Практическая часть
Приборы, реактивы, посуда: зерно в колбах - свежее и хранившееся в условиях повышенной влажности, весы, часовые стекла, колбы со стерильной водой (по 90 мл), колбы со стерильной водой (по 50 мл) и песком, стерильные пипетки Мора на 10 и 1 мл, стерильные чашки Петри, МПА в пробирках и колбах, водяная баня, микроскопы и все необходимое для микроскопирования.
15.3.1.Методика выполнения работы
Количественный
учет микроорганизмов на зерне. Навеску
массой 5 г поместить в колбу с 50 мл
стерильной водопроводной воды и 2...3 г
песка. Колбу взбалтать круговыми
вращательными движениями 10 мин. Из
полученной вытяжки приготовить разведения
(10
;
10
;
10
).
Отдельными стерильными пипетками Мора
взять по 10 мл суспензии и перенести в
колбы, содержащие по 90 мл стерильной
водопроводной воды. Затем из каждой
колбы взять по 1 мл суспензии соответствующего
разведения в стерильные чашки Петри в
двух повторностях. В каждую чашку Петри
вылить по одной пробирке расплавленного,
но предварительно охлажденного до 50 °С
МПА. Чашки инкубировть при 30°
С. Наряду с МПА используют элективные
среды .
Через три-пять дней инкубации подсчитать общее число колоний, выросших на МПА в чашках, и рассчитать количество микроорганизмов на 1 г зерна.
Определение качественного состава микрофлоры зерна. Колонии сгруппировать по культуральным признакам. Из каждой группы колоний приготовить препараты, выявить принадлежность микроорганизмов к роду или семейству и определить численность бактерий каждой группы в процентах общего числа микроорганизмов.
На основании микробиологического анализа сделать заключение о качестве зерна. На свежем доброкачественном зерне преобладает Erwinia herbicola (до 80 %), образующая блестящие оранжевые колонии. Встречается Pseudoтoпas fluoresceпs, формирующая желтовато-зеленоватые флуоресцирующие колонии; непигментированные неспорообразующие палочки; дрожжи - блестящие, выпуклые, часто окрашенные в розовые тона колонии. При учете на сусло-агаре с мелом выявляются молочнокислые бактерии, образующие чечевицеобразные мелкие колонии с зонами растворения мела.
На несвежем зерне, хранившемся при повышенной влажности, Erwiпia herbicola, Pseudoтoпas fluoresceпs не выявляются. Обнаруживаются микрококки, образующие мелкие белые блестящие плоские колонии; спорообразующие палочки; актиномицеты, а также неспороносные палочки. При учете на сусло-агаре выявляется значительное количество грибов, главным образом относящихся к роду Peпicillium, а также Aspergillus.
15.3.2. Оформление работы.
Написать отчет о проделанной работе.
15.4.Контрольные вопросы
1.Что показывает проба на редуктазу
1.Какие микроорганизмы относят к эпифитам?
2. Какую группу микроорганизмов называют фитопатогенными?
3. Какие эпифиты характерны для зерна злаковых культур?
Рекомендуемая литература
[1] c.209-238
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 16
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ДРОЖЖЕЙ И МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ В ПОЛУФАБРИКАТАХ.
16.1. Цель работы: приобретение навыков определения количества микроорганизмов полуфабрикатах.