Требования к антимикробным препаратам:

- эффективность против как можно большего количества микроорганизмов, участвующих в развитии заболевания (болезней периодонта), в том числе специфических (микроорганизмы должны быть чувствительны к назначаемым средствам);

- поступление в зоны поражения в достаточных для эффективного бактериостатического или бактерицидного действия концентрациях (доза препарата должна быть достаточно высокой для достижения цели);

- отсутствие локальных или системных побочных эффектов (учет безопасности действия на организм).

- результаты терапии должны быть фиксированы клинически и подтверждены микробиологически.

В 1991 г. ВОЗ выделила группу грам-отрицательных (Гр–) периодонтопатогенных бактерий (Porphyromonas gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus, Campylobacter rectus, Fusobacterium nucleatum), ответственных за комплекс патологических изменений в тканях периодонта при наиболее распространенных формах патологии [10]. На основе исследования сложных механизмов взаимодействия между различными бактериями налета и организмом хозяина разработана классификация периодонтальных микробных комплексов.

В последние годы появилась концепция биопленки (Allais G, Хенс-Петер Мюллер [6, 10]). Биопленка (активное биологическое существо) – это сообщество микроорганизмов, погруженное во внеклеточный матрикс (15% микроорганизмы и 85% – матрикс). В биопленке колонии бактерий по сравнению с так называемыми плантонными культурами проявляют особые свойства: метаболическая кооперация (матрикс может быть использован для питания; пищевые цепочки – продукты метаболизма одного микроорганизма являются продуктами питания другого); примитивная система обмена генетической информацией, резистентность к фагоцитозу и подавление нейтрофильных гранулоцитов, независимо от наличия специфических антител и комплемента; резистентность к антибиотикам ввиду связывания их с матриксом; более высокая патогенность. В борьбе с биопленкой по-прежнему ведущая роль отводится комбинации профессиональной гигиены и антимикробных препаратов. Среди антимикробных препаратов в периодонтологии наиболее широко распространены антисептики и антибиотики.

Антисептики – препараты, не избирательно вызывающие уничтожение микроорганизмов в живых тканях [5]. Большинство из них содержат галогены (фтор, хлор или йод). Антисептики применяются пациентами самостоятельно в составе ополаскивателей и зубных паст. Использование антисептиков обосновано при выполнении профессиональной гигиены.

Выделяют следующие антисептические препараты [3]:

1. Натуральные. Сангвинарин – содержит экстракт корневища растения. Разрушает оболочку микробных клеток, уменьшает их агрегацию и адгезию к тканям. Форма применения: 0,03% раствор для полоскания рта 2 раза в день.

2. Оксигены. Перекись водорода за счет выделения свободного кислорода при контакте с органическими соединениями оказывает действие на бактерии, а пенообразование способствует вымыванию некротических остатков. Форма применения: 3% раствор перекиси водорода для обработки операционного поля и 1,7% раствор перекиси водорода в ирригационных системах при проведении профессиональной гигиены.

3. Препараты йода. Бетадин – содержит поливинилпиролидон, активно высвобождает йод, препарат активен в отношении бактерий, грибов, вирусов, простейших. Форма применения: наиболее эффективен в качестве ирригационного раствора для ультразвукового аппарата при проведении профессиональной гигиены.

4. Фенолсодержащие препараты. Листерин – относится к фенолсодержащим эфирным маслам, в его состав также входят тимол, эвкалипт, ментол и метилсалицилат. Препарат обладает антибактериальным и противовирусным действием, уменьшает скорость образования зубного камня. Формы применения: используется в виде полосканий и аэрозоля в течение 30–60 секунд 2 раза в день.

5. Хлорсодержащие препараты.

Хлорид ацетилпиридина влияет на стенку бактериальной клетки, вызывая ее разрушение, эффективен в снижении скорости образования зубного налета. Форма применения. Рекомендуется применять спиртовой раствор (Search, Reach, Listermint) перед чисткой зубов 2 раза в день.

