ЛЕКЦИЯ №6

Методы лабораторной диагностики

ассоциированной кишечной инфекции молодняка животных,

вызываемой патогенными энтеробактериями,

клебсиеллеза и протеоза животных

ПЛАН

1. Методы лабораторной диагностики ассоциированной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями

2. Методы лабораторной диагностики клебсиеллеза животных

3. Методы лабораторной диагностики протеоза животных

Ассоциированная кишечная инфекция – остропротекающая инфекционная болезнь молодняка разных видов сельскохозяйственных животных, которая имеет полиэтиологическую природу и вызывается двумя-тремя и более видами патогенных энтеробактерий (семейства Enterobacteriaceae), относящимся к родам Escherichia, Citrobacter, Proteus, Morganella, Klebsiella, Salmonella, Shigеlla, Yersinia.

Помимо указанных микроорганизмов возбудителями болезни могут быть также бактерий других родов и семейств - Pseudomonas, Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium и др.

Наряду, с бактериальными агентами нередко (особенно на крупных фермах) болезнь обусловливают корона - и ротавирусы.

2. Систематика возбудителя и этиология болезни

Царство Procariotae

Отдел 2. Gracilicutes (gracilus- тонкий, стройный, cutes – кожа).

Группа 5. Факультативно анаэробные грам “-” палочки

Сем. Enterobacteriaceae

Род Escherichia

Вид E. Coli

Род Salmonella

Вид S.bongori и S. enterica

Род Citrobacter

Вид С.freundii, С. diversus и др.

Род Klebsiellа

Вид K. рneumonia, К. terrigena и К. planticola

Род Proteus

Вид Р.mirabilis, P.vulgaris и P myxofaciens

Род Yersinia

Вид Y.enterocolitica, Y.pestis и Y.pseudotuberculosis

Род Enterobacter

Вид Е.aerogenes, Е.cloacae и др.

Род Morganella

Вид М. morganii

Род Shigеlla

Вид S.flexneri, S.dysenteriae и др.

Семейство Enterobacteriaceae объединяет обширную группу грамотрицательных палочек, подвижных (перетрихов) и неподвижных, образующих или не образующих капсулы, не образуют спор. Энтеробактерии – аэробы или факультативные анаэробы, хорошо растут на обычных питательных средах. Это семейство объединяет 14 родов с различным количеством видов.

Род Escherichia и Salmonella см. лекцию предыдущую.

Род Citrobacter получил название от слов citrus (лимон) и bacter (мелкие палочки). Они относятся к естественным обитателям кишечного тракта, обнаруживаются в фекалиях, моче, на объектах внешней среды, в продуктах растительного и животного происхождения. При определенных условиях могут вызвать заболевание.

Citrobacter – мелкие палочки, как правило, подвижные, благодаря наличию перитрихиально расположенных жгутиков, капсул не образуют, грам “-”. На Эндо имеют розовую окраску, не свойственен метал блеск, меньше по размеру колонии, чем E.coli. Лактоза “+” и “-” розовокрасную и темный непросвечивающийся центр и серый ободочек.

Род Klebsiella назван в 1975 г. честь немецкого бактериолога Э. Клебса, выделившего клебсиелл от умерших людей при крупозной пневмонии. Представители этого рода широко распространены в природе часто встречаются в растительных продуктах, а также в мясе и молоке. У молодняка животных клебсиеллы вызывают заболевания острых желудочно-кишечные заболевания, пневмоний, сепсисе, суставов. У взрослых животных могут быть причиной мастита. (см. клебсиеллез).

Род Proteus впервые выделил Г. Хаузер в 1885 г. из гниющего мяса, они обнаруживаются в фекалиях многих видов животных, людей, в сточных водах, почве (с гниющими органическими субстратами). Способность их менять внешние проявления роста на агаровых пластинчатых средах послужила основанием для наименования Proteus (бог, способный менять свой облик). Род представлен 7-ю видами: P.vulgaris, P. mirabilis, P. rettgeri, P. inconstans, P.morganii, P.myxofaciens, P.penneri. (см. протеоз).

Род Yersinia назван в честь французского исследователя Иерсена, впервые выделившего возбудителя чумы. Объединяет семь видов возбудителей, в том числе чумы людей Y.pestis, псевдотуберкулеза -Y.pseudotuberculosis и иерсиниоза - Y.enterocolitica.

Бактерии чумы выделены более чем от 160 видов грызунов; эти микроорганизмы патогенны для человека и многих видов животных. Псевдотуберкулезом болеют дикие и домашние животные; у них наблюдается интоксикация, узелковые поражения органов, л/у, общая аллергическая реакция, болеет и человек.

Первые сведения о выделении культур со свойствами возбудителя кишечного иерсиниоза появились в 30-е годы 20 столетия, им болеют грызуны, домашние и сельскохозяйственные животные (собаки, кошки, свиньи, к.р.с. и др., у которых заболевание нередко заканчивается смертью. Они долгое время остаются бактерионосителями и инфицируют объекты внешней среды, а также продукты растительного и животного происхождения. У людей иерсиниоз протекает в виде генерализованной инфекции.

Иерсинии – это полиморфные палочки с закругленными концами от 0,8- 1,2 х 0,5-0,8 мкм. Располагаются в мазках одиночно, но иногда образуют длинные цепочки, переплетающиеся нити. Грам “-”, спор и капсул не образуют. Выращенные при 4-25⁰С подвижны, при 35-37⁰С подвижность утрачивают. Некоторые штаммы неподвижны при всех температурах. Это психрофильные микроорганизмы, т.е. размножаются в широком температурном диапазоне – от 0 до 40⁰С. Оптимальная температура для роста 22-28⁰С. Бактерии культивируют на МПА, агарах Мартена и Хоттингера, Эндо. Размножаются даже в физиологическом растворе. Время культивирования 18-72 часа.

Через сутки инкубации в термостате при 22-28⁰С на агаре Эндо вырастают мелкие (росинки), круглые, выпуклые, бесцветные, блестящие колонии. На 2-е сутки колонии увеличиваются в диаметре и у Y.enterocolitica приобретают розовый оттенок.

Род Enterobacter объединяет бактерии, которые имеют признаки, сходные с возбудителем смертельной септицемии саранчи, описанные Д. Эррелем. Различные виды энтеробактерий в последние годы выделяют при острых ж-к заболеваниях, диспепсии, гнойных поражениях мозговых оболочек, сепсисе у животных и людей. Энтеробактерии – подвижные, грам “-” палочки с перитрихиальным расположением жгутиков, некоторые штаммы имеют капсулу.

Род Shigеlla получил название по имени японского ученого К. Шига, который детально изучил в 1898 г. Бактерии, выделенные при эпидемии дизентерии. Несмотря на то, что бактериальная дизентерия - антропонозная инфекция, шигеллы способны вызывать заболевания у обезьян, а также носительство возбудителей выявлено у некоторых молодых животных.

Род Morganella представлен одним видом morganii. Выделяют из кишечного содержимого млекопитающих и рептилий, может вызывать диарею у молодняка животных.

Роды Erwina, Serratia, Hafnia и Edwardsiella, выделяются от животных и людей, и являются причиной кишечных инфекций гораздо реже вышеперечисленных.