24.Аллергены

Вещества, способные вызвать состояние аллергии, называются аллергенами. Количество аллергенов в природе велико, они разнообразны по составу и свойствам. Аллергенами в первую очередь являются чужеродные белки или соединенные с ними липоиды, мукополисахариды животного и растительного происхождения и другие соединения небелковой природы.

Аллергенами могут быть и некоторые низкомолекулярные вещества, например йод. Аллергены поступают в организм в основном из внешней среды, их называют «экзоаллергенами», некоторые аллергены образуются в организме и представляют собой собственные, но видоизмененные белки организма. Их называют «эндоаллергенами» или «аутоаллергенами».

Экзоаллергены проникают в организм различными путями: через дыхательные пути (пыльца растений, пыль домашняя и промышленная, некоторые лекарства, бактерии, вирусы, грибы и др.), через пищеварительный тракт попадают пищевые, лекарственные аллергены, через кожу и слизистые оболочки могут проникать лекарства, косметические средства, моющие порошки, аллергены насекомых, клещей и пр. Многие лекарственные аллергены попадают в организм путем инъекций — подкожных, внутримышечных и пр.

Большинство лекарственных веществ, как и некоторые другие низкомолекулярные химические соединения, не являются полноценными антигенами, а представляют собой гаптены, т.е. не вызывают сами по себе выработки антител. Свойства полного антигена они приобретают после соединения с какими-либо белками организма.

Аутоаллергены (эндоаллергены) образуются в больном организме из его собственных белков под влиянием различных повреждающих факторов. Таковыми могут быть бактериальные антигены и токсины, вирусы, термические воздействия (ожоги, охлаждение), действие ионизирующей радиации и пр.

Аутоаллергенные свойства возникают в поврежденных тканях вследствие различных процессов денатурации белков и других макромолекул и освобождения новых детерминантных групп. Образующиеся в организме эндо(ауто) аллергены становятся причиной многообразных аутоаллергических заболеваний человека и животных

25. Реагиновый механизм повреждения (атопии, анафилаксия). Методы аллергодиагностики. Реагиновый тип аллергии (первый тип). Этот тип аллергии реализуется с участием, главным образом иммуноглобулинов класса Е и требует предварительной сенсибилизации. Развивается этот тип реакций без участия комплемента.

Причины: аллергеном для этого типа реакции являются тимус-зависимые свободно циркулирующие экзогенные антигены с молекулярной массой от 10 до 70 кДа (килодальтон). Главным требованием к таким антигенам является то, что они должны быть, поливалентны, то есть иметь несколько активных центров, минимум 2. Путь проникновения с преодолением первого типа аллергии, как правило, парентеральный, с преодолением барьеров кожи и слизистых, хотя может быть пищевым или контактным. Еще одна особенность реагинового типа аллергии низкодозовая стимуляция, то есть для возникновения реакции достаточно небольшого количества аллергена. Чем больше доза аллергена, тем выше активность Т-супрессоров - иммунорегуляторов, подавляющих иммунный ответ с точки зрения образования реагинов - то есть, снижают функцию В-лимфоцитов. Если вводить большую дозу антигена возникает иммунный паралич. Это было подтверждено практикой: в городе Кириши после постройки комбината выпускающего белково-витаминные смеси резко увеличилась заболеваемость населения аллергическими заболеваниями: астмой, дерматитом, полиннозами. Причем рабочие комбината контактировавшие с белковой пылью, аллергией не страдали, так как получали аллерген в больших дозах.

ПАТОГЕНЕЗ. В патогенезе аллергических реакций первого типа участвуют 3 группы клеток: макрофаги, рецепторы, эффекторы. На попадение антигена в организм начинается первоначально выработка антитела всех других классов. При низкодозовой стимуляции Т-хелперы начинают активно выделять интерлейкин-4, функция которого состоит в том, чтобы изменять продукцию иммуноглобулинов и переключать ее на продукцию в большей степени класса Е. Интерлейкин-4 влияет на в-лимфоциты, продуцирующие иммуноглобулины на данный аллерген, увеличивает на поверхности В-лимфоцитов количество рецепторов и тому иммуноглобулину, который они вырабатывают, то есть иммуноглобулин Е начинает вступать в рецепторную связь с В-лимфоцитом, и начинает стимулировать собственное образование (включаются саморегуляторные процессы). К этому порочному кругу надо прибавить еще и интерлейкины 5 и 6, вырабатываемые Т-хелперами, которые также стимулируют продукцию иммуноглобулинов класса Е, которые накапливаются в крови.

