6. Вариант

1.Включения: гликоген, гранулеза, полиметафосфаты (волютин), жиры, кристаллы солей. Функция: запасные питательные вещества, нерастворимые конечные продукты.

Волютин окрашивается метиленовым синим в красно-фиолетовый цвет, а цитоплазма клетки – голубая. Зерна волютина окрашивают и по методу Нейссера. Они окрашиваются в темно-синий цвет, а цитоплазма – в желтый цвет.

Гликоген раствором Люголя окрашивается в красно-бурый цвет, а гранулеза – в серо-синий цвет. Капли жира растворами судана III окрашиваются в красно-оранжевый цвет. Пары осмиевой кислоты окрашивают жировые капли в черный цвет.

1.Цитоплазма - сложный раствор с органоидами, заполняющий полость клетки. Функции: объединяет в одно целое нуклеоид и другие органоиды клетки, обеспечивает их взаимодействие и деятельность клетки как единой целостной живой системы.

2. Грибы рода Penicillium (зеленая плесень, кистевик) относятся к аскомицетам. Мицелий септирован. Плодоносящая гифа имеет вид кисточки, т.к. конидиеносец разветвляется на более мелкие структуры – стеригмы, от которых отходят цепочки конидий. Из некоторых видов пеницилла (P. notatum, P. chrysogenum) был получен первый антибиотик – пенициллин. Имеются патогенные виды, вызывающие заболевания у человека – пенициллинозы

3. Среда Эндо состоит из МПА, 1 % лактозы, фуксина и сульфита натрия, который его обесцвечивает, исходная среда имеет светло-розовый цвет.

Среда Левина состоит из МПА, лактозы, эозина, метиленовой сини и фосфорнокислого натрия, исходная среда имеет красно-фиолетовый цвет.

Среда Плоскирева состоит из МПА, лактозы, бриллиантового зеленого, йода, нейтрального красного, солей желчных кислот, минеральных солей. Эта среда также является элективной, т.к. подавляет рост многих микробов (кишечной палочки и др.) и способствует лучшему росту некоторых болезнетворных бактерий (возбудителей брюшного тифа, паратифов).

Эти среды используются для идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae. Они позволяют отличить патогенные микроорганизмы от кишечной палочки (см. лекцию №5)..

Среды Гисса служат для изучения сахаролитических свойствах микробов

4. а) первичные – клетки этой культуры делятся один раз, поэтому каждый раз необходимо вновь получать культуру ткани; чаще всего используют эмбриональные ткани и опухолевые ткани взрослого человека;

Назначение: выращивание вирусов

5. По происхождению антибиотики делят 5 классов:

1) из грибов – пенициллин;

2) из бактерий – субтилин, грамицидин;

3) из актиномицетов – стрептомицин;

4) из тканей животных – лизоцим, интерферон;

5) из растений – хлорофилипт из эвкалипта, аллилчеп – из лука, аллилсат – из чеснока, из лишайников – усниновая кислота.

7 Вариант

1.Спирохеты - микроорганизмы, имеющие штопорообразную извитую форму с тонким, спирально извитым телом и сильно выраженной подвижностью.Спирохеты - группа 1 - включает порядок Spirochaetales . Тонкие спиралевидные одноклеточные формы, обладающие своеобразной морфологией и способом движения ( рис. 13 ). Длина клеток колеблется от 5 до 250 мкм. Склонны к образованию аномальных форм (гранул, цист ). Размножаются поперечным делением. Клетки состоят из протоплазменного цилиндра, аксиальной нити и наружной оболочки. Оболочка тонкая и эластичная, что и обеспечивает спирохетам своеобразный способ передвижения. Грамотрицательны. Представители этой группы различно относятся к кислороду. Есть среди них облигатно аэробные , факультативно и облигатно анаэробные формы. Хемоорганогетеротрофы , существенно различающиеся по степени требовательности к субстрату. Среди них есть свободноживущие формы, основное место обитания которых - пресные и соленые озера, среда с высоким содержанием H2S; комменсалисты , обитающие в желудочно- кишечном тракте пресноводных и морских моллюсков, и паразиты. Некоторые виды патогенны: Treponema pallidum - возбудитель сифилиса ; Borrelia recurrentis - возбудитель возвратного тифа .

2. - Включения в бактериальных клетках, виды, химический состав, значение, выявление.

Включения: гликоген, гранулеза, полиметафосфаты (волютин), жиры, кристаллы солей. Функция: запасные питательные вещества, нерастворимые конечные продукты.

