1. Гистология – наука, изучающая закономерности развития, строения и функции тканей, их взаимодействие в животных организмах.

Термин ткань ввел французский анатом и физиолог Биша Мари. Он проводил анатомические исследования текстуры различных слоев и структур организма. Дал название более 20 видам тканей. В настоящее время выделяют 4 основных вида тканей.

Связь гистологии с медико-биологическими и клиническими дисциплинами.

• С анатомией – изучение микроскопического строения органов;

• С физиологией – изучение функции клеток и тканей;

• С иммунологией – изучение иммунокомпетентных клеток;

• Гистология – фундамент для клинических дисциплин

Гистология для практической медицины

• Цитодиагностика – изучение мазков крови, костного мозга, слюны, спинно-мозговой жидкости, мочи, влагалищных мазков и др.

• Биопсия – прижизненное взятие ткани для гистологического исследования с целью диагностики заболеваний.

Задачи современной гистологии

• Изучение закономерностей строения, функций и развития тканей.

• Изучение межклеточных и межтканевых взаимодействий, роли нервной, эндокринной, иммунной систем в их регуляции.

• Исследование возрастных изменений тканей.

• Изучение реактивности и адаптации тканей и клеток при экстремальных воздействиях.

• Изучение регенерации ткани в норме и патологии.

• Исследование системы «мать – плод» и особенностей эмбриогенеза человека.

• Разработка общей теории предмета, отражающей эволюцию тканей и закономерности гистогенеза.

2. Гистологические препараты изготавливаются из органов, взятых от лабораторных животных, материал взятый во время оперативного вмешательства и материал полученный во время вскрытия трупов людей.

Основные этапы изготовления гистологического препарата

• Взятие материала и его фиксация

• Промывание, обезвоживание и заливка материала

• Приготовление срезов

• Окрашивание срезов и заключение

Гистохимия – раздел гистологии, посвященный анализу химической природы компонентов тканей с помощью микроскопических методов.

Виды микроскопии:

• Световая микроскопия – основной метод исследования тканей и клеток, использующий спектр видимого света.

• Широкопольная микроскопия – поле наблюдения равномерно и широко освещается с помощью конденсора. Изображения является результатом различного поглощения света участками окрашенного гистологического среза.

• Темнопольная микроскопия – для изучения живых клеток и бактерий. Прямые лучи не проходят в объектив, а только периферические лучи, которые формируются диафрагмой или специальным темнопольным конденсором и падают на препарат под косыми углами.

• Ультрафиолетовая микроскопия – используется для цитофотометрии и флуоресцентной микроскопии.

• Флуоресцентная микроскопия – объект облучают ультрафиолетовыми лучами, которые возбуждают флуоресцентные вещества к излучению света видимой части спектра. Позволяет судить о химическом составе вещества.

• Фазово-контрастная микроскопия – при прохождение света через окрашенные объекты изменяется амплитуда световой волны, а при прохождении света через неокрашенные – фаза световой волны, что и используется для получения высоко контрастного изображения.

• Интерференционная микроскопия – для изучения живых клеток, их массы, концентрации веществ в них.

• Поляризованная микроскопия – позволяет изучать ультраструктурную организацию тканевых компонентов на основе анализа анизотропии и двойного приломления.

Электронная микроскопия

• Трансмиссионная электронная микроскопия – подготовка препарата – фиксация в глутаральдегиде; дегидратация в спиртах возрастающей крепости; заливка в эпоксидные смолы; изготовление ультратонких срезов; размещение на медной стенке и концентрирование солями свинца.

• Сканирующая электронная микроскопия – дает трехмерное объемное изображения. Объект фиксируют, высушивают в вакууме, напыляют тонким слоем золота.

• Высоковольтная электронная микроскопия – позволяет исследовать срезы толщиной 1 – 10 мкм, более высокая разрешительная способность.

Метод замораживая – скалывания.

Клетки замораживают при температуре жидкого азота в присутствии криопротектора и используют для изготовления сколов. Плоскости сколов проходят через гидрофобную середину двойного слоя липидов. Обнаженную внутреннюю поверхность мембран оттеняют платиной, полученные реплики изучают в сканирующем ЭМ.

Метод замораживания – травления.

После скалывания перед напылением платиной объект помещаю в вакуум при Т=-100. Удаляются крсталы льда и обнажаются новые детали, невидимые при простом замораживании – скалывании.

Микрохирургия.

Осуществляется с помощью микроманипулятора под микроскопом. Клетку разрезают, извлекают ее части, пересаживают ядро от одной клетки и другой. Используют микропучки лазера, позволяющие инактивировать или разрушать любую часть клетки – ядрышко, отдельные хромосомы и тд.

Клеточная инженерия.

Создание клеток нового типа на основе их гибридизации, реконструкции и культивирования. При определенной обработке две различные клетки могут сливаться – образуется двуядерная клетка гетерокарион. Гетерокарион у близкородственных клеток может вступать в митоз, хромосомы объединяются в одну метафизарную пластинку. Образуются истинно гибридные клетки.