Способы определения групп крови по системе аво в клинике

Существует три основных способа определения группы крови по системе АВО: 1) определение группы крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками, 2) перекрёстный метод или определение группы крови с помощью стандартных эритроцитов и 3) определение группы крови с помощью цоликлонов (моноклональные антитела).

1. Определение группы крови стандартными сыворотками

Для определения группы крови в данном случае необходимы следующие компоненты: 1) стандартные изогемагглютинирующие сыворотки 1, 2, 3 группы по две серии каждая и одна серия стандартной сыворотки 4 группы, 2) планшет со смачиваемой поверхностью, 3) изотонический раствор NaCl, 4) иглы (скарификатор), 5) пипетки, 6) палочки (предметные стёкла) для смешивания реагентов, 7) спиртовые шарики для обработки кожи.

Перед постановкой реакции необходимо произвести макроскопическую оценку имеющихся стандартных сывороток. Каждая из сывороток должна быть прозрачной, без признаков гниения и порчи, в ней не должно быть ни каких включений. На этикетке должна быть отметка о сроках годности, титр не ниже 1/32, а для сыворотки 3 группы титр не ниже 1/16. Сыворотки должны храниться при температуре 4-8*С. Кроме того каждая из сывороток имеет свой цвет: 0 – без цвета, А – синяя, В – красная, АВ – жёлтая.

Методика постановки реакции. Первоначально необходимо подписать планшет и указать на нём ФИО пациента. Далее в каждую лунку помещают по 1 капле сыворотки 1, 2, 3 групп каждой из двух серий. После этого с помощью скарификатора получают кровь из пальца и с помощью предметного стекла или стерильной палочки вносят в лунку рядом с сывороткой каплю крови больного. Соотношение капли крови и сыворотки должно составлять 1:10. После смешивания капель в каждой из лунок индивидуальными палочками или уголками предметного стекла, наблюдают за течением реакции слегка покачивая планшет. Время постановки реакции составляет 5 минут. Через 3 минуты в лунки, где имеется подозрение на агглютинацию, добавляют изотонический раствор натрия хлорида и наблюдают течение процесса ещё 2 минуты. В том случае, если агглютинация произошла, при добавлении физ. раствора наблюдается просветление среды, а агглютинаты становятся более чёткими. В том же случае, если это была псевдоагглютинация, которая является следствием обратимого склеивания эритроцитов с формированием монетных столбиков, добавление физиологического раствора нарушает склеивание эритроцитов и возвращается равномерная окраска содержимого лунки.

Постановка реакции в течение 5 минут необходима для того, чтобы выявить позднюю агглютинацию с антигеном А₂. По окончании реакции производят интерпретацию результатов (табл. 1).

Таблица 1 – Результаты определения группы крови по системе АВО

С помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток

Группа	Агглютинация с сыворотками
	О (I)αβ	А (II)β	В (III)α	АВ (IV)0
О (I)	-	-	-	-
А (II)	+	-	+	-
В (III)	+	+	-	-
АВ (IV)	+	+	+	-

Примечание: (+) - есть агглютинация, (–) - нет агглютинации

Лабораторный метод идентификации сильного и слабого антигенов А1 и А2 проводят путём постановки реакции агглютинации с различными экстрактами растений, которые имеют тропность к каждому из них (А1 – агглютинирует с экстрактом семян Dolichos biflorus, А2 – агглютинирует с экстрактом семян Ulex Europeus).