10 Вариант

1.- Под микроскопом можно наблюдать живые неокрашенные и окрашенные микробы. Но чаще исследуют препараты убитых и окрашенных микробов. Вначале готовят мазок из микробной культуры или патологического материала, высушивают и фиксируют его. Во время фиксации микробные клетки погибают и прикрепляются к стеклу. Используют физические и химические методы фиксации. Физический метод – фиксация мазка над пламенем спиртовки (несколько секунд) мазком вверх. Химические методы – фиксация в этаноле, метаноле, формалине, ацетоне и т.д. Для окраски фиксированных мазков применяют простые и сложные методы окраски. Простые методы – это методы, когда применяют один краситель. Сложные методы – несколько красителей и другие вещества. Окрашенный мазок называется препаратом.

2.споры химический состав мало воды, много липидов. В оболочке содержится дипиколинат кальция, который придает термоустойчивость. функции: перенесение неблагоприятных условий среды. споры обладают высокой устойчивостью к действию неблагоприятных физических и химических факторов. они находятся в состоянии покоя и сохраняют жизнеспособность в течение длительного времени. в благоприятных условиях спора прорастается и превращается в вегетативную форму.

метод обнаружения: споры окрашивают по методу ожешко. сущность метода. используют сильные воздействия для разрыхления оболочки, сильные красители. споры медленно воспринимают краску и с трудом отдают ее, то есть обесцвечиваются.

3. эндоферменты катализируют процессы внутри клетки. экзоферменты выделяются бактериями в окружающую среду.это ферменты а) пищеварительные ферменты, которые расщепляют сложные вещества до простых веществ. б) защитные ферменты, например пенициллиназа защищает клеточную стенку от действия антибиотика пенициллина. в) ферменты агрессии- факторы вирулентности патогенных бактерий.

консттитутивные ферменты -ферменты, которые синтезируются клеткой непрерывно, независимо от наличия в питательной среде соответствующего субстрата.

Индуцибельные (адаптивные) ферменты синтезируются бактериальной клеткой только при наличии в среде субстрата данного фермента.

4.культивирование риккетсий проводят на переживающих тканях в жидкой среде мейтлендов (раствор тироде и сыворотка) при 37 С 10-14 дней или тироде-сывороточном агаре с добавлением на поверхность измедьченной эпителиальной ткани при 37С 6-10 дней.

способы кулльтивирования хламидий

Хламидии, являясь облигатными паразитами, на искусственных питательных средах не размножаются, их можно культивировать только в живых клетках. Они являются энергетическими паразитами, так как не способны самостоятельно аккумулировать энергию и используют АТФ клетки-хозяина. Культивируют хламидий в культуре клеток HeLa, McCoy, в желточных мешках куриных эмбрионов, организме чувствительных животных при температуре 35 °С

5.Биологическая активность антибиотика- это его способность убивать или тормозить рост и развитие микроорганизмов. Активность выражают в единицах действия. 1 ед- минимальное количество антибиотика которое задерживает рост стандартного штамма тест-микроба в определенных условиях.

Вариант 11

!.Для изучения морфологических признаков применяют микроскопические методы.Используются различные микроскопы и методы микроскопии. световые микроскопы используют для изучения микробов с размерами не менее 0,2 мкм. Микроскоп состоит из механической и оптической части. Механическая часть:штатив, тубус с револьвером, предметный столик, приспособленный для крепления конденсора и светофильтров, макровинт и микровинт;оптическая часть:объективы, окуляры, осветительная сис-ма:конденсор и зеркало.Увеличение объектива и окуляра указано на оправе:объектива-8Х,10Х,40Х и т.д.,а окуляра-4Х, 5Х, 7Х, 10Х,16Х,20х.Общее увеличение микроскопа определяется произведением увелич-я окуляра на увелич-е объектива. В зависимости от среды,которая находится между объективом и препаратом, различают "сухие"(до 40х) и иммерсионные объективы(90-100х)В качестве иммерсионной жидкости используют дистиллированную воду или кедровое(или синтетическое)масло. Для фокусировки света от источника предназначен конденсор. который состоит из нескольких линз и превращает параллельные лучи в сходящиеся.Зеркало направляет свет от осветителя в конденсор. Качество изобр-я в значит. степени зависит от правильного освещения.Самый распрастраненный метод освещения- по Келеру.