Под влиянием этих веществ появляется клинические проявления аллергии.

Они могут быть 2-х видов:

1. Общие - анафилаксия (проявляется понижением кровяного давления, температуры тела, обмороком, изменением клеточного дыхания вплоть до асфиксии, возможна смерть от сосудисто-дыхательной недостаточности,

2. Местные проявления - атопия. Атопии - это поллинозы, аллергическая лихорадка, крапивница (сыпь на коже), отек кожи и слизистых - отек Квинке и бронхиальная астма, выражающаяся в развитии приступов удушья. Механизм бронхиальной астмы заключается в спазме бронхиол, что приводит к затруднению дыхания на фазе выдоха (экспираторная одышка), возникает отек и начинается мощное выделение слизи с закупоркой мелких бронхиол.

Атопия возникает в шоковых органах, где локализуются иммуноглобулины класса Е. Особенности атопии: они все реагиновые и наследственно обусловлены (аутосомно-рецессивного полигенного наследования).

Аллергические пробы, их сущность, применение в диагностике инфекционных болезней.

Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном.

При многих инфекционных заболеваниях за счет активации кле¬точного иммунитета развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагно¬стики бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, мико¬зов и гельминтозов. Аллергические пробы обладают специфично¬стью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых.

Все аллергические пробы подразделяют на две группы — про¬бы in vivo и in vitro.

К первой группе {in vivo) относятся кожные пробы, осуществ¬ляемые непосредственно на пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч) типов.

Аллергические пробы in vitro основаны на выявлении сенсиби¬лизации вне организма больного. Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты.

Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты, предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные ал¬лергены, используемые в диагностике инфекционных заболева¬ний, представляют собой очищенные фильтраты бульонных куль¬тур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них.

Кожные пробы. Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно, путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть передней поверхно¬сти предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллерге¬на. Через 28 — 48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы.

Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты, лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор гистамина. Результаты учи¬тывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в 100-5000 раз.

Кожные пробы на наличие ГЗТ широко применяют для выяв¬ления инфицированности людей микобактериями туберкулеза (проба Манту), возбудителями бруцеллеза (проба Бюрне), лепры (реакция Митсуды), туляремии, сапа, актиномикоза, дерматомикозов, токсоплазмоза, некоторых гельминтозов и др.

Пробы in vitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточ¬но чувствительны, позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма.

В настоящее время разработаны тесты для определения сенси¬билизации, основанные на реакциях Т- и B-лимфоцитов, ткане¬вых базофилов, выявлении общих специфических IgE в сыворот¬ке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgE в сыворотке крови).

Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ ос¬нована на подавлении миграции моноцитов и других лейкоцитов под действием медиаторов, вырабатываемых сенсибилизирован¬ными лимфоцитами, в присутствии специфического аллергена.

Реакция специфического розеткообразования. Розетки — харак¬терные образования, возникающие in vitro в результате прилипа¬ния эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лимфоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спон¬танное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53% и служит показателем функционального состояния Т-лимфоцитов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствую¬щие аллергены.

Реакция дегрануляции тканевых базофилов. Методика основа¬на на том, что под действием аллергена происходит дегрануляция тканевых базофилов крысы, предварительно сенсибилизирован¬ных цитофильными AT из сыворотки крови больного.

26. Цитотоксический механизм повреждения при аллергических процессах. Методы аллергодиагностики Второй тип аллергических реакций — цитотоксический , при котором аллергенами становятся клетки ткани. Обычно это происходит в результате повреждающего действия лекарственных препаратов, ферментов бактерий и вирусов при инфекционных процессах, а также лизосомальных ферментов фагоцитов. В ответ на появление измененных клеток образуются антитела, представленные главным образом классами lgG и lgM Антитела соединяются с соответствующими клетками, что приводит к включению одного из двух цитотоксических механизмов — комплементарного или механизма антителозависимой клеточной цитотоксичности. Вид механизма зависит от характера антител (класс, подкласс) и их количества, фиксированного на поверхности клетки. В первом случае наступает активация комплемента, образуются активные его фрагменты, вызывающие повреждение клеток и даже их разрушение. Во втором случае к антителам, фиксированным на поверхности клетки-мишени, присоединяются так называемые К-клетки. Обычно это особый вид лимфоцитов, образующих супероксидный анион-радикал (активную форму кислорода), который повреждает клетку-мишень. Поврежденные клетки фагоцитируются макрофагами. К цитотоксическому типу реакций относятся такие проявления лекарственной аллергии, как лейкопения, тромбоцитопения, гемолитическая анемия и др. Этот же тип реакции наблюдается при попадании в организм аллогенных антигенов, например при переливании крови (в виде аллергических гемотрансфузионных реакций), при гемолитической болезни новорожденных.

