3. Список посуды и оборудования:

Наименование	Объем	Количество
Мерная колба	100 мл 25мл	1 2
Пробирка		3
Пипетка - с отбитым носиком	2 мл 1 мл 2 мл	1 4 1
Песочные часы		1

4.Описание хода работы:

1) Постановка пробы на гидролиз

- берем коническую колбу (V=100 мл), добавляем 1 мл испытуемой пробы (в качестве испытуемой пробы у нас выступает приготовленная ранее среда), 5 мл 10 % раствора соляной кислоты, 9 мл дистиллированной воды.

- проводим гидролиз в автоклаве. Время гидролиза – 30 минут, избыточное давление – 0,15 Мпа. Пробу ставят на гидролиз для разложения полисахаридов на моносахариды (глюкозу), содержание которых будем определять в последствиию

- после гидролиза проводим охлаждение пробы, дальше нейтрализацию содой (добавляем соду, пока из пробы не перестанет выделяться углекислый газ).

- после нейтрализации разбавляем пробу в 5 раз (1 мл пробы и 4 мл воды), согласно варианту нашего задания.

Схематическое пояснение:

2) Определение глюкозы в пробе

- наливаем в пробирку 2 мл пробы, добавляем 1 мл 0,3% раствора хлористого 2,3,5 – трифенилтетразолия, 1 мл 1 н раствора едкого натрия.

- нагреваем полученную смесь на горячей водяной бане в течение трех минут (время измеряем по песочным часам), появляется вишневое окрашивание за счет образования нерастворимого комплекса.

- пробу охлаждаем, добавляем в нее 1 мл 2,1 н раствор уксусной кислоты.

- содержимое пробирки переносим в мерную колбу, объемом 25 мл, смывая остатки раствора изопропиловым спиртом. Оптическую плотность окрашенных растворов измеряем на фотоэлектроколориметре КФК – 2, длина волны – 490 нм. Готовим раствор сравнения аналогичным образом, только вместо 2 мл пробы берем 2 мл дистиллированной воды.

По градуировочной зависимости оптической плотности раствора от количества глюкозы определяем ее содержание в анализируемой формуле. Расчеты проводят по следующей формуле:

где Х₁— содержание глюкозы в 1 мл исследуемой пробы;

С — содержание глюкозы в анализируемом растворе, опреде­ленное по калибровочной кривой, мкг;

Р1 — разведение пробы при постановке ее на гидролиз;

P2 — разведение пробы перед анализом;

2 — количество исследуемого раствора, взятое для анализа,

мл;

1000 — перевод мкг в мг.

X1 = (120 мкг*5*15)/2*1000=4,5 мг/мл

Схематичное пояснение: