Санитарная микробиология
В биосфере земли практически не существует сред лишенных микроорганизмов. Жизнедеятельность микроорганизмов обеспечивает:
кругооборот основных жизненно важных элементов: C, N, S, P, O, H (органогенов).
поддерживает динамическое равновесие в биосфере, не было бы микробов не было бы жизни на Земле.
Это (+) влияние микроорганизмов на нашу жизнь.
Следует помнить, что человек (больные и носители), теплокровные животные (птицы, млекопитающие) являются основным резервуаром возбудителей большинства инфекционных заболеваний, которые выделяются из организмов в воздух, в землю, в воду. Поэтому основные механизмы передачи возбудителей ИЗ здоровым людям: ♦ воздушно – капельным (ч/з воздух)
♦ фекально – оральным (ч/з рот)
Это (-) влияние микроорганизмов на человека.
Одной их групп проблем медицинской микробиологии, являются:
1. Изучение жизнедеятельности микроорганизмов во ВС
2. Изучение биоценозов, в которых существуют ПМО.
3. Разработка методов микробиологических исследований внешней среды и микробиологических нормативов.
В силу этого как отдельное направление медицинской микробиологии возникла
Санитарная микробиология
Санитарная микробиология изучает санитарно – микробиологическое состояние окружающей среды и пищевых продуктов и является
– разделом медицинской микробиологии, которая:
♦ изучает микроорганизмы, содержащиеся в окружающей среде ( свободноживущие и паразитирующие бактерии и вирусы), способные оказывать неблагоприятное воздействие на здоровья человека ( вызвать заболевания) и экологическую ситуацию в различных биотопах.
♦ разрабатывает микробиологические показатели гигиенического нормирования.
♦ разрабатывает методы контроля за эффективностью обеззараживания
♦ выявляет в объектах окружающей среды ПМО, УПМО и СПМО т.е.
Санитарный надзор ( контроль) за ООС осуществляют Центры Государственного Санитарно - Эпидемиологического Надзора ЦГСЭН (СЭС).
В ЦГСЭН имеются различные отделы: коммунальный (контролирующий водоснабжение), пищевой ( контролирующий промышленные пищевые предприятия и предприятия общественного питания, детский и школьный отделы ( курирующий ДДУ и школы), эпидемиологический (расследующий вспышки ИЗ). Кроме того, структурной функциональной единицей ЦГСЭН – является:
Бактериологические лаборатории ЦГСЭН, которая проводят бактериологические исследования (бактериологический анализ):
- проб объектов окружающей среды ( которые доставляют работники др. отделов - вода, воздух, пища, смывы, объекты хирургических, акушерских ЛПУ, аптек и др.
- обследование декретированных групп на бактерионосительство - мазки из носа, зева, кишечника и пр.
- анализы из поликлиник и др.
Все бактериологические анализы проводят в соответствии с нормативными документами для каждого вида исследования.
На современном этапе задачи санитарной микробиологии осложняет интенсивное загрязнение внешней среды, которое влияет на все виды микроорганизмов, изменяя их.
Целью санитарно – микробиологических исследований объектов окружающей среды является
их гигиеническая оценка с точки зрения инфекционной опасности для человека
Главная задача практической санитарной микробиологии –
раннее обнаружение патогенной микрофлоры в объектах внешней среде.
Каким образом можно судить о неблагополучии объектов окружающей среды?
Обнаружение патогенов в ООС.
Практические лаборатории не могут повседневно проводить контроль на наличие одновременно всех возбудителей заболеваний, которые можно предполагать в данном объекте.
1.нет достаточных мощностей и баз,
2. изменение этиологической структуры ПМО,
3. УПМО, значение которых в ИП значительно выросла в последние годы.
Всегда ли можно обнаружить патогенных микроорганизмов в объектах окружающей среды?
Индикация их затруднена:
небольшое количество в загрязненных объектах.
много факторов определяющих условия их существования.
(-) результат исследования ООС на патогенную микрофлору ещё не говорит о её отсутствии.
(+) результат не может быть расценен как неблагополучная обстановка по кишечным заболеваниям.
Современный уровень методов диагностики позволяет успешно обнаружить возбудителя в изучаемых объектах.
Обнаружение возбудителей заболеваний в ООС достоверно свидетельствует:
об эпидемической ситуации
объясняет происхождение массовых вспышек заболеваний
определяет противоэпидемические мероприятия ( это определяет специфичность ПЭМ).
Принципы проведения санитарно – микробиологических исследований
1. Правильный забор проб при невозможности проведения моментальных исследовании материал сохраняют 4-6-8 часов в холодильнике.
