С помощью цоликлонов

Группа	Цоликлоны
	Анти -А	Анти -В
О (/)αβ	-	-
А (//)β	+	-
В (///)α	-	+
АВ (/\/)0	+	+

Примечание: (+) - есть агглютинация, (–) - нет агглютинации

Возможные ошибки и сложности при определении групповой принадлежности крови

На полученный в ходе постановки реакции результат могут оказать своё влияние следующие факторы:

1) низкое качество реагентов – при этом наблюдается снижение агглютинабельных свойств сывороток крови при истечении срока годности, низком титре или при наличии признаков их порчи,

2) технические ошибки:

- недостатки внешней среды - плохая освещённость, температура в помещении более 25* или ниже 15*С (в этом случае возможна неспецифическая холодовая панагглютинация),

- нарушение техники постановки реакции - неверное расположение сывороток на планшете, нарушение соотношения сыворотки и эритроцитов, ранняя оценка результатов (до проявления агглютинации с антигеном А₂), не дифференциальная диагностика междлу псевдоагглютинацией (монетные столбики) и истинной агглютинацией (не внесён в подозрительные на агглютинацию лунки хлорид натрия 0,9%),

3) Особенности исследуемой группы крови:

- феномен Томсена – панагглютинация - это получение агглютинации крови со всеми сыворотками. Феном был впервые описан у больных с бактериемией и тяжёлым сепсисом

- аутоагглютинация – это наличие агглютинации сыворотки больного со всеми стандартными эритроцитами, а также агглютинация эритроцитов пациента со всеми стандартными сыворотками – такое состояние было описано при заболеваниях крови, спленомегалии, циррозе печени, и некоторых инфекциях.

В том случае, если при постановке реакции невозможно интерпретировать результат первоначально необходимо исключить пседоагглютинацию, и для этого в лунки, подозрительные на агглютинацию, добавляют физиологический раствор. Псевдоагглютинация при этом исчезает.

Если добавление физ. раствора убедило вас в наличии агглютинации, но при этом результат не соответствует возможным вариантам необходимо исключить техническую ошибку. Для этого реакицю ставят повторно, при этом обращают внимание на все аспекты, которые могут повлиять на результат, включая температуру окружающей среды, время постановки реакции, соотношение реагентов и так далее.

В тех случаях когда повторная постановки реакции выявляет признаков панагглютинации или аутоагглютинации, необходимо помнить, что эти эффекты сохраняются только при комнатной температуре, а при температуре тела они исчезают. В таких случаях для определения группы крови пациента необходимо подогреть все реагенты и провести реакцию в термостате при температуре 37*С.

Эритроцитарная антигенная система резус-фактора

1. Антигены системы резус были открыты в 1940 году К.Ландштейнером и А. Винером, и резус фактор оказался присущ 85% людей. В то же время у 15% людей этот фактор не был выявлен на эритроцитах. Детальное исследование этой антигенной системы позволило выяснить, что кроме первоначально выявленного резус-антигена (Rh₀) на поверхности эритроцитов может содержится ещё порядка 4-5 белков, принадлежащих данной антигенной системе.

Расшифровка генного кода и изучение генотипа в 70-80 годах прошлого столетия позволили узнать о том, что образование антигенов системы резус определяется 3-мя парами аллельных генов, которые согласно номенклатуре, предложенной Фишером Р. Рейсом, условно обозначили как Dd, Cc, Ee. Каждая из 2-х хромосом несёт только 3 АГ и лишь один из каждой пары. По этой причине полученная генная информация от родителей в организме следующего поколения детей формирует свою индивидуальную антигенную систему, в которой могут присутствовать от 3 до 5 антигенов системы резус. При этом была выявлена особенность, связанная с тем, что наличие гена d у обоих родителей не сопровождалось формированием какого-либо антигена на поверхности эритроцитов, и потому этот буквенное обозначение этого гена принято считать лишь условным обозначением при определении резус принадлежности и антигенной формулы пациента. Если рассмотреть все возможные генные абберации, то мы получим достаточное разнообразие возможных антигенных систем резус фактора (табл. 4).

Таблица 4 - Возможные генотипические и фенотипические варианты системы резус

Резус – положительный фактор (D, Du)		Резус отрицательный фактор (d)
Генотип (гены в хромосомах)	Антигены (белок на эритроцитах)	Генотип (гены в хромосомах)	Антигены (белок на эритроцитах)
DCE dce DcE DCe DCE Dce DcE dCe DCE dce	DCEce	dCE dce dCe dcE	dCEce
DCE DCe DCE dCe dCE DCe	DCEe	dCE dCe dCe dCE	dCEe
DCE DcE DCE dcE DcE dCE	DCEc	dCE dcE dcE dCE	dCEc
DCE DCE	DCE	dce dce	dce
DuCE DCE … DuCE dCE …	DCE DuCE

По своей структуре антигены системы резус относятся к липопротеидам и эта система формируется на 6-8 неделе внутриутробного развития. В конце ХХ века был выявлен ещё один антиген системы резус, который по своим свойствам оказался очень похож на антиген D, и потому был назван D^u. При этом было выявлено, что при сочетании генов D и D^u в организме фенотипически проявляется только D, а в том случае, если сочетание включает гены d и D^u, то на эритроцитах присутствует антиген D^u.

Современная терминология и номенклатура антигенов системы резус включает две классификации: 1) классификация Фишера – Рейса, 2) классификация Винера. Обозначение антигенов системы резус согласно данным классификациям представлено в таблице 5.

Таблица 5 – Номенклатура антигенов системы резус

Классификация	Антигены системы резус
Фишер - Рейс	D	C	E	d	c	e
Винер	Rh0	rh`	rh``	Hr0	hr`	hr``

2. Антитела системы резус – фактора. В отличие от системы АВО антитела система резус фактора не имеет врождённых антител и после рождения ребёнка в его крови имеются антигены системы резус на эритроцитах, а в плазме крови нет никаких антител к этим белкам. В процессе жизни формирование антител системы резус может быть спровоцировано попаданием чужеродного антигена при переливании крови, на эритроцитах которой содержаться отличные от собственного генотипа антигены, либо во время беременности при несоответствии антигенов системы резус матери и плода. При иммунизации чужеродным резус антигеном образующиеся изоиммуные антирезусные антитела содержаться не только в крови, но и во всех биологических жидкостях. Свойства антител системы резус: изоиммунные, иммуноглобулины G, содержат 2 активных центра, неполные, тепловые. Такие антитела дают видимую невооружённым взглядом агглютинацию только при постановке реакции в присутствии коллоидных средств или преципитирующей сыворотки.