119. Вирусы гриппа. Характеристика. Принципы лабораторной диагностики и профилактики.

Таксономия: семейство – Orthomyxoviridae, род Influenzavirus. Различают 3 серотипа вируса гриппа: А, В и С.

Структура вируса гриппа А. Возбудитель гриппа имеет однонитчатую РНК, состоящую из 8 фрагментов. Подобная сегментарность позволяет двум вирусам при взаимодействии легко обмениваться генетической информацией и тем самым способствует высокой изменчивости вируса. Капсомеры уложены вокруг нити РНК по спиральному типу. Вирус гриппа имеет также суперкапсид с отростками. Вирус полиморфен: встречаются сферические, палочковидные, нитевидные формы.

Антигенная структура. Внутренние и поверхностные антигены. Внутренние антигены состоят из РНК и белков капсида, представлены нуклеопротеином (NP-белком) и М-белками. NP-и М-белки — это типоспецифические антигены. NP-белок способен связывать комп­лемент, поэтому тип вируса гриппа обычно определяют в РСК. Поверхностные антигены — это гемагглютинин и нейраминидаза. Их структуру, которая определяет подтип вируса гриппа, исследуют в РТГА, благодаря торможению специфическими антителами гемагглютинации вирусов. Внутренний антиген – стимулирует Т-киллеры и макрофаги, не вызывает антителообразования. У вируса имеются 3 разновидности Н- и 2 разновидности N – антигенов.

Иммунитет: Во время заболевания в противовирусном ответе участвуют факторы неспецифической защиты: выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, альфа-интерферон, специфические IgA в секретах респираторного тракта, которые обеспечивают местный иммунитет.

Клеточный иммунитет - NK-клетки и специфические цитотоксические Т-лимфоциты, действующие на клетки, инфицированные вирусом. Постинфекционный иммунитет достаточно длителен и прочен, но высокоспецифичен (типо-, подтипо-, вариантоспецифичен).

Микробиологическая диагностика. Диагноз «грипп» базируется на (1) выделении и идентификации вируса, (2) определении вирусных АГ в клетках больного, (3) поиске вирусоспецифических антител в сыворотке больного. При отборе материала для исследования важно получить пораженные вирусом клетки, так как именно в них происходит репликация вирусов. Материал для исследования — носоглоточное отделяемое. Для определения антител исследуют парные сыворотки крови больного.

Экспресс-диагностика. Обнаруживают вирусные антигены в исследуемом материале с помощью РИФ (прямой и непрямой варианты) и ИФА. Можно обнаружить в материале геном вирусов при помощи ПЦР.

Вирусологический метод. Оптимальная лабораторная модель для культивирования штаммов—куриный эмбрион. Индикацию вирусов проводят в зависимости от лабораторной модели (по гибели, по клиническим и патоморфологическим изменениям, ЦПД, образованию «бляшек», «цветной пробе», РГА и гемадсорбции). Идентифицируют вирусы по антигенной структуре. Применяют РСК, РТГА, ИФА, РБН (реакцию биологической нейтрализации) вирусов и др. Обычно тип вирусов гриппа определяют в РСК, подтип - в РТГА.

Серологический метод. Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов.

Лечение: симптоматическое/патогенетическое. А-интерферон – угнетает размножение вирусов.

1. Препараты - индукторы эндогенного интерферона.

Этиотропное лечение - ремантидин – препятствует репродукции вирусов, блокируя М-белки. Арбидол – действует на вирусы А и В.

2. Препараты - ингибиторы нейраминидазы. Блокируют выход вирусных частиц из инфицированных клеток.

При тяжелых формах – противогриппозный донорский иммуноглобулин и нормальный человеческий иммуноглобулин для в\в введения.

Профилактика: Неспецифическая профилактика – противоэпидемические мероприятия, препараты а-интерферона и оксолина.

