Влияние раздражения блуждающего нерва и введения адреналина на диурез крысы

Согласно современным представлениям, процесс мочеобразования включает клубочковую фильтрацию, канальцевую реабсорбцию и канальцевую секрецию. Фильтрация первичной мочи в клубочках нефрона находится в прямой зависимости от уровня давления крови в приносящем сосуде. Доказательством этого может явиться опыт, демонстрирующий изменение уровня диуреза в зависимости от снижения или повышения артериального давления.

Для работы необходимы: электронный стимулятор, вилочковые электроды, универсальный штатив, шприц с иглами, полиэтиленовая трубка с канюлей, 0,1%-ный раствор адреналина, метиленовая синь, теплый физиологический раствор.

Объект исследования – крыса.

Проведение работы. Согласно указаниям, данным в предыдущей работе, производят обездвиживание крысы с помощью наркоза и оперативный подход к ее мочевому пузырю. Делают разрез кожи по средней линии шеи, расслаивают мягкие ткани под кожным разрезом до четко определяемых хрящей трахеи, по обеим сторонам которой располагается сосудисто-нервный пучок, состоящий из сонной артерии, симпатического и блуждающего нервов. Выделяют блуждающий нерв, подводят под него лигатуру и перевязывают как можно ближе к голове. Нерв перерезают и, приподняв, фиксируют периферический конец перерезанного нерва на вилочковых электродах, соединенных со стимулятором.

Чтобы обеспечить свободный отток мочи из мочевого пузыря, операционный столик устанавливают в наклонном положении.

Во время опыта крысу обогревают с помощью настольной лампы. Операционное поле обкладывают марлевыми салфетками и смачивают теплым раствором Рингера. Так же как и в предыдущей работе, в течение первых 10–15 мин определяют исходный уровень диуреза. Затем в кишечник с помощью шприца вводят теплую воду в количестве 6–8 мл. Через 5–10 мин начинается увеличение диуреза, что и продолжается в течение последующих 10–15 мин и более.

Если диурез настолько велик, что подкрашенный раствор Рингера еще до окончания опыта заполняет всю трубочку, то его отсасывают из резиновой трубки шприцем. Уровень жидкости доводят до уровня отсчета и продолжают наблюдение.

Через 10–15 мин после водной нагрузки начинают раздражать электрическим током блуждающий нерв. На фоне падения артериального давления наблюдают уменьшение диуреза. Такой же эффект наблюдают после введения внутримышечно 0,5 мл раствора адреналина.

Результаты работы и их оформление. Используя полученные данные постройте график, отражающий характер изменения диуреза под влиянием водной нагрузки, раздражения блуждающего нерва и введения адреналина. На оси абсцисс откладывается время в минутах, а на оси ординат – объем диуреза в миллиметрах. Момент введения воды в кишечник, как и раздражение блуждающего нерва и введение адреналина, отмечают стрелками.

Р а б о т а 3

Изучение некоторых компонентов мочи с помощью диагностических полосок «мультистикс-10»

За сутки человек выделяет в среднем около 1,5 л мочи. Состав мочи отражает не только функцию почек, но и состояние обмена углеводов, баланс кислот, функцию печени и т. д. В последние годы для быстрого предварительного анализа мочи, а также при массовых скриннинговых обследованиях применяют диагностические полоски различной модификации, которые визуально позволяют получить информацию, заменяющую биохимические исследования и процедуру микроскопии осадка мочи. Имеются диагностические полоски, которые, например, определяют только содержание глюкозы в моче. Диагностические полоски «Мультистикс-10» имеют наибольшее число тестов, а именно определяют: глюкозу, билирубин, кетоновые тела, удельную плотность, кровь, рН, белок, уробилиноген, нитриты, лейкоциты.

Глюкозы в обычных условиях не должно быть, поэтому положительный результат теста указывает на патологическое состояние. Следы билирубина в моче уже являются поводом для дальнейшего обследования. Причиной экскреции кетоновых тел могут быть нарушения углеводного и жирового обмена не только при патологии, но и при голодании, беременности, усиленной физической нагрузке. Удельная плотность мочи в норме в течение суток находится в пределах 1,016–1,022 и зависит от количества принятой жидкости. Если на реактогенной зоне «кровь» появляются зеленые пятна (неразрушенные эритроциты) или зеленый цвет (свободный гемоглобин, мио-глобин), показаны дальнейшие исследования. Колебания рН от 5,0 до 9,0 характерны как для нормальной, так и для патологической мочи. В моче здорового человека белок отсутствует или определяются его следы. Содержание уробилиногена в моче в норме составляет 0,2–1,0 мг/100 мл. Положительный результат на наличие лейкоцитов (даже следы присутствия) требует дальнейшего обследования.

Для работы необходимы: диагностические полоски и цветная шкала на этикетке флакона, пробирки для мочи, секундомер.

Объект исследования – моча здорового человека (целесообразно также исследовать мочу больных сахарным диабетом и с патологией почек).

Проведение работы. Диагностическую полоску погружают в пробирку со свежей нецентрифугированной мочой так, чтобы вся поверхность ее была смочена мочой. Засекают время по секундомеру и полоску быстро вынимают из мочи. Боковым краем полоски следует провести по краю пробирки с целью удаления излишков мочи. С целью сопоставления окраски полоску прикладывают вплотную к цветной шкале на этикетке флакона с диагностическими полосками так, чтобы каждая реактогенная часть полоски находилась рядом с соответствующим цветным участком шкалы. Для получения достоверных результатов важно провести сопоставление результатов реакции с цветовым кодом в точно заданное время. Реактогенные зоны полоски «Мультистикс» необходимо просматривать снизу вверх в следующем порядке: глюкоза и билирубин – 30 с, кетоновые тела – 40 с, удельная плотность – 45 с, кровь – 50 с, рН, белок, уробилиноген, нитриты – 60 с и лейкоциты – 2 мин. Для скриннингого отбора положительных и отрицательных результатов все реактогенные зоны диагностической полоски, исключая лейкоциты, можно сопоставить с цветным кодом в интервале между 1-й и 2-й минутами.

Результаты работы и их оформление. Запишите результаты исследования в таблицу. При обнаружении отклонений от физиологической нормы объясните возможные причины.

Р а б о т а 4