Тесты для самоконтроля подготовки к практическому занятию.

1. Выберите несколько правильных ответов. Биохимические функции цикла трикарбоновых кислот:

1) водороддонорная,

2) интегративная,

3) амфиболическая,

4)буферная,

5) энергетическая.

2. Выберите правильный ответ. Энергетическая ценность цикла Кребса:

1) 2 молекулы АТФ,

2) 4 молекулы АТФ,

3) 12 молекул АТФ,

4) 36 (38) молекул АТФ,

5) 130 молекул АТФ.

3. Выберите несколько правильных ответов. Коферменты окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты:

1) ТДФ,

2) амид липоевой кислоты,

3)НАД+,

4)ФАД

5) ФМН

4. Выберите несколько правильных ответов. Ферменты окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты:

1) цитратсинтетаза,

2) пируватдегидрогеназа,

3) дигидролипоилацетилтрансфераза,

4) дигидролипоилдегидрогеназа,

5) пируваткиназа

5. Выберите правильный ответ. В результате окислительного декарбоксилирования 2-оксоглутарата образуется:

1) ацетил-КоА,

2) сукцинил-КоА,

3) сукцинат,

4) оксалоацетат,

5) щавелевоянтарная кислота.

Ориентировочная основа действия для проведения самостоятельной работы студентов в учебное время.

Лабораторная работа №1. Качественная реакция на витамин в1 (тиамин)

Принцип метода. Реакция основана на способности тиамина (В₁) окисляться в щелочной среде под действием красной кровяной соли (феррицианид калия, K₃Fe(CN)₆) в тиохром, который обладает в ультрафиолетовых лучах сине-голубой флюоресценцией.

Порядок выполнения работы: В пробирку наливают 1 каплю 5% раствора тиамина (витамина В₁), прибавляют 5-10 капель 10% раствора NaOH, 1-2 капли 5% раствора K₃Fe(CN)₆ и взбалтывают. Прогрев флюороскоп в течение 5-10 мин., наблюдают сине-голубую флюоресценцию при облучении пробирки с раствором ультрафиолетовыми лучами. В выводах написать структурную формулу кофермента и указать связь с функционированием пируватдегидрогеназного комплекса и ЦТК.

Клинико-диагностическое значение: Витамин В₁ в виде своего пирофосфорного эфира (кофермент ТДФ) в организме человека в комплексе с другими коферментами – липоевой кислотой, коэнзимом А, НАД, ФАД – входит в состав полиферментного комплекса, осуществляющего окислительное декарбоксилирование α-кетокислот (в первую очередь, пировиноградной, а также α-кетоглутаровой), в результате чего образуется ацетил-КоА, который вступает в цикл трикарбоновых кислот (общий путь катаболизма). При недостаточном поступлении витамина В₁ в организм окисление пирувата нарушается, что приводит к развитию гипоэнергетических состояний и накоплению α-кетокислот в тканях. Авитаминоз В₁ вызывает характерное поражение сердечно-сосудистой и периферической нервной системы, известное как заболевание «бери-бери».

Лабораторная работа №2. Качественная реакция на витамин в2 (рибофлавин)

Принцип метода. Окисленная форма витамина В₂ представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В₂ основана на способности его легко восстанавливаться, при этом витамин В₂ изменяет свои физико-химические свойства. Источником водорода служит реакция взаимодействия соляной кислоты с металлическим цинком.

Порядок выполнения работы: В пробирку наливают 10 капель 0,025% раствора витамина В₂, добавляют 5 капель Hcl (конц.) и 1 зернышко металлического Zn.

Выделяющийся водород восстанавливает рибофлавин (раствор желтого цвета) через родофлавин (раствор розового цвета) в лейкофлавин (бесцветное соединение).

Сравните разные формы витамина В₂ по флюоресценции в ультрафиолетовых лучах.

В выводах написать восстановленную и окисленную формулу кофермента и указать связь с функционированием дыхательной цепи митохондрий.

Клинико-диагностическое значение: Витамин В₂ (рибофлавин) входит в состав коферментов флавиновых ферментов (ФАД и ФМН), которые участвуют в биологическом окислении, катализируя реакции дегидрирования. Типичным субстратом для флавиновых ферментов в процессе биологического окисления служит НАДН₂. При недостаточности рибофлавина в организме человека нарушаются окислительно-восстановительные процессы, что влечет возникновение характерных признаков гипо –и авитаминозов (поражение слизистых ротовой полости и губ, помутнение хрусталика, выпадение волос и др.).