Работа № 1. Действие желудочного сока на белок
Сок, выделяемый, железами фундальной части желудка, содержит следующие ферменты: протеолитические ферменты - пепсин, катализирующий гидролиз пептидных связей белковых молекул, химозин (ренин) - створаживающий молоко, липолитический фермент - липаза, гидролизирующий эмульгированные нейтральные жиры на глицерин и жирные кислоты. Пепсин обнаруживается в соке всех позвоночных. Он выделяется в неактивной форме в виде пепсиногена, который под влиянием соляной кислоты превращается в активный пепсин. Протеолитическое действие сока определяют качественными цветными реакциями, обнаруживающими продукты гидролиза.
Ход опыта.
Взять четыре пронумерованные пробирки и внести в них по кусочку белка (фибрина). Затем в пробирки прилить: 2 мл желудочного сока; 2 мл прокипяченного желудочного сока; 0,5% раствор HCl и 2 мл желудочного сока, нейтрализованного содой так, как показано в таблице 18:
|
Пробирки |
Содержимое пробирки |
Результаты |
|
1. |
2 мл желудочного сока + фибрин |
|
|
2. |
2 мл прокипяченного жел. сока + фибрин |
|
|
3. |
2 мл 0,5% р-ра HCl + фибрин |
|
|
4. |
2 мл жел. сока, нейтрализованного содой + фибрин |
|
Пробирки помещают в водяную баню или термостат при t=37-39C на 25-30 минут. Расщепление белка наступит только в первой пробирке, во второй - фермент разрушен кипячением, в третьей, где имеется только раствор HCl, фибрин будет набухшим, но не расщепившимся, в четвертой - создается щелочная среда, в которой фермент оказывается неактивным. Далее ставят биуретовую пробу. Это цветная реакция на белки и продукты неполного расщепления - альбумозы и пептоны. К содержимому каждой пробирки добавляют по 2 мл 10% раствора едкого натрия. Затем ее взбалтывают, вносят по 3 капли 1% раствора медного купороса. В пробирке, где наступило расщепление, содержимое будет иметь розовый, а где находился не переваренный белок – сине-фиолетовый цвет.
РАБОТА №2. Действие химозина на молоко
Фермент химозин (ренин) в большом количестве содержится в сычужном соке телят, поэтому его называют сычужным ферментом. Специфичность ферментативного действия химозина ограничена его коагулирующим, створаживающим влиянием на молоко.
Створаживание является конечным результатом расщепления белка молока - казеина на параказеин и сывороточную альбумозу. Образовавшийся параказеин в присутствие ионов кальция превращается в нерастворимую кальциевую соль, выпадающую в виде осадка.
ХОД ОПЫТА.
Пронумеровать пробирки. В пробирку №1 налить 1мл желудочного сока, в пробирку №2-1мл прокипяченного желудочного сока, в пробирку №3–1мл желудочного сока, нейтрализованного содой. Во все пробирки налить по 5 мл свежего молока и поставить их в водяную баню или термостат при температуре 37-39° С на 10 минут. Извлечь пробирки и отметить, что молоко свернулось в первой и третьей пробирках, в пробирке №2 свертывания не произошло, т.к. ферменты разрушены при кипячении желудочного сока. Фермент химозин свертывает молоко в кислой, нейтральной и слабощелочной среде.
ВОПРОСЫ:
1. Какую реакцию имеет желудочный сок, и чем она обусловлена?
2. Как изменяется белок и костная ткань под действием HCl?
3. Какие ферменты содержатся в желудочном соке?
4. В какой среде активны протеолитические ферменты?
ЗАНЯТИЕ 13. ФИЗИОЛОГИЯ ВЫДЕЛЕНИЯ. ИЗУЧЕНИЕ ПРОЦЕСА МОЧЕОТДЕЛЕНИЯ, СОСТАВА И СВОЙСТВ МОЧИ
В процессе обмена веществ в организме накапливаются различные соединения, которые постоянно удаляются из тканей во внешнюю среду. Это является одним из важных условий, обеспечивающих нормальную жизнедеятельность всего организма. Значительная часть вредных продуктов распада выделяется почками, изучение которых позволит характеризовать фильтрационную их способность и участие в обмене различных веществ. В выделительных процессах определенное значение имеют и другие органы. Так, через дыхательную систему удаляются водяные пары и углекислый газ, через кожу — пот. Пищеварительные органы принимают участие в выделении из организма некоторых солей, красок и лекарственных веществ. Выделительная функция различных органов обеспечивает поддержание постоянного состава внутренней среды — ионного баланса, кислотно-щелочного равновесия и др.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
1. Ознакомиться с процессом мочеотделения.
2. Изучить состав и физико-химические свойства мочи.
РАБОТА №1. Изучение мочеотделения у собаки с выведенными мочеточниками
а). Определить: отделяется моча непрерывно или только в связи с приёмом корма и воды.
б). Определить: как изменяется работа почек после введения в организм воды (при избытке воды в организме). Сделать заключение о сущности гидроуретической функции почек.
в). Определить: выделяются ли почками чужеродные вещества - введенная в организм краска феноловый красный. Сделать заключение о сущности выделительной функции почек.
РАБОТА №2. Определение удельного веса, мочи
Методика: в цилиндр с мочой осторожно опустить урометр так, чтобы он свободно плавал, не касаясь стенок цилиндра. Деление шкалы урометра, совпадающее с нижним мениском жидкости, покажет удельный вес мочи. Если температура мочи выше, чем 15° С, то на каждые три градуса к показанию урометра прибавляется по 0,001: если температура ниже 15°С, то на каждые три градуса из показателя урометра вычитается 0,001. Удельный вес мочи здоровых животных равен: лошади 1,025-1,055, крупного рогатого скота 1,025-1,050, собаки 1,010-1,050, кошки 1,020-1,040, овцы и козы 1,015-1,065, кролика 1,010-1,015, свиньи 1,018-1,022