрепился в генофоре клетки и не передается горизонтально (от бактерии к бактерии через плазмиды).
К сульфаниламидам стафилококки весьма устойчивы.
Оценка антибиотикочувствительности Staphylococcus spp. Препараты 1-го ряда ß -лактамные антибиотики
Препаратами выбора для лечения стафилококковых инфекций (вызванных как S. aureus, так и коагулазонегативными стафилококками) являются ß-лактамные антибиотики, следовательно, в первую очередь необходимо исследовать чувствительность к ним микроорганизмов. Устойчивость стафилококков к ß -лактамным антибиотикам связана либо с продукцией ß –лактамаз, либо с наличием дополнительного пенициллинсвязывающего белка – ПСБ2а.
Выявление и дифференцировка этих механизмов резистентности позволяет надежно прогнозировать эффективность всех клинически доступных ß – лактамов непосредственно, не оценивая чувствительность к ним. При этом необходимо учитывать следующие закономерности:
Штаммы Staphylococcusspp., лишенные механизмов резистентности, в равной степени чувствительны ко всем ß –лактамным антибиотикам;
ß - лактамазы Staphylococcusspp. способны гидролизировать природные и полусинтетические пенициллины, за исключением оксациллина и метициллина, возможен частичный гидролиз цефалоспоринов I поколения. Бензилпенициллин – показательный препарат для природных и амино-, карбокси- и уреидопенициллинов. Все остальные ß – лактамы активны в отношении штаммов, продуцирующих ß –лактамазы;
Штаммы Staphylococcusspp., обладающие ПСБ2а, клинически устойчивы ко всем ß –лактамным антибиотикам. Маркером наличия ПСБ2а является устойчивость к оксациллину и метициллину.
Исторически первым антибиотиком, при использовании которого был выявлен механизм устойчивости, связанный с наличием дополнительного ПСБ2а, оказался метициллин, в результате чего появился термин «метициллинрезистентность». Для обозначения штаммов, обладающих таким механизмом устойчивости, мироко применяют термин MRSA(methicillinresistantStaphylococcusaureus). Метициллин в настоящее время в ветеринарной практике и лабораторной диагностике не применяют. Его практически полностью вытеснил оксациллин, соответсвенно в практике появился термин «оксациллинрезистентность» - синоним термина «метициллинрезистентность».
Таким образом, оценка антибиотикочувствительности Staphylococcusspp. к ß –лактамным антибиотикам основывается на двух тестах:
1)Оценка чувствительности к бензилпенициллину (детекции продукции ß –лактамаз);
2)Оценка чувствительности к оксациллину (детекции ПСБ2а или кодирующего его гена mecA).