
- •Технологія рекомбінантних днк методичні вказівки
- •Протокол № 8 від 19.02.2009
- •Передумови виникнення технології рекомбінантних днк
- •Генетичний код. Організація генів
- •Генетичний код
- •Двадцять амінокислот, які входять в склад білків
- •Приклади задач
- •Ендонуклеази рестрикції
- •Інші ферменти, такі як EcoRi, утворюють розриви, які проходять навскіс таким чином, що на кінці кожного ланцюга дуплекса днк лишаються короткі одноланцюгові хвости, відомі як “липкі кінці”:
- •“Липкі кінці” можна з’єднувати між собою та “липкими кінцями” інших днк.
- •Сайти рестрикцій найбільш відомих рестриктаз при нормальних умовах
- •Паліндромні тетра- та гексануклеотидні сайти впізнавання та розщеплення рестриктазами
- •Паліндромні пентануклеотдні сайти.
- •Ферменти з багатьма сайтами розпізнавання.
- •Приклади задач
- •Таким чином необхідно синтезувати полілінкер з 6 нуклеотидів –gggccc.
- •Задачі для самостійного розв’язання
- •Відповіді
- •Методи секвенування нуклеїнових кислот
- •Метод секвенування днк за Максамом – Гілбертом
- •Метод секвенування за Сенгером
- •Приклади задач
- •Задачі для самостійного розв’язання
- •Відповіді
- •Примітки Література
- •Навчальне видання Технологія рекомбінантних днк Методичні вказівки
Ферменти з багатьма сайтами розпізнавання.
AccI
AcyI
AftIII
AhaI
AraI
CfrI |
GT↓AGAC GT↓ATAC GT↓CGAC GT↓CTAC
GA↓CGCC GA↓CGTC GG↓CGCC GG↓CGTC
A↓CATGT A↓CGTGT A↓CACGT A↓CGCGT
GG↓CGCC GG↓CGTC GA↓CGCC GA↓CGTC
C↓CCGAG C↓CCGGG C↓TCGAG C↓TCGGG
C↓GGCCG C↓GGCCA |
GdiII
HaeI
HaeII
HgiAI
HgiCI
HgiJII |
T↓GGCCG T↓GGCCA
C↓GGCCG T↓GGCCG
AGG↓CCA AGG↓CCT TGG↓CCA TGG↓CCT
AGCGC↓C AGCGC↓T GGCGC↓C GGCGC↓T
GAGCA↓C GAGCT↓C GTGCA↓C GTGCT↓C
G↓GCACC G↓GCGCC G↓GTACC G↓GTGCC
GAGCC↓C |
HindII
NspBII
NspCI
XhoII |
GAGCT↓C GGGCC↓C GGGCT↓C
GTC↓AAC GTC↓GAC GTT↓AAC GTT↓GAC
CAG↓CTG CCG↓CTG CCG↓CGG CAG↓CGG
ACATG↓C ACATG↓T GCATG↓C GCATG↓T
A↓GATCC A↓GATCT G↓GATCC G↓GATCT |
Ферменти, для яких положення сайта розщеплення невідомо:
AvaIII ATGCAT
EcoDXI ATCA(N), ATTC
HgiEII ACCNNNNNNGCT
HinfIII CGAAT(25)*
G C
SduI G(A)GC(A)C
T T
SnaI GTATAC
*Число 25 означає, що розщеплення відбувається приблизно на відстані 25 нуклеотидів від сайта розпізнавання в 3′-напрямку.
Ферменти, які розпізнають розірвані паліндроми:
BglI GCCNNNN↓NGGC
BstEII G↓GTNACC
MstII CC↓TNAGG
SauI CC↓TNAGG
TthlllI GACN↓NNGTC
XmnI GAANN↓NNTTC
Ферменти, які розпізнають октануклеотидні послідовності:
NotI GC↓GGCCGC
SfiI GGCCNNNN↓NGGCC
Ферменти, які розпізнають непалендромні послідовності*:
BbvI GCAGC(N)8
CGTCG(N)12
BinI GGATC(N)4
CCTAG(N)5
FokI GCATG(N)9
CCTAC(N)13
HgaI GACG(N)5
CTGCG(N)10
HpbI GGTG(N)8
CCACT(N)7
MboII GAAGA(N)8
CTTCT(N)7
MnlI CCTC(N)7
GGAG(N)7
SfaNI GCATC(N)5
CGTAG(N)9
Tth111I CAAACA(N)11
GTTTGT(N)9
* Наведені послідовності двох ланцюжків ДНК, причому верхня відповідає 5′ → 3′-напрямку.