
- •Поверхностная ферментация
- •Глубинная ферментация
- •Основные факторы среды, определяющие рост и биосинтетическую активность продуцентов
- •Список посуды и оборудования:
- •4.Описание хода работы:
- •1) Постановка пробы на гидролиз
- •2) Определение глюкозы в пробе
- •3) Посев продуцента антибиотика с косяка в жидкую питательную среду (засевали 2 качалочные колбы на подгруппу)
- •5)Посев культуры-продуцента антибиотика с косяка на агаризованную среду в чашки Петри
- •6) Посев культуры продуцента фермента на сыпучий субстрат
- •5.Выводы и результаты:
3) Посев продуцента антибиотика с косяка в жидкую питательную среду (засевали 2 качалочные колбы на подгруппу)
а) Протерли поверхность стола дезинфицирующим раствором.
б) Зажгли спиртовку.
в) Пробирку с продуцентом антибиотика взяли в левую руку таким образом, чтобы хорошо была видна вся поверхность питательной среды с выросшей на ней культурой. Пробирка должна находилась несколько наклонно.
г) Взяли в правую руку бактериологический крючок и простерилизовали в пламени горелки.
д) Не выпуская из руки петли, мизинцем и безымянным пальцем правой руки прижали ватную пробку к ладони, вынули ее из пробирки и держали ее так во время последующих манипуляций.
е) Ввели бактериологический крючок в пробирку и захватили культуру микроорганизма вместе с агаризованной средой (площадью 1 см ). Закрыли пробирку и положили ее на стол.
ж) Удерживая лопатку указательным и большим пальцами правой руки, захватили мизинцем и безымянным пальцем ватную пробку колбы, прижали ее к ладони и открыли колбу около пламени горелки. Опустили лопатку с культурой в жидкую питательную среду. Закрыли колбу.
з) Лопатку обожгли в пламени горелки.
Качалочную колбу установили на качалку (и = 200—220 мин"1) в термостатируемом помещении (26—28 °С).
Продолжительность ферментации — 5 суток (120 часов).
Схематичное пояснение:
4)Подготовка агаризованной среды для посева на нее микроорганизма — продуцента антибиотика
Колбу со стерильной агаризованной средой поместили на водяную баню для расплавления агар-агара, при этом периодически перемешивали содержимое колбы медленным вращательным движением.
В чашки Петри разлили агаризованную среду охлажденную до 70—80 °С. Для этого колбу с расплавленной средой выдерживали на столе до постепенного ее остывания (-10 минут) и затем разлили в стерильные чашки Петри.
Для этого колбу со средой взяли в правую руку, вынули из нее пробку, зажимая ее мизинцем и безымянным пальцем левой руки. Слегка обожгли горло колбы в пламени спиртовки. Затем приоткрыли крышку чашки Петри левой рукой и быстро налили в чашку расплавленную среду в таком количестве, чтобы дно чашки было полностью покрыто. Вращательным движением повернули чашку на столе для того, чтобы среда равномерно распределилась по дну чашки, и оставили на столе до полного застывания агара.
Схематичное пояснение:
5)Посев культуры-продуцента антибиотика с косяка на агаризованную среду в чашки Петри
а) Протерли поверхность стола дезинфицирующим раствором.
б) Зажгли спиртовку.
в) Пробирку с продуцентом антибиотика взяли в левую руку таким образом, чтобы хорошо была видна вся поверхность питательной среды с выросшей на ней культурой. Пробирка находилась несколько наклонно.
г) Взяли в правую руку бактериологический крючок и простерилизовали его на пламени горелки.
д) Не выпуская из руки крючка, мизинцем и безымянным пальцем правой руки прижать ватную пробку к ладони, вынули ее из пробирки и держали ее так во время последующих манипуляций.
e) Ввели крючок в пробирку и захватили небольшое количество материала, содержащего микроорганизмы, с поверхности агара. Закрыли пробирку пробкой и положили ее на стол.
ж) Приподняли крышку чашки Петри левой рукой и бактериологической петлей слегка коснуться поверхности агара и провести зигзагообразную черту — штрих. Петлю обожгли в пламени горелки, чтобы уничтожить оставшиеся на ней микроорганизмы.
з) Чашку Петри с посеянной культурой продуцента антибиотика подписали карандашом по стеклу и поставили в термостат на 28 °С.
Продолжительность выращивания продуцента на агаризованной среде 8—10 суток.
Схематичное пояснение: