Вариант 1

1.Кинетику аэробного окисления восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (NADH2) изучали при pH 7.38 и 30С. Скорость реакции регистрироовали спектрометрическим методом. измеряя уменьшение поглощения при 340 нм в течение 30 мин. Катализируемая реакция описывается следующим уравнением:

NADH₂ + рибофлавин  NAD + рибофлавинH₂

(микорибофлавин)

Время.мин	1	2	5	9	16.5	23	27	30
Поглощение при 340 нм	0.374	0.339	0.327	0.302	0.275	0.254	0.239	0.229

Определите константу скорости и порядок реакции.

2. В таблице приведены скорости гидролиза карбобензоксиглицил-L-фенилаланина химотрипсином в водном растворе при избытке субстрата при различных значениях температуры. Рассчитайте энергию активации распада комплекса фермент-субстрат (R=8,314 Дж /моль*град).

Tемпература	25	32	34,5	37
v, условные единицы/мк фер- мента	125	173	196	219

Построить график зависимости константы скорости реакции от температуры.

3. В таблице приведены начальные скорости катализируемой ферментом реакции при различных концентрациях субстрата. Определите v_max è K_m методом Лайнуивера-Бэрка, опредилите те же величины графически в координатах Эди-Хофсти, вычислите стандартные отклонения наклонов прямых и отсекаемых на координатных осях отрезков для каждого метода.

S, моль/л	V, моль/(л*мин)106	S, моль/л	v, моль/(л*мин)106
4,1*10-3	177	4,9*10-5	80
9,5*10-4	173	1,06*10-5	67
5,2*10-4	125	5,1*10-6	43
1,03*10-4	106

4. Реакция между 2-фенил-4,4-диметил-2-оксазолил-5-оном и этиловым эфиром DL-аланина в четыреххлористом углероде имеет первый порядок по каждому из реагентов. Найти константу скорости реакции, используя кинетические данные образования продукта реакции, этилового эфира N-(N’-бензоил--аминоизобутирил)-DL-аланина. Условия опыта: 20С, концентрация оксазолона и этилового эфира аланина 9,96*10^-3М и 2,22*10^-2 М соответственно.

Время, сек	Концентрация продукта реакции, моль/л*103
700	1,59
1700	3,30
2700	4,55
3700	5,52
4700	6,27
5700	6,88
6700	7,36
7700	7,76
8700	8,10
9700	8,36

Вариант 2

1. Тепловая денатурация протеолитического фермента трипсина представляет собой обратимый процесс; ход ее можно регистрировать по утрате ферментативноой активности ( при превращении нативной формы трипсина в неактивную денатурированную форму). Реакцию можно записать следующим образом:

трипсин(нативный) трипсин ( денатурированный)

активный неактивный

Влияние температуры на положение равновесия реакции было исследовано Ансоном и Мирским; некоторые результаты приведены ниже:

Температура, С 42 43 44 45 48 50

Денатурация,% 32,8 39,2 50,0 57,4 80,4 87,8

Рассчитайте энергию активации процесса денатурации трипсина.

2. Определить значения кинетических параметров v_max и K_m методом Лайнуивера-Бэрка, опредилите те же величины графически в координатах Эди-Хофсти, вычислите стандартные отклонения наклонов прямых и отсекаемых на координатных осях отрезков для каждого метода для каждого метода для гидролиза метилового эфира N-ацетил-L-валина, катализируемого -химотрипсином, исходя из данных таблицы. [Eo]=3,8*10^-5M

S, моль/л	V, моль/сек106	S, моль/л	v, моль/сек106
0,200	4,57	0,071	2,97
0,124	3,83	0,071	2,93
0,124	3,84	0,06	2,67
0,091	3,33	0,06	2,74
0,091	3,31

3. В таблице приведены данные эксперимента по изучению кинетики денатурации ДНК в водном растворе формальдегида. Найти порядок реакции и константу скорости реакции денатурации.

Доля нативной ДНК,%	Время, мин	Доля нативной ДНК,%	Время, мин
100	0	37,5	10
94,4	1	29,4	12
74,4	3	22,5	14
61,0	5	17,5	17
48,1	7	12,5	20

4. В реакции второго порядка A+BC концентрация вещества А составляла 5 ммоль/л, B-4,0 ммоль/л. Через 1с концентрация вещества А составила 4,0 ммоль/л, В- 3 ммоль/л. Каким будет соотношение концентраций веществ А и В через 3с.