Специфическая – вакцины. Живые аллантоисные интраназальная и подкожная, тривалентные инактивированные цельно-вирионные гриппозные интраназальная и парентеральная-подкожная (Грипповак), химические Агриппал, полимер-субъединичная «Гриппол». Живые вакцины создают наиболее полноценный, в том числе местный, иммунитет.

120.Вирусы ЕСНО. Роль в патологии человека. Принципы лабораторной диагностики Основанием для выделения представителей в особую группу кишечных вирусов послужило полное отсутствие патогенного действия на лабораторных животных. В связи с трудностями их систематики вирусы назвали кишечными [от англ. enteric] цитопатогенными [от англ. cytopathogenic] человеческими [от англ. human] «сиротскими» [от англ. orphan] (то есть неклассифицированными) вирусами. Эпидемиология ЕСНО-вирусных инфекций аналогична эпидемиологии инфекций, вызываемых полиовирусами и вирусами Коксаки. Заражение ЕСНО-вирусами происходит фекально-оральным путём, реже - ингаляционным. По структуре типо-специфического Аг выделяют 34 сероварианта. Вирусы 12 серовариантов проявляют гемагглютинирующую активность. Наибольшую эпидемическую опасность проявляют вирусы 11-го, 18-го и 19-го серовариантов. Как правило, возбудитель диссеминирует гематогенно и оседает в органах, к тканям которых тропен возбудитель. Вирусы сероваров 8-11 и 20 вызывают «простудные» инфекции; сероварианты 2-9, 12, 14, 16, 21 — асептические менингиты, протекающие относительно легко, не вызывая осложнений (в большинстве случаев наблюдают спонтанное выздоровление). Реже наблюдают восходящие параличи и энцефалиты, напоминающие поражения, вызываемые полиовирусами. Сероварианты 9 и 16 вызывают лихорадочное состояние, сопровождающееся кореподобными высыпаниями. Материалами для микробиологической диагностики служат испражнения, смывы и мазки из зева, кровь и СМЖ. Выделение возбудителя проводят заражением клеток почек обезьян. Принципы идентификации сходны для всех энтеровирусов. Сывороточные AT (в парных сыворотках, забираемых в начале и на 2-3-ю неделю болезни) выявляют в РН, РСК и РТГА. Средства терапии и эффективной профилактики ЕСНО-вирусных инфекций отсутствуют; проводят симптоматическое лечение.

121.Характеристика аденовирусов. Роль в патологии человека. Принципы лабораторной диагностики. Респираторные аденовирусы впервые выделены У. Роу и соавт. (1953) из тканей миндалин и аденоидов у детей, в связи с чем вирусы и получили своё название. Патогенные для человека вирусы включены в состав рода Mastadenovirus (аденовирусы млекопитающих) семейства Adenoviridae. Аденовирусы организованы по принципу кубической симметрии и не имеют суперкапсида. Геном представлен линейной молекулой двухнитевой ДНК. ДНК, связываясь с белками, формирует плотную сердцевину вируса, видимую при электронной микроскопии. Средний диаметр вириона равен 60-90 нм. Капсид состоит из 252 капсомеров, 240 из них (гексоны) образуют его грани, 12 (пентоны) - полигональные основания и прикреплённые к нему нити. Гексоны определяют токсическую активность; пентоны и нити - гемагглютинирующие свойства. Транскрипция и репликация происходят в ядре, трансляция - в цитоплазме.

Эпидемиология. Аденовирусные инфекции человека составляют 5-10% всех вирусных заболеваний, большая часть поражений приходится на детский возраст (около 75%); при этом 35-40% случаев регистрируют у детей до 5 лет, остальные - в возрасте до 14 лет. Резервуар инфекции - больной человек; вирус передаётся воздушно-капельным и контактным путём.

Антигенная структура. В настоящее время насчитывают около 80 серовариантов. Каждый вирион имеет не менее семи антигенных детерминант. Гексоны содержат группоспецифические А-Аг. Пентоны содержат В-Аг, по структуре которых все аденовирусы разделяют на три подгруппы. Нити содержат типоспецифический С-Аг; по его структуре выделяют 41 серовариант. Нуклеокапсид является комплементсвязывающим Аг, идентичным для различных серовариантов.