Хлоргексидин. Механизм действия – связывание положительно заряженных молекул хлоргексидина с отрицательно заряженными составляющими пелликул бактерий и протеинами слюны. Кроме того, хлоргексидин препятствует прикреплению бактерий к поверхности зуба и подавляет размножение бактерий. Постепенно высвобождаясь из связи с протеинами слюны, препарат оказывает антисептическое действие в течение 8–12 часов. Отрицательные свойства препарата: возможное раздражающее и аллергизирующее действие, окрашивание зубов, пломб, десквамация эпителия полости рта, воспаление слюнных желёз. Формы применения: в концентрации от 0,05 до 0,2% в виде растворов для полоскания рта, наиболее популярна концентрация 0,12% в спиртовом растворе («Peridex», Procter&Gamble; «PerioGard» Colgate). Существуют специальные формы для внесения в периодонтальные карманы, например желатиновая матрица (чип) «Perio Chip» (США) – 2,5 мг хлоргексидина глюконата. Матрица вводится в карман закругленной стороной в направлении дна, где она рассасывается через 7–10 дней. Чип устанавливается каждые 3 месяца. Курс лечения может составлять 9 месяцев. Российские производители выпускают биополимерную пленку с хлоргексидином Диплен-Дента.

Триклозан – содержащее хлор производное фенола бис-фенола и неионогенных поверхностно-активных веществ. Предотвращает образование зубного налета и камня, а также может угнетать несколько важных медиаторов воспаления периодонта, оказывая профилактическое действие. Формы применения: в виде растворов для полоскания в концентрации 0,005–0,3% (ACTIBRUSH, PLAX).

Триклозан и хлоргексидин входят в состав зубных паст в качестве антибактериальной добавки.

Антибиотики – химиотерапевтические вещества, обладающие способностью избирательно подавлять в организме больного возбудителей заболевания [5]. Цель антибактериальной терапии – уменьшение бактериальной нагрузки до уровня, приемлемого для организма при минимальном изменении физиологичной флоры. При этом необходимо учитывать возможность возникновения устойчивости, токсичность антибиотиков, а также угрозу сенсибилизации и дисбактериоза.

Виды антибиотикотерапии [5]:

· целевая химиотерапия, микробиологически ориентированная, направленная на определенные возбудители (после определения состава микрофлоры и ее чувствительности к антимикробным препаратам). Микробиологическая диагностика способствует целевому применению антимикробных препаратов [11].

· эмпирически ориентированная химиотерапия (направленная на предполагаемые возбудители без данных микробиологических исследований).

В табл. 1 представлены основные группы антибактериальных препаратов, применяемых в периодонтологии [5, 8].

 

Таблица 1. Основные группы антибактериальных препаратов, применяемых в периодонтологии [5, 8]

Группа (представитель)	Механизм действия	Эффективность	Примечание
Антибиотики
Группа β-лактамных	Нарушение синтеза белка	В отношении	Периодонтальные
антибиотиков (Подгруппа	клеточной мембраны	грамположительных	патогены вырабатывают
пенициллины –	бактерий, улучшение	и грамотрицательных	β-лактамазу,
амоксициллин, подгруппа	регенерации тканей	бактерий, анаэробных	расщепляющую бета-
цефалоспорины –		спорообразующих	лактамазное кольцо
ципрофлоксацин)		палочек, некоторых	подгруппы пенициллина.
		штаммов актиномицет
Тетрациклины	Нарушение синтеза	В отношении Actinobacillus	Накапливаются в
(тетрациклин,	белка внутри микробной	actinomycetemcomitans	десневой жидкости,
доксициклин, миноциклин)	клетки, ингибирование		периодонтальных
	коллагеназы (защита от		карманах, слюне;
	разрушения коллагена)		концентрация в десневой жидкости больше,
			чем в крови. Однако
			большинство штаммов
			семейства бактероидов
			устойчивы к этой группе
			препаратов.
Группа линкозамидов	Ингибирование синтеза	Бактериостатическое	Способны накапливаться
(линкосамидов)	бактериального белка	действие в отношении	в костной ткани в
(линкомицин,		аэробных, анаэробных	терапевтических
клиндомицин (далацин-С))		грамположительных	дозах, повышать
		и грамотрицательных	неспецифическую
		бактерий, некоторых	реактивность организма
		штаммов Actinobacillus	и действовать на флору,
		actinomycetemcomitans	устойчивую к другим антибиотикам. E.Corrodens
			проявляет устойчивость к
			этой группе.
Группа макролидов	Снижение синтеза	Широкий спектр действия	Хорошее проникновение
(рокситромицин (рулид),	интерлейкина-1, фактора	в отношении анаэробной	в ткани и клетки
азитромицин (сумамед))	некроза опухоли	флоры, активность в	организма, длительный
		случае резистентности к	период полувыведения,
		группе линкозамидов	хорошая переносимость.
Производные 5-нитроимидазола и нитротиазола
Метронидазол	Угнетение синтеза	Действует на Гр+	К нему устойчив
	нуклеиновых кислот	и Гр– анаэробные	Actinobacillus
		микроорганизмы	actinomycetemcomitans,
		(Porphyromonas gingivalis,	ограниченный спектр
		Prevotella intermedia,	действия на анаэробы
		Fusobacterium fusiformis,	(50–60% возможных
		Eikenella corrodens)	возбудителей).