Аллергические пробы, их сущность, применение в диагностике инфекционных болезней.

Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном.

При многих инфекционных заболеваниях за счет активации кле¬точного иммунитета развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагно¬стики бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, мико¬зов и гельминтозов. Аллергические пробы обладают специфично¬стью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых.

Все аллергические пробы подразделяют на две группы — про¬бы in vivo и in vitro.

К первой группе {in vivo) относятся кожные пробы, осуществ¬ляемые непосредственно на пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч) типов.

Аллергические пробы in vitro основаны на выявлении сенсиби¬лизации вне организма больного. Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты.

Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты, предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные ал¬лергены, используемые в диагностике инфекционных заболева¬ний, представляют собой очищенные фильтраты бульонных куль¬тур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них.

Кожные пробы. Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно, путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть передней поверхно¬сти предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллерге¬на. Через 28 — 48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы.

Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты, лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор гистамина. Результаты учи¬тывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в 100-5000 раз.

Кожные пробы на наличие ГЗТ широко применяют для выяв¬ления инфицированности людей микобактериями туберкулеза (проба Манту), возбудителями бруцеллеза (проба Бюрне), лепры (реакция Митсуды), туляремии, сапа, актиномикоза, дерматомикозов, токсоплазмоза, некоторых гельминтозов и др.

Пробы in vitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточ¬но чувствительны, позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма.

В настоящее время разработаны тесты для определения сенси¬билизации, основанные на реакциях Т- и B-лимфоцитов, ткане¬вых базофилов, выявлении общих специфических IgE в сыворот¬ке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgE в сыворотке крови).

Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ ос¬нована на подавлении миграции моноцитов и других лейкоцитов под действием медиаторов, вырабатываемых сенсибилизирован¬ными лимфоцитами, в присутствии специфического аллергена.

Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТ). В основе этой реакции лежит способность нормальных лимфоцитов перифери¬ческой крови вступать в митоз и превращаться в бластные формы при культивировании их in vitro под действием специфических фак¬торов — аллергенов и неспецифических стимуляторов митогенеза — митогенов (фитогемагглютинин, конканавалин А, липополисахариды и другие вещества).

Реакция специфического розеткообразования. Розетки — харак¬терные образования, возникающие in vitro в результате прилипа¬ния эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лимфоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спон¬танное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53% и служит показателем функционального состояния Т-лимфоцитов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствую¬щие аллергены.

Реакция дегрануляции тканевых базофилов. Методика основа¬на на том, что под действием аллергена происходит дегрануляция тканевых базофилов крысы, предварительно сенсибилизирован¬ных цитофильными AT из сыворотки крови больного.

Базофильный тест Шелли. Известно, что базофильные гранулоциты человека или кролика также дегранулируются в присут¬ствии сыворотки больного и аллергена, к которому чувствителен данный пациент.

Определение антител класса IgE in vitro. Лабораторная диагно¬стика заболеваний, в основе которых лежит ГНТ, основана на определении аллергенспецифических IgEанти-IgE. При использо¬вании радиоактивной метки метод носит на¬звание радиоаллергосорбентного теста (PACT), но чаще в каче¬стве метки используют фермент или флюоресцирующее вещество (ФАСТ). Время анализа — 6 — 7 часов. Принцип метода: фиксиро¬ванный на твердой основе известный аллерген инкубируют с сы¬вороткой крови больного; находящиеся в сыворотке специфичес¬кие IgEанти-IgE связываются с аллергеном и, таким образом, остаются фиксированными на основе и могут вступать в специфическое взаимодействие с добавляемыми мечеными анти-IgE.