Патогенез. Размножение вирусов происходит в клетках слизистых оболочек верхних отделов воздухоносных путей и конъюнктивы. Затем они проникают в кровоток, циркулируют в нём в течение нескольких суток, а затем мигрируют в нижние отделы дыхательного тракта.

Клиника. Продолжительность инкубационного периода составляет 6-9 сут. Наиболее часто отмечают ОРВИ, протекающие по типу гриппоподобных поражений. Основные возбудители - виру­сы 3-го, 4-го и 7-го серовариантов. Инфекции нижних отделов дыхательных путей у новорождён­ных сопровождаются поражениями, клинически не отличимыми от инфекций, вызываемых вирусом парагриппа 3-го типа и PC-вирусом. Основные возбудители - вирусы серовариантов 1, 2, 3, 5, 6, 7 и 21; более тяжёлые поражения вызывают сероварианты 1, 2 и 5.

Лабораторная диагностика. Проводят вирусоскопические и серологические методы. Материалом для исследований служат слизь из зева, отделяемое носа и конъюнктивы, кровь. Для экспресс-диагностики используют РИФ, позволяющую выявить Аг вирусов в носовом отделяемом и клетках слизистых оболочек. Выделение возбудителя проводят заражением культур первично-трипсинизированных клеток эмбриона человека. Идентификацию аденовирусов проводят по цитопатическому эффекту и в РСК, позволяющей выявить общий комплементсвязывающий Аг. Серологическую принадлежность определяют в РТГА и РН с помощью типоспецифических антисывороток. Нарастание титров вирусспе­цифических AT в парных сыворотках определяют в РСК. Титры типоспецифических AT определяют в РТГА и РН с эталонными штаммами различных серовариантов в культурах клеток. Лечение симптоматическое; средства специфической лекарственной терапии отсутствуют. Для профилактики дыхательных поражений разработаны эффективные живые вакцины, включающие ослабленные вирусы доминирующих серовариантов. Их широкое применение ограничено сложившимся представлением о способности аденовирусов вызывать злокачественные трансформации клеток у человека.

122.Общая характеристика онкогенных вирусов. Этапы вирусного онкогенеза РНК-содержащие: семейство Retroviridae.

ДНК-содержащие: семейства Papillomaviridae, Polyomaviridae, Adenoviridae 12, 18, 31, Hepadnaviridae, Herpesviridae, Poxviridae

Семейство Retroviridae включает 7 родов.

Онковирусы являются сложноорганизованными вирусами. Вирионы построены из сердцевины, окруженной липопротеиновой оболочкой с шипами. Размеры и формы шипов, а также локализация сердцевины служат основой для подразделения вирусов на 4 морфологических типа (А, В, С, D), а также вирус бычьего лейкоза.

Капсид онковирусов построен по кубическому типу симметрии. В него заключены нуклеопротеин и фермент ревертаза. Ревертаза обладает способностью транскрибировать ДНК. Геном – 2 идентичные цепи РНК.

Культивирование вирусов: не культивируются на куриных эмбрионах, культивируются в организме чувствительных животных, в культурах клеток.

Репродукция вирусов: проникают в клетку путем эндоцитоза. 3 этапа: синтез ДНК, на матрице РНК; ферментативное расщепление матричной РНК; синтез комплементарной нити ДНК на матрице первой нити ДНК.

К семейству Retroviridae относится примерно 150 видов вирусов, вызывающих развитие опухолей у животных, и только 4 вида вызывают опухоли у человека: HTLV-1, HTLV-2, ВИЧ-1,ВИЧ-2.