 

Для повышения эффективности b-лактамных антибиотиков к ним добавляется клавулановая кислота, которая блокирует b-лактамазу (амоксиклав). Сочетанное применение с антибиотиками метронидазола существенно повышает эффективность антибактериального действия (Roche Y, Yoshimori R.N., 1997). Использование его в качестве монотерапии при лечении болезней периодонта неоправданно.

Местное использование антибиотиков. Показания:

1) периодонтальный абсцесс десневого происхождения;

2) невозможность качественной механической обработки участка;

3) глубокие периодонтальные карманы;

4) хирургические вмешательства на ограниченном участке.

Преимущества местного применения – адекватная концентрация антибактериальных веществ, обеспечивающая высокую эффективность против бактериальных патогенов, минимальный риск развития резистентной флоры и легкость в использовании. Высокоэффективно использование систем с длительным высвобождением медикамента (табл. 2).

 

Таблица 2. Системы для местного внесения антибиотиков [1, 3, 12]

Препарат (коммерческое название)	Форма выпуска	Схема назначения
Тетрациклин 25% (Actisite, США)	Этиленвинилацетатная нить, концентрация тетрациклина 1300 мг на мл	Помещают под десну с помощью специального паковочного инструмента. В течение 10 дней тетрациклин высвобождается из нити, через 10 дней нить удаляется.
Доксициклин 10%  (Atridox, США, рекомендован FDI)	Гель в специальном шприце	Atridox из специального шприца вводят в карманы, при контакте с жидкостью он отвердевает, а затем постепенно высвобождает доксициклин, создавая высокую концентрацию антибиотика в кармане. Гель удерживается в кармане посредством защитной  повязки, которая накладывается на 7–14 дней.
Миноциклина  гидрохлорид 2%  (Perio Cline, Япония)	Шприц для поддесневого внесения	Вводится в периодонтальные карманы с помощью специальной канюли или микрокапсул 1 раз в 2 недели, минимум 4 раза, максимум в течение 3 месяцев.
Линкомицин (Диплен-Дента, Россия)	Биополимерная пленка на основе поливиниловых соединений	Применяется 2 раза в день в течение 7–14 дней [2].
Метронидазол и хлоргексидин («Метрогил-дента», Россия)	Гель	Препарат наносят на десну и вводят в периодонтальные карманы на 30–60 мин [3]. Для использования в домашних условиях (в рамках поддерживающей терапии) применяется метрогил-дента с меньшим количеством метронидазола.

 

Системное (общее) назначение антибиотиков. Применяется при прогрессировании заболевания, несмотря на комплекс лечебных мероприятий, при высокой вероятности осложнений, наличии соматической патологии.

Показания:

1) некоторые формы болезней периодонта (препубертатный, ювенильный периодонтиты, устойчивые периодонтиты при неэффективности проводимого местного лечения);

2) значительный объем хирургических вмешательств;

3) профилактика риска возникновения осложнений при наличии сопутствующей патологии (инфекционный эндокардит и другие болезни сердечно-сосудистой системы).

Назначение антибактериальных препаратов пациентам с болезнями периодонта. Периодонтальные инфекции не относятся к угрожающим жизни заболеваниям и в большинстве случаев их можно лечить без системного применения антибиотиков. Системное назначение обосновано только при упорном сохранении или прогрессировании воспалительного процесса после проведенного комплексного лечения, когда тяжесть клинических проявлений не соответствует выраженности этиологического фактора (зубного налета) [7]. После определения чувствительности (на основании антибиотикограммы) назначаются препараты по схеме. Сочетание амоксициллина и метронидазола эффективно при лечении трудно поддающихся периодонтитов, эффект сохраняется до 1 года. Доксициклин с метронидазолом позволяют уменьшить количество бактериальных патогенов Actinobacillus actinomycetemcomitans и Porphyromonas gingivalis.