2. Серийность из разных участков объекта.
3. Повторность (мониторинг ) исследований.
4. Исследование стандартных и унифицированных методов.
Разработана система санитарно-бактериологического контроля ОС.
Текущий санитарно – микробиологический контроль объектов окружающей среды, т.е. то, на чем базируется практическая санитарная микробиология – она использует 2 основных метода оценки сан.эпид состояния ВС.
1. Метод прямого обнаружения возбудителя – индикации (обнаружение) отдельных патогенных микроорганизмов
ПМО -это эпидемиологическая ситуация при которой проводятся соответствующие меры по борьбе и профилактике инфекционных заболеваний.
УПМО - могут попадать в сырьё, препараты, воду размножаться с накоплением большого количества микробных клеток и их токсинов и вызывать порчу сырья, препаратов и опасность возникновения пищевых отравлений, воспалительных процессов
(+) это точный, надежный критерий оценки эпид. опасности внешней среды.
(-) недостаток – низкая чувствительность.
2. Метод косвенной индикации -
По косвенным приемам судят о возможном загрязнении ОС возбудителями инфекционных заболеваний.
В медэпидемические периоды –
Косвенная индикация или Косвенные приемы или Косвенные показатели (КП) - единственные критерии поступления хозяйственно- фекальных загрязнений в окружающую среду.
В методе косвенной индикации используют два критерия по которым можно косвенно судить о возможном присутствии возбудителя во внешней среде. Это косвенные приемы с известной долей вероятности позволяют судить о возможном загрязнении окружающей среды микроорганизмами – возбудителями заболеваний.
1. ОМЧ (общее микробное число), микробное число т.е. общее количество микроорганизмов в определенной массе исследуемого материала (вода, лекарственная форма, почва, продукты питания)- количественном учете общего уровня микробного обсеменения (ОМЧ)
2. Содержание СПМ - на определении санитарно – показательных микроорганизмах (СПМО), говорящих о степени загрязнения ООС экскретами человека и животных.
Количественное выражение косвенных показателей да ещё динамике дают возможность
характеризовать объект
дать прогноз на перспективу.
Хозяйственно – фекальные загрязнения окружающей среды при возникновении ситуации (больной, носитель становиться опасными для здоровья человека).
Надежный контроль потенциальной опасности такого заражения возможен по санитарно – показательным микроорганизмам, которые постоянно выделяются из человека и животных, которые могут стать источниками заболеваний.
Нормативы «количественных параметров «КП» отражены в документах Санитарного законодательства (ГОСТ, санитарные правила).
Общее количество микроорганизмов (ОМЧ ) в объекте ОС:
один из косвенных методов, один из критериев косвенного метода.
расценивают как показатель интенсивности загрязнения внешней среды органическими веществами.
В практике – учет количества микроорганизмов (ОМЧ), производится по подсчету колоний всех микроорганизмов в 1 г или 1 мл субстрата образовавшихся
на питательном агаре при определенной температуре и определенном времени инкубации в аэробных и ф./ анаэробных условиях (КОЕ).
Чем больше загрязнение органическими веществами , чем выше ОМЧ, тем вероятнее присутствие патогенов - показатель загрязненности в ОС органическими веществами.
СПМО – Другой критерий косвенного метода.
СПМО или индикаторные микроорганизмы, те которые постоянно обитают в тех же органах что и возбудители инфекционных заболеваний и имеют с ним один и тот же путь выделения.
Индикатором КИ в ООС является естественная микрофлора кишечника человека и теплокровных животных.
Индикаторами капельных инфекций является естественная микрофлора носоглотки человека.
При их определении исходят из предположения, чем больше загрязнение экскретами человека и животных тем больше будет СПМ и тем вероятнее присутствие патогенов.
Надежный контроль потенциальной опасности ООС – это CПМО, которые постоянно выделяется из организма и могут стать источникам инфекций.
Количественный учет СПМО свидетельствует о массивности загрязнения экскретами человека, а значит о степени вероятности наличия возбудителей заболеваний, т.е.
Загрязненность воды, воздуха, сырья, препаратов, пищевых продуктов, поверхностей, рук выделениями человека определяют путем количественного учета СПМО.
Содержание СПМ выражают в титрах и индексах.
- титр СПМ - наименьший объем исследуемого материала (в мл) или весовое количество (в гр)
в котором обнаружена хотя бы 1 особь СПМ.
- индекс СПМ – количество особей СПМ, обнаруженного в определенном объеме (количестве) исследуемого объекта.