Вирусы Т-клеточного лейкоза человека

К семейству Retroviridae роду Deltaretrovirus относятся вирусы, поражающие CD4 Т-лимфоциты, для которых доказана этиологическая роль в развитии опухолевого процесса у людей: HTLV-1 и HTLV-2

Вирус HTLV-1 является возбудителем Т-клеточного лимфолейкоза взрослых. Он является экзогенным онковирусом, который, в отличие от других онковирусов, имеет два дополнительных структурных гена: tax и rех.

Продукт tax-гена действует на терминальные повторы LTR, стимулируя синтез вирусной иРНК, а также образование ИЛ-2 рецепторов на поверхности зараженной клетки. Продукт rex-гена определяет очередность трансляции вирусных иРНК.

HTLV-2 был изолирован от больного волосисто-клеточным лейкозом.

Оба вируса передаются половым, трансфузионным и трансплацентарным путями.

Семейство Papillomaviridae – вирус папилломы человека, собак. Вызывают инфекцию в клетках плоского эпителия. Доброкачественные папилломы в области половых органов, на коже, на слизистых дыхательных путей. Семейство Polyomaviridae – вакуолизирующий вирус обезьян SV-40.Вирус полиомы человека.

Семейство Adenoviridae – аденовирусы, особенно серотипы 12,18,31 – индуцируют саркомы и трансформируют культуры клеток.

Семейство Poxviridae – вирусы фибромы-миксомы кролика, вирус Ябы, вызывающий развитие опухолей, вирус контагиозного моллюска.

Семейство Herpesviridae – лимфомы, карциномы. Онкогенез у человека связан с вирусом простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) и вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ).

123.Общая характеристика реовирусов. Роль в патологии человека. Принципы лабораторной диагностики. Термин «реовирус» [от англ. respiratory, респираторный, + enteric, кишечный, + orphan, сиротский] предложил Сэйбин (1959 г.) для обозначения вирусов, способных вызывать поражения воздухоносных путей и ЖКТ и первоначально классифицированных как кишечные «сиротские» ЕСНО-вирусы 10-го типа. В настоящее время семейство Reoviridae объединяет 9 родов, включающих виды, патогенные для человека, позвоночных, насекомых и растений. Природноочаговые инфекции у человека вызывают представители родов Orbivirus (вирусы Орунго и Кемерово) и Coltivirus (вирус колорадской клещевой лихорадки). Вирионы имеют сферическую форму диаметром 78-80 нм. Геном образован двухнитевой молекулой -РНК, состоящей из 10 сегментов. Геномная РНК и РНК-полимераза образуют сердцевину вириона. Нуклеокапсид организован по типу кубической симметрии. Капсид кольцевидной формы [лат. orbis, колесо], включает многочисленные белковые шипы, придающие вирусам «пушистый» вид. Суперкапсид отсутствует. Резервуар и переносчики возбудителей - грызуны, птицы, комары, мокрецы, москиты. Некоторые вирусы не имеют установленных позвоночных хозяев. Клиническая картина характеризуется лихорадкой, суставными болями, явлениями интоксикации.

Лихорадка Кемерово. Заболевание регистрируют в Западной Сибири. Резервуар возбудителя — различные птицы; переносчики — иксодовые клещи. Птицы могут служить источником инфекции в период вирусемии, длящейся 7-10 сут. У некоторых лиц заболевание может протекать бессимптомно. Длительность инкубационного периода 4-5 сут. Заболевание начинается остро: характерно повышение температуры тела до 39-40 С. Отмечают инъекцию склер, гиперемию конъюнктивы и кожных покровов. Несколько позднее появляются пятнисто-папулёзные высыпания. В тяжёлых случаях возможны явления миокардита и менингоэнцефалита.