Волютин окрашивается метиленовым синим в красно-фиолетовый цвет, а цитоплазма клетки – голубая. Зерна волютина окрашивают и по методу Нейссера. Они окрашиваются в темно-синий цвет, а цитоплазма – в желтый цвет.

Гликоген раствором Люголя окрашивается в красно-бурый цвет, а гранулеза – в серо-синий цвет. Капли жира растворами судана III окрашиваются в красно-оранжевый цвет. Пары осмиевой кислоты окрашивают жировые капли в черный цвет.

3.Среда Эндо — дифференциально-диагностическая питательная среда, предназначенная для выделения Esherichia coli. Названа по имени предложившего её японского бактериолога Сигэру Эндо (1869—1937). Обладает слабыми селективными свойствами, компоненты среды подавляют рост грамположительных бактерий.

Состав

Мясопептонный агар, лактоза, фуксин, сульфит натрия (Na2SO3), динатрия фосфат, карбонат натрия.

Принцип действия

Фуксин обесцвечивается сульфитом натрия (образуется бесцветная фуксинсернистая кислота — реактив Шиффа[1]). Энтеробактерии, сбраживающие лактозу, в процессе брожения выделяют муравьиную кислоту, которая даёт цветную реакцию с реактивами на альдегиды, в том числе и с фуксинсернистой кислотой с образованием свободного фуксина, в результате чего их колонии окрашиваются в малиново-красный цвет с металлическим блеском или без него. Колонии бактерий, не сбраживающих лактозу, имеют белый или слабо-розовый цвет (цвет питательной среды).

4.Периодическая культура ведет себя как многоклеточный организм с генетически ограниченным ростом. [1]

В периодической культуре условия все время меняются; плотность популяции бактерий возрастает, а концентрация субстрата уменьшается. Во многих физиологических исследованиях представляется, однако, желательным, чтобы клетки могли долгое время находиться в фазе экспоненциального роста при постоянной концентрации субстрата в неизменных прочих условиях. В какой-то мере приблизиться к такому положению можно, многократно и достаточно часто перенося клетки в новую питательную среду. Той же цели было бы, очевидно, проще достичь, если в сосуд, содержащий популяцию растущих бактерий, непрерывно вводить новый питательный раствор и одновременно удалять из него соответствующее количество бактериальной суспензии. [2]

Между классической периодической культурой и непрерывной культурой в хемостате имеются принципиальные различия, которые в заключение следует еще раз подчеркнуть. [3]

При росте периодических культур на двухкомпонентном субстрате наблюдаются и другие явления. В таком случае они могут метаболизироваться одновременно, и при этом иногда наблюдается даже стимуляция роста. Возможны ситуации, когда ферменты, необходимые для метаболизма второго субстрата, синтезируются, но их активность ингибируется, и тогда субстраты используются последовательно, но рост, строго говоря. В случаях двухкомпонентных смесей последовательно используемых субстратов тот субстрат, который метаболизируется быстрее, обычно расходуется первым, хотя известны и исключения.

5.Виды антибиотиков

Существуют антибиотики с противобактериальным, противогрибковым и противоопухолевым действием. Антибиотики воздействуют на микроорганизмы либо подавляя их размножение (бактериостатический эффект), либо вызывая их гибель (бактерицидный эффект).

Антибиотики противомикробного действия по степени воздействия на те или иные микроорганизмы значительно отличаются друг от друга: одни влияют преимущественно на грамположительные бактерии (бактерии, которые имеют достаточно плотную оболочку, поэтому удерживают цвет при окрашивании по Грамму; к ним относятся пневмококки, стрептококки, стафилококки, возбудители столбняка, ботулизма и др.), другие на грамотрицательные (бактерии, которые имеют менее плотную оболочку, поэтому не удерживают цвета при окраске по Грамму, к ним относятся менингококки, гонококки, дизентерийная палочка, сальмонелла и др.) бактерии, третьи обладают широким спектром действия, включая грамположительные и грамотрицательные бактерии, реккетсии (мелкие бактерии, паразитирующие внутри клеток тканей человека), хламидии (крупные вирусы) и ряд других возбудителей инфекции.

К антибиотикам широкого спектра действия относятся тетрациклины, левомицетин, стрептомицин, неомицин, мономицин, канамицин, ампициллин, имипенем, цефалоспорины, рифампицин.

