Способы и методы проведения биологического тестирования
http://zavlab.pro/metodyi-biotestirovaniya-v-ekologicheskih-laboratoriyah/
В настоящее время в экоаналитических лабораториях наравне с методами аналитической химии, широко распространены токсикологические методы анализа, а именно биотестирование. Под этим термином понимают проведение анализа на токсичность воды и почвы, а также водных вытяжек из осадков отходов промышленного производства и сточных вод с помощью живых тест – объектов. Биотестирование воды, а также почвы и отходов производства является достаточно дешёвым и быстрым способом определить наличие токсикантов, и поэтому он получил широкое распространение.
Daphnia magna Straus крупным планом
В качестве тест – организмов, как правило, используются бактерии, водоросли, простейшие, ракообразные и рыбы. Daphnia magna Straus является международным стандартизированным тест – объектом, и метод с их использованием считается одним из основных и наиболее показательных. В нашей лаборатории тестирование проводится морфофизиологическим методом с использованием лабораторной культуры ветвистоусых ракообразных Daphnia magna Straus (Cladocera, Crustacea) и их близких родственников Ceriodaphnia affinis Lilljeborg. Биотестирование воды происходит в соответствии с актуализированными методиками. И, разумеется, лаборатория, занимающаяся подобной деятельностью, должна быть аккредитована.
Культивирование тест – объектов совершается в лабораторных условиях, при определённой температуре, влажности, естественной смене дня и ночи. Тест — организмы один раз в квартал проверяют на чувствительность. Для этого используют серию разбавлений двухромовокислого калия. Для кормления дафний используют водоросли (Chlorella vulgaris Beijer) и суспензию хлебопекарных дрожжей. Водоросли выращивают в термостате при температуре 36±5 °С и круглосуточном освещении на основе питательной среды. Емкость с водорослевой суспензией для обеспечения углекислым газом непрерывно аэрируют в процессе культивирования.
Культивирование хлореллы в термостате
После отбора проб, воду фильтруют через обеззоленные бумажные фильтры «белая лента». Для проведения биотестирования используется суточная молодь дафний и цериодафний, так как они наиболее чувствительны. Тест – объекты помещают в лабораторные стаканы 100 см³ по 10 экземпляров в каждый. Повторность 3-х кратная. Критерием токсичности считается гибель 50 и более процентов тест – объектов, а также снижение прироста или угнетение жизненных функций. Во время проведения биотестирования на острую токсичность дафний не кормят. Учет выживших тест – организмов происходит через 1, 6, 24, 48 и 96 ч.
Биотестирование воды, а также почвы и отходов зависит от поставленной перед исследователем задачи. Острые биологические тесты длятся от 1 до 96 часов, краткосрочные – от 7 суток до появления первого поколения, хронические – до появления третьего поколения тестируемых организмов. Перед процедурой биотестирования в пробе воды или водной вытяжке, а также в контроле обязательно измеряются физико-химические показатели, такие как:
температура воды ° С;
содержание растворённого кислорода мг/л;
жесткость воды мг экв/л;
рН среда.
Процесс биотестирования воды
Биотестирование воды, почвы и отходов делают в параллельной, обычно трёхкратной повторности, и обязательно в контрольной пробе. Для контроля (вода без токсических веществ) и разбавлений используют отстоявшуюся в течение семи суток обычную водопроводную воду, она должна иметь жесткость не больше 4,0 экв/л, рН 6,5-8,5, температуру 22±3 °С, содержание кислорода не меньше 2мг/л. После проведения анализа на токсичность вновь измеряются физико-химические показатели воды или водной вытяжки.
Биотестирование почвы и отходов происходит аналогичным образом, разница лишь в способе отбора проб, затем из отобранных образцов делают водную вытяжку и в дальнейшем происходит анализ на токсичность. Целью биотестирования отходов является определение класса опасности отходов предприятий и нагрузки на окружающую нас природную среду.
http://medconfer.com/node/1530 !!