- •1. Предмет и задачи биотехнологии.
- •2.Отличие современной биотехнологии от традиционных микробиологических производств.
- •3. Знач-е Биотехнологии, основные тенденции и перспективные направления науки в Беларуси.
- •4. Использование микроорганизмов (дрожжей, бактерий, грибов, водорослей) в биотехнологии.
- •5. Производство кормового белка
- •6.Микробиологический синтез средств защиты у растений.
- •7. Требования к продуцентам:
- •8. Выделение и селекция микроорганизмов-продуцентов бав.
- •9. Использование микробных почвоудобрительных препаратов
- •10. Методы рекомбинантных днк.
- •11. Клонирование и экспрессия генов в различных организмах.
- •13.Векторные сис-мы,применяемы для клонир-я в кл-х прокариот-х орг-в.
- •14.Типы векторов:плазмидные и фаговые, космиды и фазмиды.
- •15.Получение трансгенных растений
- •16. Применение методов генет-кой инженерии для улучшения аминокислотного состава запасных белков растений.
- •18. Устойчивость растений к фитопатогенам и насекомым вредителям, гербицидам, абиотическим стрессам.
- •19. Использование генетической инженерии в животноводстве
- •20. Требования, предъявляемые к питательным субстратам, использующимся в биотехнологических процессах.
- •21.Основные типы пит-х сред,использующ-ся в биотехнологии.
- •23. Питательные среды для ферментационных процессов
- •29. Хемостаты и турбидостаты.
9. Использование микробных почвоудобрительных препаратов
Витамины выделяются как живыми бактериями и грибами, так и отмершими микробными клетками. Некот-е витамины выд-тся корнями растений. Больше всего микроорг-мы обр-ют тиамина, рибофлавина, никотиновой, аскорбиновой кислоты, пиридоксина и др. Их содержание в почвах колеблется в зависимости от типа почвы, состава почвенной микрофлоры, степени окультуренности и т.д. Витамины оказывают большое влияние на развитие корневой системы растений. Например, при недостатке тиамина плохо развиваются корневые системы льна, клевера и других растений. Для гороха, люцерны и других культур необходима никотиновая кислота.
Отдельные виды плесневых грибов выделяют антибиотики (пенициллин), актиномицеты – стрептомицин, левомицетин и т.д. Поступая в клетки растений, антибиотики повышают бактерицидные свойства клеточного сока. Растения становятся устойчивыми против инфекционных заболеваний, повышается их иммунитет.
Технология эффективных микроорганизмов (ЭМ-технология) была разработана в Японии в 80-х годах. Она получила признание и внедряется во многих странах мира. ЭМ препараты предст. собой концентрат из 84 микроорг-мов, противоположных по способу обмена в-в и способу существования, причем отходы или продукты жизнедеятельности одной группы микробов дают питание или утилизируются другой группой, при этом в почве накапливаются полезные для растений вещества – ферменты, аминокислоты, нуклеиновые кислоты и другие биологические вещества.
10. Методы рекомбинантных днк.
Процесс конструирования рекомбинантных ДНК предполагает существование:1.Четких представлений о молекулярных механизмах функционирования генов, подлежащих клонированию.2.Способов выделения этих генов из живых объектов или их химического синтеза.
3.Методических возможностей сшить нужные гены в нужной последовательности с выполнением правил, обеспечивающих эффективную экспрессию.4.Методов введения рекомбинантных ДНК в рецепиентный организм.
Любая схема манипуляций генной инженерии содержит следующие этапы:1.Получение фрагментов ДНК (генов), содержащих определенную информацию2.Включение фрагмента ДНК в вектор 3.Введение вектора в клетку хозяина4.Экспрессия
С момента введения рекомбинантной ДНК в клетку начинается молекулярное клонирование.
К наиболее важным методам биотехнологии рекомбинантных ДНК относятся следующие:1.Специфическое расщепление ДНК рестрикцирующими нуклеазами.2.Быстроесеквинирование всех нуклеотидов в очищенном фрагменте ДНК, позволяющее определить точные границы гена.3.Гибридизация нуклеиновых кислот, позволяющая выявить специфические нуклеотидные последовательности на основе их способности связывать комплементарные основания. 4.Клонирование ДНК, позволяет ввести ДНК – фрагмент в самореплецирующий ген. аппарат.5.Ген. инженерия – модификация версии генов и их внедрение в клетку или орг-м.
Для расщепления молекул ДНК и конструирования рекомбинантной ДНК необходим ряд ферментов: 1.Ферменты, осуществляющие фрагментацию ДНК – рестриктирующиеэндонуклеазы.2.Ферменты, синтезирующие фрагменты ДНК на матрице РНК –обратная транскриптаза.3.Ферменты,сшивающие фрагменты ДНК–ДНК–лигаза Т4 и E.Coli.4.Ферменты, изменяющие структуру концевых фрагментов ДНК.5.Фрагменты, применяемые для приготовлениягибридизационных проб – ДНК – полимераза E. Coli и фага Т4.
Одним из способов получения ДНК материала является расщепление ДНК, которое осуществляется ферментамирестриктазами.