При ювенильном периодонтите результативно комбинированное назначение метронидазола по 250 мг и амоксициллина по 375 мг 3 раза в сутки 7 дней, при тяжелой форме — антибиотики группы макролидов (рулид по 300 мг в сутки 5–7 дней) [2].

Назначение антибактериальных препаратов при проведении хирургических вмешательств значительного объема. Хирургическое лечение болезней периодонта при значительном объеме и риске осложнений может сочетаться с назначением антибиотиков (клиндомицина и других) за 2–3 дня до вмешательства, далее прием продолжается в течение 2–3 дней после вмешательства. Хирургические манипуляции на тканях периодонта пациентам, получающим лучевую терапию в челюстно-лицевой области или иммуносупрессивные средства, сочетаются с обязательным назначением антибиотиков (1,5 г амоксициллина или 600 мг клиндомицина за 1 день до вмешательства) далее прием продолжается в течение 2–3 дней после вмешательства [6].

Назначение антибактериальных препаратов с целью профилактики инфекционных эндокардитов [9]. Высокую степень риска развития инфекционных эндокардитов имеют пациенты с протезами клапанов, с инфекционным эндокардитом в анамнезе, с врожденной сердечной недостаточностью и с шунтами. При проведении стоматологических манипуляций (во всех случаях, когда может быть спровоцировано даже незначительное кровотечение) стандартная схема антибактериальной терапии предполагает назначение амоксициллина в дозе 2 г внутрь за 1 час до приема стоматолога. Пациентам с аллергическими реакциями на пенициллины используют клиндомицин (600 мг) или цефалоспорины (цефалексин в дозе 2 г). Рекомендуется делать перерывы между курсами стоматологического лечения продолжительностью от 9 до 14 дней, для предупреждения развития резистентных форм микроорганизмов и их ассоциаций.

Не вызывает сомнений, что в этиологии и патогенезе болезней периодонта значение играют нарушения ассоциативных взаимоотношений представителей флоры рта: частичное или полное вытеснение характеристических видов, усиленное размножение бактерий, не свойственных для микробиоценоза рта здорового человека. Полноценная и адекватная антимикробная терапия – один из важных компонентов комплексного лечения болезней периодонта. В то же время системное назначение антибактериальных препаратов пациентам с заболеваниями периодонта должно базироваться на локальных данных о возбудителях и их чувствительности к антибиотикам. Бесконтрольное назначение антибиотиков грозит развитием устойчивых форм микроорганизмов, орального дисбактериоза.

Основные классификации антибиотиков В основу классификации антибиотиков также положено несколько разных принципов. По способу получения их делят на:  - природные;  - синтетические;  - полусинтетические (на начальном этапе получают естественным путем, затем синтез ведут искусственно).

Продуцентами большинства антибиотиков являются:  - актиномицеты,  - плесневые грибы; но их можно получить и из:  - бактерий (полимиксины),  - высших растений (фитонциды)  - тканей животных и рыб (эритрин, эктерицид).

По направленности действия :  - антибактериальные;  - противогрибковые;  - противоопухолевые.

По спектру действия (числу видов микроорганизмов, на которые действуют антибиотики) они делятся на:  - препараты широкого спектра действия (цефалоспорины 3-го поколения, макролиды);  - препараты узкого спектра действия (циклосерин, линкомицин, бензилпенициллин, клиндамицин). Заметим, что препараты узкого спектра в некоторых случаях могут быть предпочтительнее, так как не подавляют нормальную микрофлору.