2.Бактериофаги-это вирусы ьактерий. Как и вирусы они размножаются только в живых клетках. С помощью электрон. микроскопа показано, что большинство бактериофагов имеют форму головастика или сперматозоида. Они состоят из головки и хвостового отростка. Отросток- стержень с чехлом. Стержень заканчивается шестиугольной пластинкой с короткими шипами, от которых отходят фибриллы. чехол может сокращаться. Внутри головки находитсяч ДНК.ДНК окружена капсидом. В отростке находятся ферменты- лизоцим и АТФаза. Они участвуют в проникновении фага в клетку. Взаимодействие фага с бактериальной клеткой называется бактериофагией. Стадии взаимод-я фага с клеткой такие же, как у вирусов: адсорбция, проникновение в клетку, синтез нуклеиновых кислот и белков, морфогенез, выход из клетки. Но имеются особенности. Фаги обладают строгой специфичностью взаимодействия. Определенный фаг взаимодействует с определенным видом или даже подвидом бактерий. Поэтому название бактериофагов такие же, как видовые или родовые названия тех бактерий, с которыми они взаимодействуют.

3.Жидкие среды Гисса состоят из пептонной воды, 1% углевода и индикатора Андреде (кислый фуксин, обесцвеченный щелочью). В среду опускается поплавок, который при стерилизации заполняется средой. Исходный цвет среды- соломенно-желтый. При расщеплении углевода цвет среды становится ярко-розовым(красным) Если образуется газ, он накапливается в поплавке. Если углевод не расщепляется,цвет среды не меняется. Данную среду используют для опрелделения сахаролитических свойств.

4.Химические методы создания анаэробных условий основаны на использовании веществ, способных поглащать кислород в закрытых сосудах(используются аппараты)Пример:пкирогалол.

5вопр - принципы рациональной химиотерапии.

 одним из главных ее принципов является обязательное установление этиологии болезни до начала применения химиотерапевтических средств, чтобы выбрать из них препарат, обладающий наиболее высокой активностью в отношении возбудителя данной болезни. Несоблюдение этого принципа заведомо является причиной неэффективности химиотерапии.

Основные принципы рациональной химиотерапии. 1. Возбудитель должен быть чувствителен к АБ Правило «наилучшего предложения» - референтные таблицы с учетом региональных популяционных особенностей антибактериальной чувствительности. 2. АБ должен созадвать терапевтическую концентрацию в очаге. 3. Преимущественно адекватный режим дозирования в зависимости от: 1)возбудителя 2 )динамики клинического течения инфекции 3) локализации инфекции 4) длительности и характера течения инфекции (острая, хроническая или бактерионосительство) 4. Оптимальная продолжительность противомикробной химиотерапии (пример: стрептококковый фарингит излечим за 10 сут, острый неосложеннный гонококковый уретрит за 1-3 дня, острый несоложненный цистит за 3 дня). Для предупреждения побочных реакций, развития суперинфекции или резистентности продолжительность лечения должна соответствовать периоду эрадикации возбудителя. 5. Учет факторов пациента: 1) аллергоанамнез, иммунокомпетентность 2)функция печени и почек 3)переносимость АБ при пероральном приеме; комплаентность 4)тяжесть состояния 5)возраст, пол, наличие беременности или вскармливания ребенка, прием пероральных контрацептивов 6)побочные эффекты 6. Комбинированная антибиотикотерапия.

