Работа №3. Определение реакции мочи
Реакция зависит от вида животного, состава потребляемых кормов и т. п. У травоядных она имеет щелочную реакцию, обусловленную значительным количеством щелочного фосфора, у хищных — кислую, зависящую от содержания большого количества кислого фосфора и серной кислоты, образующейся из серии белков. У всеядных реакция мочи может быть щелочной и амфотерной.
Методика: а). Налить в пробирку 2 мл мочи и добавить 2 капли раствора бромтимолбляу. Изменение цвета индикатора покажет реакцию мочи. Желтый цвет способствует кислой реакции, бурый — слабокислой, травянистый - нейтральной, буровато- зелёный - слабощелочной, зелёный - щелочной.
б). На красную и синюю лакмусовые бумажки пипеткой нанести по 2 капли мочи. Красная синеет - реакция щелочная. Синяя краснеет - реакция кислая. Ни синяя, ни красная не изменяют цвета - нейтральная реакция. Красная синеет и синяя краснеет - реакция амфотерная.
Работа №4. Патологические составные части мочи
Сывороточные альбумины и глобулины попадают в мочу, когда нарушается почечная паренхима.
а). Качественный анализ путём кипячения мочи. Пробирку с мочой нагреть до кипения. В моче образуется хлопьевидный осадок. Прибавить три капли уксусной кислоты и взболтать: осадок остается, если состоит из белка: он исчезает, если состоит из фосфатов.
б). Проба мочи на сахар. В пробирку налить 1/3 мочи и влить 2 мл 10% раствора КОН, взболтать и прибавить по каплям 2,5% раствора медного купороса (до I мл). На поверхности появляется голубоватый осадок меди, растворяющийся при взбалтывании (особенно в присутствии сахара). В присутствии сахара (глюкозы) моча приобретает темно-синий цвет. Верхнюю часть содержимого пробирки подогреть (не кипятить). Глюкоза при подогревании восстанавливает окись меди, вследствие чего жидкость приобретает желтоватый цвет и помутнение верхнего слоя.
ВОПРОСЫ:
1. Из каких функциональных элементов построена почка?
2. Из каких отделов состоит нефрон?
3. Как принято в физиологии делить канальцевую систему нефрона?
4. Каковы особенности снабжения кровью нефрона?
5. Какое количества нефронов в почках?
6. Каковы размеры фильтрации в почках различных животных?
7. Какие процессы осуществляются в нефронах?
8. Каковы размеры реабсорбции воды в почках различных животных?
9. Какие вещества секретируются канальцевым эпителием почек?
10. Чем определяется интенсивность фильтрации в клубочках?
11. Чем отличается фильтрат капсулы сосудистого клубочка нефрона от крови?
12. Какие вещества фильтрата полностью обратно всасываются в канальцах почек, какие частично или совсем не всасываются?
13. Каков механизм реабсорбции?
14. Какая часть воды фильтрата всасывается активно в дистальном сегменте канальца и определяет размер мочеотделения?
15. Какая часть плазмы, прошедшей через сосуды почек, подвергается фильтрации?
16. Какие функции осуществляются почками?
17. В чём сущность почечной функции регуляции объёма внеклеточной воды?
18. В чём сущность почечной функции регуляции содержания постоянного натрия в крови?
19. В чём сущность почечной регуляции кислотно-щелочного равновесия?
20. В чём сущность почечной функции регуляции постоянства солевого состава плазмы?
21. В чём сущность выделительной функции почек?
22. Какова роль почек в интермидиарном обмене?
23. Каков механизм и как осуществляется регуляция деятельности почек?
ЗАНЯТИЕ 14. ФИЗИОЛОГИЯ ЛАКТАЦИИ
Лактация - процесс образования и выделения молока молочной железой. Начинается она после родов. В первое время выделяется молозиво, а затем нормальное молоко. Выведение секрета обеспечивается функцией миоэпителиальных альвеолярных элементов и гладкомышечных волокон молочных ходов и протоков.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
1. Ознакомиться с методикой получения разных фракций молока разового удоя.
