
- •Понятие о группе крови
- •Определение группы крови по системе аво
- •Способы определения групп крови по системе аво в клинике
- •1. Определение группы крови стандартными сыворотками
- •С помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток
- •2. Определение групп крови стандартными эритроцитами
- •С помощью стандартных эритроцитов
- •3. Определение групп крови моноклональными антителами
- •С помощью цоликлонов
- •3) Особенности исследуемой группы крови:
- •Эритроцитарная антигенная система резус-фактора
- •Резус принадлежность доноров и реципиентов
- •Определение резус фактора
- •1. Экспресс – методы определения резус принадлежности
- •С помощью антирезусной сыворотки
- •2. Лабораторные методы определения резус принадлежности
- •Возможные ошибки при определении резус принадлежности
- •Клиническое значение групп крови
- •Вопросы для самостоятельного изучения студентами:
- •Список основной литературы
2. Определение групп крови стандартными эритроцитами
Для постановки реакции, которая проводится только в условиях лаборатории, необходимы стандартные эритроциты I, II, и III групп, заготовленные из крови доноров с соответствующими группами крови. Взятые у доноров эритроциты хранят не более 2-3 суток, при температуре 4-8*С. Кроме стандартных эритроцитов для постановки реакции необходима сыворотка крови пациента, физиологических раствор, планшет и палочки для смешивания реагентов. Методика постановки реакции практически не отличается от описанной ранее. На планшет в каждую из 6 лунок вносят по капле сыворотки пациента, затем добавляют в 10 раз меньшую каплю стандартных эритроцитов I, II, III групп двух серий, после чего содержимое лунок смешивают и наблюдают за реакцией в 5 минут. По окончании времени постановки реакции в лунки, подозрительные на агглютинацию добавляют физиологический раствор и интерпретируют полученный результат (табл. 2).
Таблица 2 – Результаты определения группы крови по системе АВО
С помощью стандартных эритроцитов
Группа |
Стандартные эритроциты |
|||
О (/)αβ |
А (//)β |
В (///)α |
АВ (/\/)0 |
|
О (/)αβ |
- |
+ |
+ |
+ |
А (//)β |
- |
- |
+ |
+ |
В (///)α |
- |
+ |
- |
+ |
АВ (/\/)0 |
- |
- |
- |
- |
Примечание: (+) - есть агглютинация, (–) - нет агглютинации
Результат перекрёстного способа считается достоверным, если совпадает с результатом групповой принадлежности крови, полученным при реакции со стандартными сыворотками. Если результаты реакции не совпадают, необходима повторная постановка обеих реакций.
3. Определение групп крови моноклональными антителами
В 1975 году для определения групповой принадлежности крови были получены моноклональные антитела – цоликлоны. Для получения моноклональных антител путём генной инженерии были созданы два вида гибридных клеток – гибридом за счёт слияния генетического материала клетки опухоли костного мозга и иммунного В лимфоцита. Полученные в результате этого слияния клетки способны к неограниченному делению и продукции антител против антигенов А или В. Полученные моноклональные антитела лиофилизируют, а затем в клинике и лаборатории их разводят в физиологическом растворе и получают два жидких реагента – цоликлон анти – А и цоликлон анти – В. Цоликлон анти-А имеет розовую окраску, а цоликлон анти- В имеет голубой цвет.
Методика постановки реакции. Для определения группы крови с помощью цоликлонов необходим планшет, цоликлоны анти-А и анти-В, скарификатор для получения крови, предметные стёкла или палочки для смешивания, спиртовые шарики и кровь пациента. Первоначально планшет маркируют ФИО пациента, затем наносят 2 капли цоликлонов, по одной капле цоликлона анти-А и анти-В. Затем в каждую лунку рядом с каплей цоликлонов вносят каплю крови больного в 10, раз меньше капли цоликлонов. После этого содержимое лунок смешивают индивидуальными палочками. Время постановки реакции составляет 3 минуты, после чего интерпретируют полученный результат (табл. 3).
Таблица 3 – Результаты определения группы крови по системе АВО