По химическому строению антибиотики делятся на:  - Бета-лактамные антибиотики - основу из молекулы составляет бета-лактамное кольцо. К ним относятся:         - пенициллины - это группа природных и полусинтетических антибиотиков, молекула которых содержит 6-аминопенициллановую кислоту, состоящую из двух колец - тиазолидонового и бета-лактамного. Среди них выделяют:         - биосинтетические (пенициллин G - бензилпенициллин),         - аминопенициллины (амоксициллин, ампициллин, бекампициллин),         - полусинтетические "антистафилококковые" пенициллины (оксациллин, метициллин, клоксациллин, диклоксациллин, флуклоксациллин), основное преимущество которых - устойчивость к микробным бета-лактамазам, в первую очередь, стафилококковым;  - цефалоспорины - это природные и полусинтетические антибиотики, полученные на основе 7-аминоцефалоспориновой кислоты и содержащие цефемовое (также бета-лактамное) кольцо, т.е. по структуре они близки к пенициллинам. Они делятся на цефалоспорины:         - 1-го поколения: цепорин, цефалотин, цефалексин;         - 2-го поколения:- цефазолин (кефзол), цефамезин, цефамандол (мандол);         - 3-го поколения:- цефуроксим (кетоцеф), цефотаксим (клафоран), цефуроксим аксетил (зиннат), цефтриаксон (лонгацеф), цефтазидим (фортум);         - 4-го поколения:- цефепим, цефпиром (цефром, кейтен) и другие.  - монобактамы - азтреонам (азактам, небактам);  - карбопенемы - меропенем (меронем) и имипинем. Причем имипинем применяют только в комбинации со специфическим ингибитором почечной дегидропептидазы циластатином - имипинем/циластатин (тиенам);  - Аминогликозиды - они содержат аминосахара, соединенные гликозидной связью с остальной частью (агликоновым фрагментом) молекулы. К ним относятся: стрептомицин, гентамицин (гарамицин), канамицин, неомицин, мономицин, сизомицин, тобрамицин (тобра) и полусинтетические аминогликозиды - спектиномицин, амикацин (амикин), нетилмицин (нетиллин);  - Тетрациклины - основу молекулы составляет полифункциональное гидронафтаценовое соединение с родовым название тетрациклин. Среди них имеются природные тетрациклины - тетрациклин, окситетрациклин (клинимицин) и полусинтетические тетрациклины - метациклин, хлортетрин, доксициклин (вибрамицин), миноциклин, ролитетрациклин;  - Макролиды - препараты этой группы содержат в своей молекуле макроциклическое лактоновое кольцо, связанное с одним или несколькими углеводными остатками. К ним относятся: эритромицин, олеандомицин, рокситромицин (рулид) азитромицин (сумамед), кларитромицин (клацид), спирамицин, диритромицин;  - Линкозамиды - к ним относятся: линкомицин и клиндамицин. Фармакологические и биологические свойства этих антибиотиков очень близки к макролидам, и, хотя в химическом отношении это совершенно иные препараты, некоторые медицинские источники и фармацевтические фирмы - производители химиопрепаратов, например, делацина С, относят линкозамины к группе макролидов;  - Гликопептиды - препараты этой группы в своей молекуле содержат замещенные пептидные соединения. К ним относятся: ванкомицин (ванкацин, диатрацин), тейкопланин (таргоцид), даптомицин;  - Полипептиды - препараты этой группы в своей молекуле содержат остатки полипептидных соединений, к ним относятся: грамицидин, полимиксины М и В, бацитрацин, колистин;  - Полиены - препараты этой группы в своей молекуле содержат несколько сопряженных двойных связей. К ним относятся: амфотерицин В, нистатин, леворин, натамицин;  - Антрациклинновые антибиотики - к ним относятся противоопухолевые антибиотики - доксорубицин, карминомицин, рубомицин, акларубицин. Есть еще несколько достаточно широко используемых в настоящее время в практике антибиотиков, не относящихся ни к одной из перечисленных групп - фосфомицин, фузидиевая кислота (фузидин) рифампицин. В основе антимикробного действия антибиотиков, как и других химиотерапевтических средств, лежит нарушение метаболизма микробных клеток

