
- •Передмова
- •Правила роботи в біохімічній лабораторії
- •Правила техніки безпеки при роботі в біохімічній лабораторії
- •Хід роботи
- •1. Екстракція цукрів водою
- •2. Визначення відновлюючих цукрів
- •3. Визначення суми відновлюючих і невідновлюючих цукрів (сахарози)
- •4. Спектрофотометрія
- •Лабораторна робота № 2 Фотоколориметричне визначення тріоз у рослинному матеріалі (за г.Н. Чупахіною, м.В. Куркиною)
- •Хід роботи
- •Обчислення результатів
- •Приклад обчислення
- •Лабораторна робота № 3 Порівняльна оцінка фізико-хімічних властивостей рослинних олій на підставі визначення кислотного і йодного чисел і числа омилення
- •Хід роботи
- •1. Визначення кислотного числа
- •2. Визначення числа омилення
- •3. Визначення йодного числа
- •Лабораторна робота № 4 Визначення вмісту білка в насінні і у вегетативній масі різних культур
- •Хід роботи
- •1. Виділення сумарних білків з насіння зернових і зернобобових рослин
- •2. Спектрофотометричний метод визначення сумарних білків
- •3. Виділення білків з вегетативних органів рослин
- •4. Визначення білків за методом Лоурі
- •Лабораторна робота № 4 Клейковина, її склад і властивості. Визначення кількості та якості сирої клейковини зерна пшениці
- •1. Визначення кількості сирої клейковини
- •Лабораторна робота № 6 Спектрофотометричне визначення нуклеїнових кислот
- •Хід роботи
- •Приклад розрахунку
- •Лабораторна робота № 7 Ферменти, як біологічні каталізатори. Якісні реакції на ферменти
- •1. Відкриття амілази в слині
- •2. Відкриття пероксидази (донор: н2о2 – оксидоредуктаза; кф 1.11.1.7) в картоплі
- •3. Відкриття тирозинази (о-дифенол: о2–оксидоредуктаза; кф 1.10.3.1) у картоплі
- •4. Вплив температури на активність амілази слини
- •5. Вплив рН середовища на активність ферментів
- •Лабораторна робота № 8 Визначення вмісту вільних органічних кислот і кислих солей в плодах методом титрування
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 9 Колориметричне визначення нітратів (за д. Катальдо та ін.)
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 10 Колориметричне визначення аскорбінової кислоти в рослинних продуктах
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 11 Визначення вітамінів в1 і в2 в рослинах
- •Хід роботи
- •1. Екстракція вітамінів
- •2. Одержання тіохрому
- •3. Флуоресцентна спектроскопія розчинів тіохрому і рибофлавіну
- •4. Кількісне визначення вітамінів в1 і в2
- •Лабораторна робота № 12 Виділення l-ментолу з перцевої м'яти
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 13 Виділення теоброміну і кофеїну з плодів какао та листя чаю. Якісні реакції на алкалоїди
- •1. Виділення теоброміну з какао
- •Хід роботи
- •2. Виділення кофеїну з листя чаю
- •Хід роботи
- •Методична література
- •Розділ II програма курсу «біохімія рослин»
- •Основна література
- •Рекомендована література
- •Реферати і есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
Хід роботи
1. Визначення кислотного числа
Зважити порожню колбу, потім обережно туди додати невелику кількість рослинної олії (оливкова, соняшникова, рапсова). Масу наважки визначити по різниці маси колби з маслом і порожньої колби.
Приготувати 100 мл 0,2 н спиртового розчину КОН. Для цього зважити 1,12 г лугу і розчинити у мінімальній кількості води (1 – 1,5 мл). Після того як наважка лугу розчинена, довести об'єм 96% етанолом до 100 мл.
У колбу з маслом прилити 15 мл етанолу, додати 2 – 3 краплі фенолфталеїну і ретельно перемішати. Потім відтитрувати отриманий розчин 0,2 н спиртовим розчином лугу до появи забарвлення. Титрування більш слабкими розчинами КОН не дає видимих змін забарвлення і ускладнює визначення кінця титрування. Як контроль використати при титруванні 15 мл етанолу з 2 – 3 краплями фенолфталеїну тим же розчином лугу.
Кислотне число (КЧ) обчислити за формулою:
де T – титр лугу (кількість КОН в 1 мл розчину), мг; V – об'єм розчину лугу, який витратили на титрування контрольної проби, мл; V1 – об'єм розчину лугу, витраченого на титрування дослідної проби, мл; m – маса наважки в грамах.
2. Визначення числа омилення
У конічній колбі зважити наважку олії 0,2 – 0,5 г (як зазначено вище), долити 15 мл 0,2 н спиртового розчину лугу і нагрівати на водяній бані 30 хв. зі зворотним холодильником. Одночасно прокип'ятити контрольну пробу з такою ж кількістю лугу, але не містить масла. Після закінчення зазначеного часу охолодити колби з розчином. При повному омиленні на дослідній колбі не повинно бути блискучих крапельок масла, в іншому випадку омилення потрібно продовжити. Після омилення і охолодження в колби додати 2 – 3 краплі фенолфталеїну і надлишок лугу відтитрувати 0,5 н розчином H2SO4, користуючись мікробюреткою. Обчислити число омилення (ЧО) за формулою:
де T – титр лугу, мг; V – об'єм кислоти, яку витратили на титрування контрольної проби, мл; V1 – об'єм кислоти, яку витратили на титрування дослідної проби, мл; m – маса наважки в грамах.
3. Визначення йодного числа
У конічну колбу зважити 0,1 грам жиру і внести 5 мл хлороформу. Для контролю взяти колбу, що містить тільки 5 мл хлороформу. В обидві колби прилити по 10 мл 2,5% спиртового розчину йоду, закрити пробкою, ретельно перемішати і залишити в темній місці на 1 год. при кімнатній температурі. Після закінчення зазначеного часу надлишок йоду відтитрувати 0,1 н розчином гіпосульфіту натрію до жовтого забарвлення. Потім додати 1 мл 1% розчину крохмалю і продовжити титрування до знебарвлення розчину. Йодне число (ЙЧ) обчислити за формулою:
де T – титр 0,1 н розчину гіпосульфіту натрію, мг; V – об'єм розчину гіпосульфіту, який витратили на титрування контрольної проби, мл; V1 – об'єм розчину гіпосульфіту натрію, витраченого на титрування дослідної проби, мл; m – маса наважки в грамах; 0,0127 – кількість йоду (г), еквівалентна 1 мл 0,1 н розчину гіпосульфіту натрію.
Результати оформити у вигляді таблиці.
Вид рослинної олії |
Кислотне число |
Число омилення |
Йодне число |
|
|
|
|
Зробити порівняльний аналіз отриманих результатів.