Тетрациклины

Тетрациклины (тетрациклин, доксициклин, метациклина гидрохлорид, вибрамицин и др.) обладают широким спектром действия, они активны в отношении грамположительных и грамотрицательных кокков (шаровидных бактерий), возбудителей бактериальной дизентерии, брюшного тифа, спирохет (бактерий вытянутой и спирально изогнутой формы), риккетсий, возбудителей особо опасных инфекций (чумы, туляремии, холеры), трахомы, некоторых простейших (например, возбудителей амебной дизентерии). На протея, синегнойную палочку, истинные вирусы и патогенные грибки тетрациклины не действуют.

Механизм действия тетрациклинов связан с угнетением внутриклеточного синтеза белка бактерий. Кроме того, тетрациклины связывают некоторые микроэлементы, входящие в состав ферментов бактерий, что также приостанавливает жизнедеятельность бактерий. Тетрациклины оказывают в основном бактериостатическое действие, поэтому особенно эффективны в отношении размножающихся бактерий.

Всасываются тетрациклины из желудка и тонкой кишки, не полностью, но в достаточной степени, необходимой для того, чтобы обеспечить необходимую концентрацию, выводятся с мочой и желчью.

Тетрациклины могут оказывать ряд побочных эффектов. Так, тетрациклины оказывают раздражающее действие: при приеме внутрь - на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, результатом чего бывает тошнота, рвота, понос и так далее, при внутримышечном введении - на окружающие ткани (боли после инъекций, воспаление окружающих вен и так далее). Тетрациклины могут оказывать токсическое действие на печень и вызывать дисбактериозы, подавляя нормальную микрофлору кишечника.

Цефалоспорины

Первый антибиотик группы цефалоспоринов (цефалоспорин С) был выделен из одноименного гриба, затем было создано большое количество полусинтетических цефалоспориновых антибиотиков. Действуют цефалоспорины бактерицидно, то есть убивают возбудителей инфекции. Цефалоспорины активны в отношении грамположительных (стафилококки, стрептококки и так далее) и грамотрицательных (сальмонеллы, возбудители дизентерии, некоторые штаммы протея, кишечная палочка и так далее) бактерий.

Цефалоспорины делятся на препараты для приема внутрь (цефалексин, цефаклор) и препараты для парентерального (минуя желудочно-кишечный тракт) введения (цефалотин, цефатоксим).

Недостатком цефалоспоринов является то, что они у значительного процента больных вызывают аллергические реакции. Из неаллергических реакций возможно поражение почек и снижение числа лейкоцитов (а значит, и снижение иммунитета). Кроме того, цефалоспорины обладают местным раздражающим действием, поэтому при их внутримышечном введении могут возникать боль и отек, а при приеме внутрь - тошнота, рвота и снижение аппетита.

Антибиотики широкого спектра действия могут назначаться только врачом, так как они способны оказывать отрицательное воздействие не только на возбудителей инфекции, но и на организм человека.

Вариант 8

1. Протопласты – это бактерии, полностью лишенные клеточной стенки. Сферопласты – бактерии, у которых клеточная стенка частично сохраняется. Такие бактерии внешне не отличаются по форме (шаровидные клетки разной величины), становятся более проницаемыми и осмотически чувствительными, не делятся. L- формы – бактерии, у которых нарушено образование клеточной стенки, но сохраняется способность к делению.

2. Грибы рода Candida относятся к дейтеромицетам (несовершенным грибам). Их называют дрожжеподобными грибами. Они также делятся почкованием, клетки имеют овальную форму (2-5 мкм). Отличаются тем, что при почковании образуют псевдомицелий: почкующиеся дочерние клетки не отходят от материнской, а вытягиваются в нити. Размножаются при помощи хламидоспор, которые образуются бесполым путем на концах псевдомицелия. Вызывают у человека заболевания – кандидозы – поражения кожи, слизистых оболочек и внутренних органов. Чаще кандидоз возникает как эндогенная инфекция. Так, C. albicaus – это представитель нормальной микрофлоры человека и вызывает заболевание при нарушении обычных соотношений в микробных ассоциациях (например, при длительной и неправильной антибиотикотерапии).

3. Брожение – неполное окисление в анаэробных условиях.

Продуктами брожения могут быть этиловый спирт, молочная, масляная, уксусная, пропионовая кислоты. Различают спиртовое, молочнокислое, уксуснокислое, маслянокислое, пропионовокислое и другие виды брожения.

4. Перевиваемые – клетки культуры постоянно делятся в условиях invitro (вне организма), поэтому их можно перевивать непрерывно; их готовят из линий клеток, которые хорошо размножаются в течение многих лет; чаще всего эти культуры получают из опухолевых клеток. Получено около 200 штаммов таких клеток: штамм L (из культуры мышиных фибробластов), штамм HeLa (из карциномы шейки матки), штамм Hep-3 (из лимфоидной карциномы) и т.д.

