
- •Передмова
- •Правила роботи в біохімічній лабораторії
- •Правила техніки безпеки при роботі в біохімічній лабораторії
- •Хід роботи
- •1. Екстракція цукрів водою
- •2. Визначення відновлюючих цукрів
- •3. Визначення суми відновлюючих і невідновлюючих цукрів (сахарози)
- •4. Спектрофотометрія
- •Лабораторна робота № 2 Фотоколориметричне визначення тріоз у рослинному матеріалі (за г.Н. Чупахіною, м.В. Куркиною)
- •Хід роботи
- •Обчислення результатів
- •Приклад обчислення
- •Лабораторна робота № 3 Порівняльна оцінка фізико-хімічних властивостей рослинних олій на підставі визначення кислотного і йодного чисел і числа омилення
- •Хід роботи
- •1. Визначення кислотного числа
- •2. Визначення числа омилення
- •3. Визначення йодного числа
- •Лабораторна робота № 4 Визначення вмісту білка в насінні і у вегетативній масі різних культур
- •Хід роботи
- •1. Виділення сумарних білків з насіння зернових і зернобобових рослин
- •2. Спектрофотометричний метод визначення сумарних білків
- •3. Виділення білків з вегетативних органів рослин
- •4. Визначення білків за методом Лоурі
- •Лабораторна робота № 4 Клейковина, її склад і властивості. Визначення кількості та якості сирої клейковини зерна пшениці
- •1. Визначення кількості сирої клейковини
- •Лабораторна робота № 6 Спектрофотометричне визначення нуклеїнових кислот
- •Хід роботи
- •Приклад розрахунку
- •Лабораторна робота № 7 Ферменти, як біологічні каталізатори. Якісні реакції на ферменти
- •1. Відкриття амілази в слині
- •2. Відкриття пероксидази (донор: н2о2 – оксидоредуктаза; кф 1.11.1.7) в картоплі
- •3. Відкриття тирозинази (о-дифенол: о2–оксидоредуктаза; кф 1.10.3.1) у картоплі
- •4. Вплив температури на активність амілази слини
- •5. Вплив рН середовища на активність ферментів
- •Лабораторна робота № 8 Визначення вмісту вільних органічних кислот і кислих солей в плодах методом титрування
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 9 Колориметричне визначення нітратів (за д. Катальдо та ін.)
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 10 Колориметричне визначення аскорбінової кислоти в рослинних продуктах
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 11 Визначення вітамінів в1 і в2 в рослинах
- •Хід роботи
- •1. Екстракція вітамінів
- •2. Одержання тіохрому
- •3. Флуоресцентна спектроскопія розчинів тіохрому і рибофлавіну
- •4. Кількісне визначення вітамінів в1 і в2
- •Лабораторна робота № 12 Виділення l-ментолу з перцевої м'яти
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 13 Виділення теоброміну і кофеїну з плодів какао та листя чаю. Якісні реакції на алкалоїди
- •1. Виділення теоброміну з какао
- •Хід роботи
- •2. Виділення кофеїну з листя чаю
- •Хід роботи
- •Методична література
- •Розділ II програма курсу «біохімія рослин»
- •Основна література
- •Рекомендована література
- •Реферати і есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
Лабораторна робота № 13 Виділення теоброміну і кофеїну з плодів какао та листя чаю. Якісні реакції на алкалоїди
Алкалоїди, азотовмісні органічні сполуки переважно рослинного походження, які володіють властивостями основ. Алкалоїди – фізіологічно активні сполуки.
Відкриття алкалоїдів у рослинах мало велике значення, тому що ще на початку 19 ст. вважали, що рослинні речовини, на відміну від речовин тваринного походження, не містять азоту. Першими були відкриті алкалоїди опію (1803) у вигляді суміші кристалічних речовин, з яких у 1806 р. виділили індивідуальний алкалоїд – морфін. У 19 ст. були відкриті також стрихнін, хінін, кофеїн, атропін, ефедрин та ін. До 60-х рр. 20 ст. стало відомо вже більше 1000 алкалоїдів як природних, так і отриманих синтетичним шляхом.
У флорі земної кулі алкалоїди поширені нерівномірно: в одних родинах (макові, пасльонові, жовтецеві, бобові тощо) вони містяться у багатьох видах рослин, в інших алкалоїди поки не виявлені. В одній і тій же рослині зазвичай зустрічається кілька алкалоїдів, близьких за будовою, число яких може доходити до 15 – 20 (опійний мак, кора хінного дерева) і змінюватися в залежності від умов росту рослини. Вміст алкалоїдів коливається від часток відсотка до декількох відсотків. Концентрація алкалоїдів у рослині визначається характером ґрунту і його агротехнічною обробкою, висотою місцевості над рівнем моря, водним режимом, тривалістю дня, інтенсивністю сонячної радіації та ін. факторами.
Алкалоїди беруть участь у хімічних реакціях обміну рослинного організму. Так, в дозріваючому насінні тютюну спостерігається поступове зникнення нікотину паралельно з накопиченням білка.
Ряд алкалоїдів, наприклад кофеїн, теобромін, ефедрин, ареколін, отримують синтетично. У деяких випадках виділені природні алкалоїди перетворюють на більш ефективні лікарські засоби. У промисловості синтезуються близькі за будовою до алкалоїдів ефективні синтетичні лікарські засоби, наприклад новокаїн (замість кокаїну), акрихін (замість хініну) та ін.
Алкалоїди – цінні лікарські препарати; більшість з них є найсильнішими отрутами. Деякі алкалоїди володіють вибірковою дією на різні відділи нервової системи, судини, м'язи і т.д. Наприклад, стрихнін і кофеїн збуджують центральну нервову систему, морфін і скополамін діють на неї заспокійливо; пілокарпін підсилює виділення залоз (протилежну дію має атропін); хінін вбиває малярійних плазмодіїв; апоморфін викликає блювоту; теобромін має сечогінну дію; адреналін підвищує кров'яний тиск і т.д. Алкалоїди діють або на причину захворювання (наприклад, хінін при малярії), або тільки усувають окремі симптоми хвороби (наприклад, морфін, опій як снодійні і болезаспокійливі, кофеїн як збудливий). У медицині використовують алкалоїди в чистому вигляді (кодеїн), їх солі (хлористоводневий хінін) і похідні (апоморфін).
1. Виділення теоброміну з какао
Теобромін (3,7-диметил-2,6-діоксіпурин) відноситься до пуринових основ. У природі пурин не зустрічається, але його скелет лежить в основі ксантинових похідних, широко поширених в тваринних і рослинних організмах.
Алкалоїди пуринового групи (теобромін, кофеїн і ін.) володіють схожими фізіологічними властивостями. Вони збуджують центральну нервову систему і посилюють діяльність серця.
Теобромін виділений А.А. Воскресенським в 1842 р. з какао (Theobroma Саса). Міститься також в чаї і деяких інших рослинах.
Мета роботи – якісне і кількісне виділення теоброміну з лушпиння какао.
Реактиви та матеріали: лушпиння какао 100 г (порошок какао), негашене вапно 11 г, вапняне молоко, NaOH (марка х.ч.), HCl (конц.), індикатор конго, СО2, NH4OH (конц.), 10%-ний AgNO3, 10%-ний NaOH, марлевий фільтр, електроплитка, водяна баня, фарфорові стакани, колби, стакани, скляні палички, прилад для випарювання у вакуумі, апарат Сокслета.