4.Анализ культуральной жидкости после окончания процесса ферментации продуцента антибиотика

4.1. Определение рН.

Определение рН провели по лакмусовой бумажке, предварительно перемешав содержимое колбы.

рН= 5

4.2.Анализ содержания редуцирующих сахаров.

Проводим то же самое, что и в пункте 1.

По уменьшению концентрации глюкозы, количеству глюкозы и pH, можно сделать вывод о том, как прошла ферментация.

Результаты выполнения работы

Показатели	рН	Разведение		Концентрация глюкозы по кривой	Кол-во глюкозы, мг/мл
		Р1	Р2
Исходная питательная среда	7	15	2	340мкг	5,1
Культуральная жидкость	5	15	2	325 мкг	4,9

5.Посев культуры-продуцента антибиотика с косяка на агаризованную среду в чашки Петри.

Колбу со стерильной агаризованной средой поместили на водяную баню для расплавления агар-агара, периодически помешивая вращательным движением. Немного охладили до 70-80 ^̊ С и разлили в стерильные чашки Петри. Для этого слегка обожгли горло колбы в пламени спиртовки, затем приоткрыли крышку чашки Петри левой рукой и быстро налили расплавленную среду так, чтобы дно было полностью покрыто. Равномерно распределили среду и оставили застывать. Далее продезинфицировали поверхность стола, зажгли спиртовку. Пробирку с продуцентом антибиотика взяли в левую руку, чтобы была видна вся поверхность питательной среды с выросшей на ней культурой. В правую руку взяли бактериологическую петлю и простерилизовали в пламени спиртовки. Не выпуская петлю из рук, мизинцем и безымянным пальцем вынули ватную пробку из пробирки. Ввели петлю в пробирку и захватили небольшое количество материала, содержащего микроорганизмы, с поверхности агара. Закрыли пробирку пробкой и положили ее на стол. Посеяли на чашку Петри штриховым методом. Отправили чашку Петри на термостат при 28 ̊С.

6.Посев культуры продуцента фермента на сыпучий субстрат.

Этот посев осуществляется взвесью спор гриба стерильной пипеткой. Взвесь спор гриба готовят путем смыва спор микроорганизма с поверхности агаризированной среды физиологическим раствором, которую заем переливают в стерильную колбу.

Протерли поверхность стола дезинфицирующим раствором, зажгли спиртовку. Взяли стерильную пипетку, освободили от бумаги, провели в пламени горелки. Асептично набрали взвесь спор продуцента фермента из пробирки. Открыли рядом с пламенем горелки колбу с сыпучим субстратом, ввели туда пипетку и равномерно распределили взвесь по всей поверхности зерна. Закрыли колбу, поместили ее в термостат на 24- 26 ̊С.

7.Описание характера развития продуцента антибиотика на сыпучей питательной среде.

Характер роста продуцента фермента на сыпучем субстрате отличается единообразием. Культура гриба обрастает зер­на перловой крупы.

Описание провели по следующей схеме:

— название продуцента;

— состав сыпучей среды;

— возраст культуры, температура выращивания;

— степень обрастания поверхности субстрата.

Результаты выполнения работы

Описание характера развития продуцента антибиотика на сыпучей питательной среде:

Продуцент – Asp. oryzae

Среда – перловая крупа

T= 24-26 ^̊C 10-12 суток

Цвет – в6, темно-бурый, темно-гнедой

Степень обрастания – 90%