Перевиваемые линии клеточных культур могут быть загрязнены неизвестными вирусами, в том числе онкогенными, это ограничивает их применение, особенно в производстве вакцин.

5. Комбинированный метод – это сочетание биологического и химического синтеза. Сначала получают антибиотик биологическим путем, а затем химическим путем изменяют структуру молекулы антибиотика для создания нужных свойств. Антибиотики, полученные таким способом, называются полусинтетическими. К ним относятся производные пенициллина – оксациллин, метициллин, ампоциллин. К ним чувствительны те микробы, которые устойчивы к природным антибиотикам.

Билет № 9.

1. Капсула – это слизистое образование, прочно связанное с клеточной стенкой, имеющее четко очерченные внешние границы. Капсула различима в мазках-отпечатках из патологического материала. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски, создающих негативное контрастирование вещества капсулы. Обычно капсула состоит из полисахаридов, иногда полипептидов. Капсула гидрофильна, она препятствует фагоцитозу бактерий.

Микрокапсула – слизистое образование, выявляемое при электронной микроскопии.

Слизь – мукоидные экзополисахариды, не имеющие четких внешних границ. Бактериальные экзополисахариды участвуют в адгезии, их еще называют гликокаликсом.

Капсула и слизь предохраняют бактерии от повреждений, высыхания, т.к. они гидрофильны и хорошо связывают воду, препятствуют действию защитных факторов макроорганизма и бактериофагов.

2. Малярийные плазмодии – возбудители малярии. Человек – промежуточный хозяин, окончательный – комары рода Anopheles.

Жизненный цикл плазмодия проходит в 2-х стадиях – бесполой и половой. В организме человека происходит бесполое размножение паразита. Половое размножение происх. в организме переносчика – самки комара.

Инфецированный комар прокалывает кожу и его слюна, содержащая спорозоиты плазмодия, попадает в кровь, спорозоиты попадают в печень, там они развиваются в тканевых шизонтов, которые растут и размножаются путем многократного деления. После образуются молодые особи – тканевые мерозоиты. Далее мерозоиты внедряются в эритроциты. Когда эритроцит разрушается и паразит попадает в кровяное русло, в плазму крови выбрасываются продукты распада гемоглобина и токсические продукты жизнедеятельности паразита.

После нескольких циклов шизогонии в эритроцитах образуются гамонты, которые в организме комара превратятся в макрогаметы и микрогаметы.

При сосании комаром крови больного человека, гамонты попадают в кишечник комара, где превращаются в гаметы. Из микрогамонта образуется 4–8 микрогамет, из макрогамонта – яйцеклетка, происходит копуляция гамет. Образовавшаяся в результате оплодотворения зигота обладает подвижностью и называется оокинетой. Оокинета мигрирует через стенку кишечника комара и на внешней поверхности кишечника превращается в ооцисту. Ядро ооцисты многократно делится и ооциста распадается на огромное количество спорозоитов – до 10000, этот процесс называется спорогонией. Спорозоиты перемещаются в слюнные железы комара.

Таксономия:  Plasmodium vivax, P. malariae, P. falciparum, P. Ovale.

3. Чистая культура микроорганизмов – это популяция клеток (видимый рост) одного вида, выросшая на стерильной питательной среде.

Штаммы – это разные микробные культуры одного вида, выделенные из различных источников или даже из одного и того же источника, но в разное время.

В научно-исследовательской работе, особенно при генетических исследованиях, необходимо получать культуру заведомо из одной клетки. Такая культура называется клоном.

4. Полуперевиваемые – клетки этих культур способны размножаться в течение 50 пассажей (перевивок), сохраняя исходный диплоидный набор, типичный для соматических клеток используемых тканей; для их приготовления используют диплоидные клетки человека (фибробласты человеческого эмбриона, диплоидные клетки легких человека). Диплоидные клетки не претерпевают злокачественного перерождения и этим выгодно отличаются от опухолевых; они нашли широкое применение в вирусологии, особенно в производстве вакцин.

5. По спектру действия антибиотики делят на 4 группы:

1) антибактериальные широкого (тетрациклины, левомицетин) и узкого (полимиксин, бензилпенициллин) спектра действия;

2) противогрибковые широкого (амфотерицин В) и узкого (нистатин) спектра действия;

3) противопротозойные – против простейших ( фумагиллин – антибиотик узкого спектра действия – против амеб);

4) противоопухолевые – препараты, обладающие цитотоксическим действием (рубомицин).