Для воды и жидкостей в 1 мл, почва, пищевых продуктов в 1 грамме.
Учитываются:
титр (СПМО) - наименьший объем исследуемого материала (в мл) или весовое количество (в гр)в котором обнаружена хотя бы 1 особь СПМ.
индекс (СПМО) – количество особей СПМО, обнаруженных в определенном объеме (количестве) исследуемого объекта.
Для воды и жидкостей в 1 мл, почва, пищевых продуктов в 1 грамме.
Например:
1) коли – титр или титр энтерококка воды – наименьшее количество воды, где обнаружена 1 в E coli или 1 энтнрококк. (Коли - титр питьевой воды = 333)
2) коли – индекс – число E coli в 1 л. воды. (Коли – индекс питьевой воды < 3)
Достоверные сведения о возможном попадании патогенных бактерий и вирусов в окружающую среду можно получить при определенных условиях выбора СПМО:
- простота, доступность методов индикации
- быстрота получения результата исследования (ответа для своевременности профилактических мероприятий).
Основные характеристики СПМ
постоянно обитает в естественных полостях человека и животных в тех же органах, что и возбудители заболеваний
постоянно выделяется во внешнюю среду, т.е.имеют с ними один и тот же путь выделения во ВС и загрязнение объектов.
не должен размножаться во внешней среде или его репродукциях носит кратковременный характер
длительность выживания во внешней среде должно быть не менее, а даже несколько больше чем у патогенов
устойчивость во внешней среде должна быть аналогичной или превышать патогенов
не должно быть во внешней среде двойников, аналогов с которыми их можно перепутать
микроб не должен изменяться во внешней среде в сроки выживания патогенов
методы идентификации и дифференциации должны быть просты
содержание СПМ выражают в титрах и индексах
микроорганизмы, по которым можно косвенно судить о возможности присутствия патогенов во ВС
индикаторные микроорганизмы
СПМО условно разделяют на три группы, между ними нет четких границ.
Некоторые микроорганизмы являются показателями как фекального, так и орального загрязнения или показателями процесса самоочищения.
Группа А включает обитателей кишечника человека их расценивают как индикаторы фекального загрязнения. Облигатными обитателями кишечника человека являются:
-анаэробные беспоровые палочки (бактероиды)
- кишечные палочки
- энтерококки
- анаэробные споровые палочки (клостридии)
Научные исследования во многих странах мира отдали предпочтение БГКП – как надежному показателю фекального загрязнения воды. БГКП – основной критерий при оценке качества питьевой воды. E.coli – родоначальник всех СПМО.
В «БГКП» входят
эшерихии - кишечная палочка (E coli), Citrbacter, Enterobacter, Klebsiella, протей, сальмонеллы
энтерококки,
C. perfringes,
термофилы,
бактериофаги,
бактероиды,
P.aerieginosa,
кандиды,
При исследовании объектов и субстратов «чистых» по своей природе или ставших чистыми в результате их обработки, в них не должно быть никаких БГКГ это:
- питьевая и дистиллированная вода
- термически обработанные продукты, молоко, соки, напитки
в положенные сроки (не ранее 45 мин. и не позднее одного часа после обработки).
При работе с санитарно – показательными бактериями оперируют групповыми понятиями (БГКП, энтерококков, клостридий), используя ряд признаков, положенных в основу методов их определения.
БГКП объединяют бактерии семейства , Enterobacteriaceoe со следующими признаками:
гр -,
2) не образующие спор,
3) палочки,
4) ферментирующие лактозу или глюкозу до кислоты и газа, при t – 37º С , 24 ч.
5) не обладающие оксидазной активностью.
Группа В - включает обитателей ВДП и носоглотки; микроорганизмы – индикаторы орального загрязнения (зеленящие, β - стрептококки, стафилококки).
выделяющиеся в ОС при кашле, чихании, смехе, разговоре, имеют общий путь выделения с бактериями, постоянно обитающими на слизистой оболочке ВДП
В связи с этим в качестве СПМО для воздуха закрытых помещений предложены:
зеленящие и гемолитические стрептококки Str. pyogenes,
стафилококки (S.aureus) лецитиназа - , коагулаза - , гематоксин (+) и антибиотикорезистентные.
Группа С - сапрфитические микроорганизмы внешней среды, индикаторы процессов самоочищения, протеолиты, спорообразующие грибы, актиномицеты, сине – зеленые водоросли.
В 1895г. Разработан бродильный метод обнаружения E.coli (БГКП)