№ 43 Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Для определения чувствительности бак­терий к антибиотикам (антибиотикограммы) обычно применяют: •  Метод диффузии в агар. На агаризованную питательную среду засевают исследуемый микроб, а затем вносят антибиотики. Обычно препараты вносят или в специальные лунки в агаре, или на поверхности посева раскла­дывают диски с антибиотиками («метод дис­ков»). Учет результатов проводят через сутки по наличию или отсутствию роста микробов вокруг лунок (дисков). Метод дисков — качес­твенныйи позволяет оценить, чувствителен или устойчив микроб к препарату. • Методы определения минимальных ингибирующих и бактерицидных концентраций, т. е. минимального уровня антибиотика, кото­рый позволяет invitroпредотвратить видимый рост микробов в питательной среде или пол­ностью ее стерилизует. Это количественные методы, которые позволяют рассчитать дозу препарата, так как концентрация антибиоти­ка в крови должна быть значительно выше ми­нимальной ингибирующей концентрации для возбудителя инфекции. Введение адекватных доз препарата необходимо для эффективного лечения и профилактики формирования ус­тойчивых микробов. Есть ускоренные способы, с применением автоматических анализаторов. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в чашке Петри. Среда АГВ: сухой питательный рыбный бульон, агар-агар, натрий фосфат двузамещенный. Среду готовят из сухого порошка в соответствии с ин­струкцией. На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинако­вом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста исследуемой культуры бактерий судят о ее чув­ствительности к антибиотикам. Для получения достоверных результатов необходимо приме­нять стандартные диски и питательные среды, для контроля которых используются эталонные штаммы соответствующих микроорганизмов. Метод дисков не дает надежных данных при определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирующим в агар полипептидным антибиотикам (например, полимиксин, ристомицин). Если эти антибиотики предполагается использовать для лечения, рекомендуется определять чувстви­тельность микроорганизмов методом серийных разведений. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений. Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий. Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят все последующие разведения в буль­оне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добав­ляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 10⁶—10⁷ бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питатель­ной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя про­бирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий, под влиянием содержа­щейся в ней минимальной ингибирующей концентрации (МИК) антибиотика. Оценку результатов определения чувствительности микро­организмов к антибиотикам проводят по специальной готовой таблице, которая содержит пограничные значения диаметров зон задержки роста для устойчивых, умеренно устойчивых и чувствительных штам­мов, а также значения МИК антибиотиков для устойчивых и чувствительных штаммов. К чувствительным относятся штаммы микроорганизмов, рост которых подавляется при концентрациях препарата, обнаружи­ваемых в сыворотке крови больного при использовании обычных доз антибиотиков.  К умеренно устойчивым относятся штаммы, для подавления роста которых требуются концентрации, созда­ющиеся в сыворотке крови при введении максимальных доз препарата. Устойчивыми являются микроорганизмы, рост кото­рых не подавляется препаратом в концентрациях, создаваемых в организме при использовании максимально допустимых доз. Определение антибиотика в крови, моче и других жидкостях организма человека. В штатив устанавливают два ряда проби­рок. В одном из них готовят разведения эталонного антибиотика, в другом — исследуемой жидкости.  Затем  в  каждую  пробирку вносят   взвесь   тест-бактерий,   приготовленную   в   среде   Гисса с глюкозой. При определении в исследуемой жидкости пенициллина,   тетрациклинов,   эритромицина   в   качестве  тест-бактерий используют  стандартный  штамм   S. aureus,  а  при  определении стрептомицина — Е. coli. После инкубирования посевов при 37 °С в течение 18—20 ч отмечают результаты опыта по помутнению среды и ее окрашиванию индикатором вследствие расщепления глюкозы   тест-бактериями.   Концентрация   антибиотика   опреде­ляется умножением наибольшего разведения исследуемой жид­кости,   задерживающей   рост   тест-бактерий,   на   минимальную концентрацию   эталонного   антибиотика,   задерживающего   рост тех же тест-бактерий. Например, если максимальное разведение исследуемой жидкости, задерживающее рост тест-бактерий, рав­но  1:1024,  а   минимальная  концентрация  эталонного  антибио­тика, задерживающего рост тех же тест-бактерий, 0,313 мкг/мл, то произведение   1024х0,313=320 мкг/мл  составляет  концен­трацию антибиотика в 1 мл.  Определение способности S. aureus продуцировать бета-лактамазу. В колбу с 0,5 мл суточной бульонной культуры стандарт­ного штамма стафилококка, чувствительного к пенициллину, вносят 20 мл расплавленного и охлажденного до 45 °С питатель­ного агара, перемешивают и выливают в чашку Петри. После застывания агара в центр чашки на поверхность среды поме­щают диск, содержащий пенициллин. По радиусам диска петлей засевают исследуемые культуры. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта. О способности исследуемых бактерий продуцировать бета-лактамазу судят по наличию роста стандартного штамма стафило­кокка вокруг той или другой исследуемой культуры (вокруг диска).