Колорадская клещевая лихорадка. Колорадская клещевая лихорадка - единственная вирусная инфекция США, передающаяся клещами. Заболевание наиболее характерно для западных регионов США. Переносчик - клещ Dermacentor andersoni (вирус может передаваться трансовариально). Человек - тупиковый хозяин; заражение носит случайный характер. После укуса клеща вирус проникает непосредственно в кровоток, адсорбируется на эритроцитах и циркулирует 2-4 нед. Инфекция протекает остро: характерны лихорадка, головная боль, мышечные боли, сонливость. Прогноз благоприятный. У маленьких детей геморрагический синдром проявляется сильнее и обусловлен выраженной тромбоцитопенией. Обнаружено тератогенное действие возбудителя при заражении в ранние сроки беременности.

Лабораторная диагностика. В первые 14 сут (период вирусемии) проводят выделение вируса заражением кровью клеточных культур или интрацеребральном заражением мышей-сосунков и хомячков. У животных развивается паралич с летальным исходом. Специфические AT выявляют в парных сыворотках, взятых в первые сутки и на 2-4-е недели заболевания, с помощью РСК, РНГА и РН.

Лечение и профилактика. Средства этиотропной терапии и специфической профилактики не разработаны. Методом профилактики можно считать уничтожение клещей-переносчиков, однако подобные мероприятия опасны для окружающей среды. Более безопасно с экологической точки зрения применение индивидуальных средств защиты (спецодежда, репелленты и др.).

124.Общая характеристика риновирусов. Роль в патологии человека. Принципы лабораторной диагностики Риновирусы представлены небольшими «голыми» вирусами 22-30 нм в диаметре. Входят в состав рода Rhinovirus семейства Picornaviridae. Геном образует несегментированная молекула +РНК, связанная с белком VPg. Нуклеокапсид организован по типу кубической симметрии. Пос­ле его удаления экстрагированная РНК сохраняет инфекционность. Образование дочерних попу­ляций происходит в цитоплазме; высвобождение вирусов сопровождается лизисом клетки. Риновирусы разделяют на две большие группы по способности к репродукции в клетках приматов.

Вирусы группы Н размножаются и вызывают цитопатические изменения в ограниченной группе диплоидных клеток человеческого эмбриона и специальной линии (R) клеток HeLa.

Вирусы группы М размножаются и вызывают цитопатические изменения в клетках почек обезьян, почек эмбриона человека и различных перевиваемых клеточных линиях человеческих клеток. По структуре единственного типоспецифического Аг выделяют 113 иммуноразнородных групп. Группоспецифический Аг отсутствует.

Эпидемиология. Риновирусные инфекции регистрируют повсеместно в течение всего года с подъёмом заболеваемости в холодный период. Резервуар возбудителя - больной человек (выделяет возбудитель в течение 1-2 сут до появления симптомов и 2-3 сут после начала заболевания). Вирус передаётся воздушно-капельным путём. Риновирусы малоустойчивы к изменению рН среды (их инактивация происходит при рН 3,0-5,0) и действию дезинфектантов, но устойчивы к высоким температурам; длительно сохраняются при 50-60 С.

Клиника. Длительность инкубационного периода при риновирусных инфекциях составляет 2-5 сут; у человека обычно наблюдают ОРВИ, реже бронхопневмонии. У детей инфекции сопровождаются лихорадкой, у взрослых повышение температуры наблюдают редко. Продолжительность заболевания обычно составляет 7 сут. Осложнения - хронический бронхит (обычно у детей, страдающих заболеваниями лёгких), синуситы (часто осложняются бактериальными суперинфекциями) и воспаление среднего уха. Риновирусная инфекция вызывает развитие невосприимчивости только против гомологичного штамма на период, равный как минимум двум годам.Лабораторная диагностика. Для подтверждения диагноза проводят выделение вирусов на культурах клеток, заражённых отделяемым из носовых ходов; возбудитель идентифицируют в РН с помощью антисывороток.Лечение. Средства специфической противовирусной терапии отсутствуют, лечение симптоматическое. Иммунопрофилактика невозможна ввиду большого числа серологических вариантов возбудителя

