
Тема 5. Генетика м/о.
ДНК в виде кольцевой «хромосомы», которая образует нуклеоид + плазмиды + транспозоны и IS-последовательности. Или двойная или одноцепочечная молекула ДНК/РНК.
Трансформации – изменение свойств путем проникновения чужого генетического материала. Тут нужны клетки, воспринимающие донорскую ДНК, - компетентные. Трансдукции – передача генетического материала от одних бактерий к другим с помощью фагов. а) неспецифическая – какой-нибудь случайный компонент, фаг – дефектный. б) специфическая – строго определенные гены может переносить. в) абортивная – перенесенный фагом фрагмент не встраивается, а располагается в цитоплазме и может функционировать. Лизогенная конверсия – изменение свойств лизогенной бактерии в приобретении способности продуцировать токсин, изменять морфологию. Связано с внесением информации. Коньюгация – перенос генов при скрещивании бактерий. Нужно наличие F+ и F- плазмид. Мутации. Модификации.
4.
5.
6.
ПЦР – группа молекулярно-генетических методов, которые обеспечивают амплификацию in vitro нуклеиновых кислот, с использованием базового принципа достройки олигонуклеотидной затравки и термостойкой ДНК-полимеразы. Все это обеспечивает возможность денатурации полученной ДНК без существенного изменения активности.
Универсальность, чувствительность, специфичность, быстрота.
Смесь: праймер правый и левый, буфер, dntp, матрица, вода. вазелин
Нормофлора человека
Облигатная, транзиторная, факультативная, персистирующие патогенные м/о.
Особенно много в «бессолнечных» местах и в сально-фоликульных устьях: Staphilococcus epidermidis & sarcophiticus, Candida.
Основная масса 99% зеленящий стафилококк + нейсерии и стафилококки.
Дрожжи, грибы, сарцины, лактобактерии (30 видов), но нет гнилостных
Лактобактерии, бифдумбактерии и E. colli. Их размножению препятствует наличие желчи и IgA
а) строгие анаэробы: G+: семейство Bifidobacterium 85%; G-: семейство Bacteriodacea. всего 96-99%.
б) факультативные анаэробы: G+: E. colli; G-: Enterococcus всего 1-4% + Lactobacillus
в) остаточная микрофлора (стафилококки, пептококи, пептосрепы, грибы Candida) 0,01-0,001%
М\о практически нет за исключением некоторого кол-ва стафилококков, дифтероидов.
Менее обильна, но очень разнообразна: стафилококки, стрептококки и т.д. Во влагалище – молочнокислые палочки Додерлейна. Полость матки, пузырь, трубы – нет м/о.
а) факторы естественной резистентности организма
б) стимулирует лимфопоэз
в) процессы пищеварения
г) обеспечение витаминами группы В, К, РР.
Дисбактериоз.
отягощение течения заболевания
заселение патогенными м/о
нарушение пищеварение
сдвиг рН в щелочную сторону
нарушение всасывания
снижение уровня дезинтоксикации
подавление регенерации слизистой
торможение перистальтики
гиповитаминозы
Тема 1.
а) бактериологический (чистые культуры); б) микроскопический; в) аллергический; г) иммунологический; д) биологический; е) молекулярно-генетический
10.Раздавленная капля. Висячая капля
а) приготовление мазка; б) высушивание; в) фиксация; г) микроскопия
Кокки, палочки, извитые
сарцины, тетракокки, стафилококки, стрептококки, диплококки
Streptococcus pyogenes
Стрептобактерии, коринебактерии, фузобактерии, диплобактерии, бактерии
спириллы, актиномицеты, боррелии, лентоспиры, вибрионы
по Граму, Цилю-Нильсену, Бурри
Окраска по Граму: генцианвиолет – люголь – спирт – вода – фуксин.
темно-фиолетовый
красный
генцианвиолет образует в протоплазме соединение, удерживаемое после обесцвечивания спиртом
Окраска по Цилю-Нильсену: карболовый фуксин Циля – подогрев до пара 2-3 раза – промывка водой – обесцвечивание 5%раствором серной кислоты – промывка водой – докрашивание метиленовой синей.
Кислотоустойчивые бактерии (рубиново-красные)
32. Связана с наличием миколевой кислоты и большим количеством липидов.
34-36. Окраска зерен волютина по Нейсснеру: для обнаружения дифтерийной палочки (зерна Бабеша-Эрнста). Уксускосиняя 1мин – вода – Люголь 20-30 сек – везувин 10-15сек – вода, сушка. Волютин окрашивается в темно-синий, черный.
Способ Ожешки: густой мазок – 0,5% раствор HCL (протрава), подогрев 2 мин – карболовый фуксин Циля – обесцвечивание 5% раствором серной кислоты – метиленовый синий 5 мин. Споры – ярко-красные.
Способ Гинса – из палочки Фридлендера приготовляют препарат (по Бурри) – фиксация на пламени – фуксин 1:3. Бактерии красные, капсулы неокрашенные. Капсулы черные.