Питание микроорганизмов Занятие 1

1. Питательные среды, состав и свойства.

2. Приготовление плотных и жидких питательных сред для микроорганизмов.

3. Способы разлива питательных сред.

4. Посев микроорганизмов на плотные питательные среды.

5. Посев микроорганизмов на жидкие питательные среды

Оборудование, приборы, приспособления, материалы

Автоклав вертикальный – стерилизатор паровой ВК-30-01.

Электроплитка;

Спиртовка.

Бактериальная петля.

Стеклянный шпатель.

Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 50 или 200 г не ниже 3 класса точности.

Колбы конические плоскодонные 250-1000 см³.

Пипетки, градуированные по ГОСТ 29227 вместимостью 1 - 10 см³ или пипетки Пастера 1-10 см³.

Цилиндры по ГОСТ 1770 вместимостью 100 - 1000 см³.

Стаканы вместимостью 100и 250 см³

Воронки.

Чашки Петри.

Пробирки.

Кастрюля, штатив для бюретки, штатив для пробирок, установка для разлива питательных сред.

Агар-агар, пептон, физиологический раствор 0,44% и разнообразные соли, бактоагар, мясной бульон или среда Хоттингера.

Допускается использование других средств измерений, лабораторного оборудования, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками, не уступающими, перечисленным выше.

Краткие теоретические сведения

Питательные среды необходимы для роста и размножения микроорганизмов. Состав веществ, необходимых для питания бактерий, разнообразен. Сюда входят органогены: азот, углерод, водород и кислород. Последние используются микробами для построения белков клетки и как энергетическое сырье. Источниками углерода служат сахара, многоатомные спирты, кислоты, многочисленные органические соединения и т.п. Азот используется в составе белков животного и растительного происхождения (мясо, мука, казеин, горох, ячмень), в виде аминокислот и минеральных солей. Водород и кислород из воды. Наряду с основными органогенами о питательные среды входят неорганические соли, микроэлементы и ростовые вещества (витамины, способствующие построению активных групп ферментов). Главным условием в приготовлении сред является сбалансированность всех элементов и их удобоусвояемость микроорганизмами.

При бактериологических исследованиях питательные среды готовят таким образом, чтобы они удовлетворяли потребностям микроорганизмов к элементам питания, условиям жизнедеятельности (рН, температура и т.д.). Разные виды микробов развиваются только в определенной реакции среды. Таким образом, разнообразные потребности отдельных видов микроорганизмов обуславливают разнообразие питательных сред. Различают следующие основные питательные среды: натуральные (белковые), синтетические, дифференциально-диагностические и элективные (избирательные). Эти питательные среды, в свою очередь, подразделяются на твердые (плотные) и жидкие. Твердые среды зависят от состава питательного бульона, количества агар-агара или желатины, из которых они изготовлены. Они применяются для количественного учета бактерий, определения видового состава микроорганизмов, изучения их культуральных, морфолого-физиологических признаков. Жидкие среды используются при исследовании физиологических и биохимических свойств микроорганизмов.