Билет №12

1.Клеточная стенка грам "+ бактерий

"Строение клеточной стенки грам"+" бактерий:

1) толстая стенка (15 - 80 нм);

2) несколько слоев пептидогликана (40-90%);

3) есть тейхоевые кислоты;

4) небольшое количество липидов.

В стенке - три слоя: 1) один слой пептидогликана; 2) волнообразная наружная мембрана; она соединена с пептидогликаном молекулами липопротеидов; 3) липополисахаридный слой, он не закрывает полностью наружную мембрану. Липополисахариды состоят из трех частей: а) липид А; б) ядро; в) О-специфическая цепь. Липид А погружен в наружную мембрану (придает токсичность – эндотоксин). О-специфическая цепь определяет антигенность (О-антиген).

Грам"+" бактерии: стафилококки, стрептококки, бациллы, клостридии, актиномицеты.

2.Получение и применение бактериофагов. Для получения препаратов бактериофагов используют проверенные производственные штаммы фагов и соответствующие им типичные культуры бактерий. В бактериальную культуру в жидкой питательной среде вносят маточную взвесь фага. После просветления (лизиса) культуру фильтруют через бактериальные фильтры, и фильтрат вносят в свежую культуру соответствующих бактерий и т.д. После накопления достаточного количества фага лизированную им культуру бактерий вновь фильтруют, и получают препарат фага.

Таким образом, препараты фагов получают путем многократного пассирования через чувствительную бактериальную культуру, а сами препараты фагов – фильтраты бульонных культур лизированных ими бактерий. Это прозрачные жидкости светло-желтого цвета, а также на их основе готовят другие лекарственные формы - таблетки с кислотоустойчивым покрытием, мази, аэрозоли, свечи.

Применение фагов основано на их строгой специфичности. Они используются для:

а) диагностики инфекционных заболеваний (диагностические препараты): с помощью известного фага можно определить вид или подвид бактериальной культуры;

б) лечения и профилактики заболеваний (лечебно-профилактические препараты).

3.Полужидкие среды Гисса состоят из 0,2-0,5 % мясо-пептонного агара (МПА), 1 % углевода и индикатора ВР (водно-голубая краска и розоловая кислота). Исходный цвет среды - розовато-серый. При расщеплении углевода цвет среды становится голубым, а если образуется газ, наблюдаются разрывы в среде.

Определенный вид бактерий ферментирует не все, а только некоторые углеводы, поэтому в одних пробирках цвет изменяется, а в других – не изменяется, и получается "пестрый ряд"

Назначение:применяют для изучения сахоролитических свойств

4.Биологический метод создания анаэробных условий:

Посев по методу Цейсслера. Каплю (петлю) материала со среды Китта-Тароцци последовательно засевают в три чашки Петри с кровяным агаром. Посевы ставят в анаэростат или аппарат Аристовского, которые ставят в термостат. На следующий день на третьей чашке вырастают отдельные колонии. Делают пересев этих колоний на среду Китта-Тароцци для накопления чистой культуры, изучения ее свойств и точного определения вида микроорганизмов.

Посев по методу Вейнберга. Пастеровской пипеткой переносят материал со среды Китта-Тароцци последовательно в 3-5 узких пробирок с сахарным МПА, погружая пипетку в расплавленный агар до самого дна пробирки. Пробирки быстро охлаждают под холодной водой. Агар застывает и разобщает микробные клетки в глубине агара. Из этих клеток вырастают колонии, которые пересевают в новую среду Китта-Тароцци, накапливают чистую культуру и идентифицируют

5.Метод «канавки» (предложен А. Флемингом). Берут чашку Петри с питательным агаром. В центре по диаметру вырезают полоску агара шириной 1 см. Затем канавку заполняют агаром, смешанным с антибиотиком. После застывания канавки перпендикулярно делают посев исследуемых культур (4-5). После инкубации в термостате чувствительность определяют по длине зоны задержки роста, чем она больше, тем культура чувствительнее и наоборот. Преимущество метода – можно определить чувствительность сразу нескольких культур к данному антибиотику.