Підготувати посуд до стерилізації Хід роботи

Посуд, який не був у вжитку, спочатку обов'язково кип'ятять у підкисленій воді (в 1% р-ні соляної кислоти), після чого промивають холодною водою і висушують. Бувший у вжитку посуд витримують добу у 20 % розчині соляної кислоти, миють у гарячій воді з застосуванням йоржа і ретельно ополіскують. Вимитий посуд не витирають, а висушують у сушильній шафі. У посуді, призначеному для поживних середовищ не можна зберігати дезінфікуючі речовини, так як їх "сліди" можуть мати летальну дію на м/о при вирощуванні їх у такому посуді. Посуд для желатини і середовищ з вуглеводами попередньо стерилізують у сушильній шафі протягом 1-2 год при 165-170 °С. Посуд для бульйону і агару стерилізують в автоклаві разом з середовищем, закритим ватними корками.

Ватні корки звичайно готують з гігроскопічної вати, яка не сильно | тліє, краще забезпечує стерильність субстрату у посуді, так як густі сплетіння ниток вати затримує поступання у посудину м/о, які є у довкіллі. Довжина корка не більше 3 см. Він повинен вільно входити у пробірку на 1-2 см, бути достатньо щільним, зберігати свою форму при чисельному відкриванні і закриванні пробірки. У деяких випадках корки обшиваються марлею. Для виготовлення корка беруть чотирикутну пластинку вати, загинають краї і закручують міцно валиком. Однак, потрібно врахувати, що надто щільні корки утруднюють постачання культур повітрям.

Чашки Петрі загортають кожну окремо, але можна по 2-3 чашки разом.

Піпетки. Кінці піпеток, які при роботі беруться в рот, вставляють ватні тампони. Піпетки загортають у довгі смужки паперу шириною 4-5 см. Обмотування починають з носика, слідкуючи за тим, щоб кінець піпетки був ретельно загорнутий папером. Поступовим рухом смужки паперу по спіралі закінчують обмотування біля протилежного кінця, загорнуті піпетки перед стерилізацією по декілька штук разом загортаються у папір чи поміщаються у спеціальні металічні чи картонні пенали.

Шпателі теж загортають окремо у папір.

Колби і пробірки закривають ватними корками, на колбу додатково надягають паперові ковпачки. Посуд, підготовлений до стерилізації, ставлять у сушильну шафу чи в автоклав не дуже щільно, щоб полегшити циркуляцію повітря і забезпечити рівномірне прогріття матеріалу. Не можна обгортати пробірки посудин целофаном чи іншими матеріалами, які не пропускають пару. Пара повинна вільно проникати через корок у посудину, інакше середовище не прогрівається до потрібної температури і стерилізація не відбувається.

Стерилізація живильних середовищ та розчинів Хід роботи

Після приготування живильних середовищ (МПА, МПБ, Ендо та ін), розчинів (пептонно-сольвого, 0,9 % натрію хлориду та ін.) згідно інструкції виробника та розливання у пробірки чи колби. Їх стерилізують в автоклаві, в основному, за температури (121±1) ºС протягом 15-20 хв.

Питання для самоконтролю

1. Що розуміють під терміном «стерилізація»? Розкажіть про призначення і сфери використання стерилізації?

2. Які Ви знаєте методи стерилізації? За допомогою якого обладнання вони виконуються?

3. Правила роботи з автоклавом.

4. Контроль правильного режиму стерилізації.