2. Рассмотреть молочный жир под микроскопом.
3. Произвести подсчет жировых шариков.
4. Определить сахар в молоке.
5. Определить свёртываемость молока.
РАБОТА №1. Получение разных фракций молока разового удоя
Молоко, накапливающееся в молочной железе, в зависимости от места нахождения в вымени, условно подразделяется на три фракции: цистернальное, альвеолярное, остаточное.
Методика: Цистернальное молоко находится в пределах цистерны вымени. Для его получения животное фиксируют в станке. Вымя хорошо обмывают и насухо вытирают. Кончики сосков дизинфицируют и в их канал вводят стерильные катетеры. Вытекающее через катетеры молоко собирают и учитывают его объём. Альвеолярное молоко получают после удаления цистернальной порции молока. Для этого необходимо произвести массаж молочной железы и тщательное ее выдаивание (рефлекс молокоотдачи). Остаточное молоко не удаляется из вымени при доении. Получить его можно с помощью гормона окситоцина. После инъекции препарата через катетер быстро начинает вытекать остаточное молоко, которое собирают в отдельную посуду.
Больше всего жировых шариков будет в остаточной порции молока и меньше всего - в цистернальной ее части.
РАБОА №2. Рассмотрение молочного жира под микроскопом
Жир в молоке находится в виде стойкой эмульсии, которая обусловлена, главным образом, наличием белковой оболочки вокруг капелек жира. Сила поверхностного натяжения придает капелькам жира форму шариков, диаметр которых равен в среднем 3-4 микрона, с колебаниями от 0,5 до 20 микрон. Количество жировых шариков колеблется от 2 до 6 млн. в 1 мм3 цельного молока.
Методика: 5мл молока разбавить дистиллированной водой в стаканчике в 4-5 раз. Стеклянной палочкой перенести каплю разбавленного молока на предметное стекло, накрыть покровным и рассматривать под микроскопом. Видны жировые шарики неодинакового размера.
РАБОТА №3. Подсчет жировых шариков под микроскопом
Методика: Налить в мерную колбу на 250 мл до половины дистиллированной воды. Тщательно перемешать молоко не обра
зуя пены, перенести пипеткой I мл молока в колбу. Добавить до метки воды и взболтать содержимое колбы. Не давая жировым шарикам отстояться, перенести каплю разбавленного молока на сетку камеры Горяева, с притертым покровным стеклом. Подсчитать жировые шарики в 5 больших квадратах, деленных на 16 маленьких. Полученную сумму умножить на 12500.
РАБОТА № 4. Определение сахара в молоке
Наличие в молоке лактозы, отсутствующей в крови, является одним из показателей того, что в молочной железе протекают процессы синтеза. В молоке содержится от 3 до 5% молочного сахара, который по питательной ценности не уступает свекловичному сахару. Он легко усваивается организмом и способствует нормальному росту и развитию новорожденного животного.
МЕТОДИКА: Отмерить в колбу 5 мл молока и 25 мл дистиллированной воды. Прилить по каплям уксусную кислоту до выпадения хлопьев казеина, отфильтровать выпавший осадок. Вскипятить фильтрат. Отфильтровать выпавший осадок и с полученным безбелковым фильтратом проделать пробу Троммера. Взять 2 мл фильтрата, прибавить 1мл 10% раствора едкого натрия и по каплям раствор медного купороса до неисчезающего голубого окрашивания. Содержимое пробирки нагреть, при нагревании синий цвет гидрата окиси меди переходит в желтый цвет гидрата закиси меди. При дальнейшем нагревании желтый цвет переходит в красновато - коричневый образуется безводная закись меди (положительная реакция). Сахара, содержащие свободную альдегидную группу или кетоновую, восстанавливают металлы в щелочной среде. Если же желтая и красная окраски не появляются, то это свидетельствует об отсутствии сахара в молоке.