125.Общая характеристика коронавирусов. Роль в патологии человека. Принципы лабораторной диагностики Респираторные. Семейство Coronaviridae включает один род — Coronavirus, объединяющий вирионы округлой или овальной формы диаметром 50-220 нм. Зрелые частицы окружены суперкапсидом, включающим редко расположенные гликопротеиновые шипы, состоящие из тонкой шейки и массивной шаровидной овальной или грушевидной головки, что придаёт им сходство с короной. Шипы опосредуют взаимодействие с клеточными рецепторами и проникновение в клетки посредством слияния вирусных суперкапсидов с мембранами клеток. Геном образует несегментированная молекула +РНК, с ним связан нуклеокапсидный белок. Нуклеокапсид организован по типу спиральной симметрии. Снаружи его покрывает матриксный белок. Репликативные процессы реализуются в цитоплазме и происходят достаточно медленно. У человека коронавирусы вызывают поражения воздухоносных путей и ЖКТ.

Эпидемиология. Респираторные коронавирусные инфекции повсеместно регистрируют как «банальную простуду». У взрослых инфекции чаще протекают бессимптомно или стёрто. Резервуар возбудителя — больной человек; вирус передаётся воздушно-капельным путём. Вирусы лабильны к дей­ствию факторов внешней среды и быстро погибают под действием высокой температуры, инсоляции и дезинфектантов.

Антигенная структура. По составу Аг коронавирусы разделяют на четыре антигенные группы. Аг коронавирусов человека значительно отличаются от Аг коронавирусов, патогенных для животных. Антигенная гетерогенность возбудителей обусловливает высокую частоту реинфекций другими сероварами.

Патогенез и клиника. В основе заболевания лежит цитопатическое действие возбудителя в месте проникновения. Инкубационный период длится 2-5 сут. Респираторные инфекции протекают по типу катара верхних отделов дыхательных путей. Типичны катаральный ринит и ринофарингит с обильным серозным (реже серозно-гнойным) отделяемым. Через 5-7 сут наступает спонтанное выздоровление, сопровождающееся развитием стойкой невосприимчивости к сероварианту, вызвавшему инфекцию.

Лабораторная диагностика. Проводят вирусоскопические и серологические методы. Материалом для исследований служат слизь из зева, носовое отделяемое и кровь. Для экспресс-диагностики используют РИФ, выявляющую Аг вирусов в носовом отделяемом и клетках слизистой оболочки. Вирусспецифические AT в парных сыворотках определяют в РТГА, РН (выявляют как свежие, так и давно перенесённые инфекции) и РСК (позволяет выявить только свежие случаи).Лечение. Большое количество антигенных вариантов коронавирусов делает бессмысленным изготовление вакцин и проведение иммунопрофилактики. Общие методы профилактики аналогичны таковым при гриппе и прочих ОРВИ. Средства этиотропной терапии отсутствуют. При тяжёлых формах может быть использован специфический Ig, изготовленный из сыворотки взрослых доноров. В РФ применяют препарат, содержащий высокие титры AT к вирусу ОС43, представ­ляющему наибольшую эпидемическую опасность.

Кишечные. В эпидемиологии острых кишечных заболеваний преобладает контактный путь передачи. Патогенез и клинические проявления обусловлены цитопатическим действием на эпителий слизистой оболочки кишечника. Инкубационный период не превышает 2-5 сут. Кишечные поражения протекают по типу острых гастроэнтеритов, наиболее часто регистрируемых в детски учреждениях и больницах. Через 5-7 сут наступает спонтанное выздоровление, сопровождающееся выработкой нестойкого иммунитета. Основу диагностики составляет выявление вирус специфических AT в РН, РТГА (выявляют как свежие, так и давно перенесённые инфекции) и РСК (позволяет выявить только свежие случаи). Выделение возбудителя обычно не проводят Основу диагностики составляет выявление вирусспецифических AT в РН, РТГА (выявляют как свежие, так и давно перенесённые инфекции) и РСК (позволяет выявить только свежие случаи). Средства этиотропной терапии и специфической профилактики отсутствуют.