
- •Передмова
- •Правила роботи в біохімічній лабораторії
- •Правила техніки безпеки при роботі в біохімічній лабораторії
- •Хід роботи
- •1. Екстракція цукрів водою
- •2. Визначення відновлюючих цукрів
- •3. Визначення суми відновлюючих і невідновлюючих цукрів (сахарози)
- •4. Спектрофотометрія
- •Лабораторна робота № 2 Фотоколориметричне визначення тріоз у рослинному матеріалі (за г.Н. Чупахіною, м.В. Куркиною)
- •Хід роботи
- •Обчислення результатів
- •Приклад обчислення
- •Лабораторна робота № 3 Порівняльна оцінка фізико-хімічних властивостей рослинних олій на підставі визначення кислотного і йодного чисел і числа омилення
- •Хід роботи
- •1. Визначення кислотного числа
- •2. Визначення числа омилення
- •3. Визначення йодного числа
- •Лабораторна робота № 4 Визначення вмісту білка в насінні і у вегетативній масі різних культур
- •Хід роботи
- •1. Виділення сумарних білків з насіння зернових і зернобобових рослин
- •2. Спектрофотометричний метод визначення сумарних білків
- •3. Виділення білків з вегетативних органів рослин
- •4. Визначення білків за методом Лоурі
- •Лабораторна робота № 4 Клейковина, її склад і властивості. Визначення кількості та якості сирої клейковини зерна пшениці
- •1. Визначення кількості сирої клейковини
- •Лабораторна робота № 6 Спектрофотометричне визначення нуклеїнових кислот
- •Хід роботи
- •Приклад розрахунку
- •Лабораторна робота № 7 Ферменти, як біологічні каталізатори. Якісні реакції на ферменти
- •1. Відкриття амілази в слині
- •2. Відкриття пероксидази (донор: н2о2 – оксидоредуктаза; кф 1.11.1.7) в картоплі
- •3. Відкриття тирозинази (о-дифенол: о2–оксидоредуктаза; кф 1.10.3.1) у картоплі
- •4. Вплив температури на активність амілази слини
- •5. Вплив рН середовища на активність ферментів
- •Лабораторна робота № 8 Визначення вмісту вільних органічних кислот і кислих солей в плодах методом титрування
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 9 Колориметричне визначення нітратів (за д. Катальдо та ін.)
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 10 Колориметричне визначення аскорбінової кислоти в рослинних продуктах
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 11 Визначення вітамінів в1 і в2 в рослинах
- •Хід роботи
- •1. Екстракція вітамінів
- •2. Одержання тіохрому
- •3. Флуоресцентна спектроскопія розчинів тіохрому і рибофлавіну
- •4. Кількісне визначення вітамінів в1 і в2
- •Лабораторна робота № 12 Виділення l-ментолу з перцевої м'яти
- •Хід роботи
- •Лабораторна робота № 13 Виділення теоброміну і кофеїну з плодів какао та листя чаю. Якісні реакції на алкалоїди
- •1. Виділення теоброміну з какао
- •Хід роботи
- •2. Виділення кофеїну з листя чаю
- •Хід роботи
- •Методична література
- •Розділ II програма курсу «біохімія рослин»
- •Основна література
- •Рекомендована література
- •Реферати і есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
- •Реферати та есе
- •Запитання для підготовки
- •Тестові завдання
- •Рекомендована література
Хід роботи
Зважити 10 – 20 г свіжих подрібнених плодів. Перенести наважку в порцелянову ступку і ретельно розтерти з 1 – 2 г кварцового піску до однорідної маси. Розтерту масу кількісно перенести в конічну колбу на 250 мл, залити 100 мл гарячої дистильованої води (80 °С) і нагрівати на водяній бані протягом 1 год при 80 °С. Потім вміст колби охолодити і відфільтрувати через воронку Шотта. Довести об'єм екстракту до 100 мл. Піпеткою взяти 20 мл витяжки і перенести в чисту конічну колбу, туди ж додати 2 – 3 краплі фенолфталеїну до рожевого забарвлення. Відтитрувати витяжку 0,1 н розчином лугу.
Кислотність досліджуваного об'єкта (Х, %) обчислити за формулою:
де a – кількість 0,1 н лугу, витраченого на титрування, в мл; V – загальний об'єм витяжки; V1 – об'єм витяжки, взятої для титрування; m – маса наважки в грамах.
Якщо результат хочуть висловити для якої-небудь з головних органічних кислот, то Х множать на певний розрахунковий коефіцієнт. Згідно А.І. Єрмакова та ін., 1 мл 0,1 н розчину лугу, який витратився на титрування, відповідає 7,5 мг винної, 6,7 мг яблучної, 6,4 мг лимонної, 4,5 мг щавлевої кислот.
Результати оформити у вигляді таблиці.
Об'єкт |
Кількість лугу, який витратили на титрування, мл |
Кислотність, % |
|
|
|
Зробити висновки.
Лабораторна робота № 9 Колориметричне визначення нітратів (за д. Катальдо та ін.)
Нітрати – солі нітратної кислоти HNО3 – є нормальним продуктом обміну азотистих речовин будь-якого живого організму, рослинного і тваринного. Тому «безнітратних» продуктів в природі не існує. Навіть в організмі людини за добу утворюється і використовується в обмінних процесах 100 мг і більше нітратів.
Але чому ж говорять про небезпеку нітратів? При споживанні їх в підвищених кількостях нітрати в травному тракті частково відновлюються до нітритів (більш токсичних сполук), а останні при надходженні в кров можуть викликати метгемоглобінемію. Крім того, з нітритів у присутності амінів можуть утворитися N-нітрозаміни, які мають канцерогенну активність (тобто сприяють розвитку онкологічних захворювань). При прийомі високих доз нітратів з питною водою або продуктами харчування через 4 – 6 год. з'являється нудота, задишка, посиніння шкірних і слизових покривів, пронос. Супроводжується все це загальною слабкістю, запамороченням, болями в потиличній області, серцебиттям. Перша допомога – інтенсивне промивання шлунка, прийом активованого вугілля, сольових проносних, свіже повітря.
Допустима добова доза нітратів для дорослої людини складає 325 мг на добу. Як відомо, у питній воді допускається до 45 мг/л нітратів. Рекомендоване споживання продуктів харчування, де використовується питна вода (чай, перші й треті страви) приблизно 1,0 – 1,5 л, максимум 2,0 л в день. Таким чином, з водою дорослий може спожити близько 68 мг нітратів. Отже, на харчові продукти залишається 257 мг нітратів. Дослідження показали, що токсична дія нітратів у харчових продуктах проявляється слабше, ніж тих, які містяться в питній воді, приблизно в 1,25 рази, тобто фактично безпечно з харчовими продуктами споживати 320 мг нітратів на добу.
Мета цієї роботи – визначити кількість нітратів у плодах різних рослинних культур, а також у вегетативній масі рослин.
Реактиви та матеріали: деіонізована вода, 5%-ний розчин саліцилової кислоти, фосфатний буфер (рН 8), Na2HPO4×2H2O, NaH2PO4×H2O, Н2SO4 (конц. марка ХЧ), 2 н NaOH, KNO3, порцелянова ступка і товкач, кварцовий пісок, колба Ерленмеера, ротатор, конічні колби об'ємом 100 мл, мірні циліндри, пробірки, центрифуга, термостат, спектрофотометр.