- •Введение
- •Микроорганизмов
- •1. Принципы систематизации и классификации микробов.
- •2. Идентификация микроорганизмов
- •3.1.2. Определение чистоты выделенной культуры.
- •3.1.3. Культуральные признаки.
- •А. Рост на плотных питательных средах.
- •Б. Рост на жидких питательных средах.
- •Б. Окраска препарата по Граму.
- •3.2.2. Методы исследования живых клеток. А. Препарат «раздавленная капля»
- •Б. Препарат «висячая капля».
- •В. Препарат «отпечаток»
- •3.2.3. Цитохимические методы исследования строения микробов а. Окраска капсул и приготовление красителей а) Окраска капсул
- •Б) Приготовление красителей для окраски капсул.
- •Б. Определение кислотоустойчивости бактерий.
- •В. Окраска спор и приготовление реактивов. А) Окраска спор
- •Б) Реактивы для окрашивания спор бактерий
- •Г. Окраска жгутиков а) Приготовление препарата
- •Б) Методы окрашивания.
- •В) Реактивы для окраски жгутиков.
- •Д. Окраска включений клеток микроорганизмов
- •Препараты для окрашивания включений.
- •Е. Выявление нуклеоида и приготовление реактивов а) Методы выявления
- •Б) Реактивы для выявления нуклеоида.
- •3.3. Определение физиолого-биохимических характеристик.
- •3.3.1. Отношение к кислороду
- •3.3.2. Отношение к температуре
- •3.3.3. Тест на окисление-брожение, или тест Хью-Лейфсона
- •3.3.4. Отношение к углеводам и пятиатомным спиртам
- •Д. Ввыявление индола и применяемые реактивы. А) Методы выявления
- •Б) Применяемые реактивы.
- •Е. Определение ферментов бактерий. А) Определение липазы
- •Б) Определение каталазы.
- •Ж. Выявление способности бактерий восстанавливать нитраты в нитриты.
- •З. Определение интенсивности кислотообразования.
- •И. Выявление аммиака.
- •1. Грамотрицательные формы
- •1.1. Грамотрицательные бактерии, не образующие спор
- •1.1.1. Скользящие бактерии
- •1.1.2. Почкующиеся и (или) стебельковые бактерии
- •1.1.3. Извитые бактерии
- •1.1.4. Спиральные и изогнутые бактерии
- •1.2. Грамотрицательные аэробные палочки
- •1.3. Крупные овальные или палочковидные клетки, свободноживущие аэробные азотфиксаторы
- •1.4. Бактерии, использующие метан и метиловый спирт
- •1.5. Солелюбивые палочки и кокки
- •1.6. Роды с неясным систематическим положением (аэробные овальные кокки и палочки)
- •1.7. Факультативно-анаэробные палочки
- •1.8. Роды с неясным систематическим положением
- •1.9. Грамотрицательные кокки и коккобациллы
- •1.10. Грамотрицательные анаэробные кокки
- •1.11. Грамотрицательные аэробные хемолитотрофные бактерии
- •1.12. Грамотрицательные облигатно-анаэробные палочки, образующие метан
- •1.13. Риккетсии
- •1.14. Микоплазмы
- •2. Грамположительные формы
- •2.1. Грамположительные аспорогенные палочковидные бактерии
- •2.2. Палочки и (или) коккобактерии аэробы или микроаэрофилы неясного систематического положения
- •2.3. Палочки и кокки, образующие эндоспоры
- •2.4. Грамположительные кокки
- •2.5. Актиномицеты и родственные им организмы
- •2.5.1. Секция 1. Паразиты и патогены человека и животных.
- •2.5.2. Секция II. Фитопатогенные бактерии
- •2.5.3. Секция III. Непатогенные каринобактерии
- •2.6. Бактерии с многогнездовыми спорангиями
- •2.7. Актинопланы
- •2.8. Стрептомицеты
- •Список литературы
- •Оглавление
1.1.2. Почкующиеся и (или) стебельковые бактерии
Группа очень разнородная, состоящая из бактерий, которые размножаются почкованием, образуют стебельки или то и другое одновременно. Разделение родов основано на морфологических признаках, причем культуру лучше всего рассматривать в фазово-контрастном микроскопе.
Род Hyphomonas
Клетки 0,6-1,0 мкм в диаметре и приблизительно 1,0 мкм длиной, бесцветные, яйцевидные, овальные или грушевидные. Узкий полюс образует трубкообразные, прямые или волнистые формы-выросты (простеки), которые могут ветвиться подобно гифам грибов и достигать 8 мкм в длину. Старые культуры часто содержат клетки аномального типа: гигантские, веретенообразные или треугольные формы с сильно разветвленными простеками. Размножаются путем почкования, но не делением пополам. За 1-2 часа почка созревает и отделяется от простеки материнской клетки. Вскоре после отделения почка становится подвижной, а стебелек материнской клетки слегка удлиняется перед образованием следующей почки. Наблюдалось также простое почкование без образования гиф. Спор не образуют. Грамотрицательные. На плотных питательных средах образуют колонии гладкого (S) или шероховатого (R) типа. Гладкие колонии круглые выпуклые, водянистые и просвечивающие, они легко эмульгируются. Шероховатые колонии встречаются реже, они меньше по размеру, складчатые и сухие. Рост на бульоне - в виде нежной вуали.
Аэробы. Каталазо- и пероксидазоположительные. Гетеротрофы. Сахара не расщепляют, желатин не разжижают, плазму крови не коагулируют, мочевину не гидролизуют, пигментов не образуют. Оптимальная температура роста - 37С, оптимум рН 7,0-7,4; восстанавливают нитраты и нитриты, нейтральный красный, метиленовый синий и сине-зеленый. Образуют H2S. Из триптофана образуют индол.
Устойчивы к лечебным концентрациям пенициллина, бацитрацив и фурадонина. Сильно ингибируются хлормицетином, стрептомицином, неомицином и сульфамидами. Тетрациклин и эритромицин оказывают несколько меньшее действие.
Хорошо растут на свернувшейся сыворотке, кровяном агаре, желатине, среде Левенитейна-Йенсена, агаре Дорсета и других обогащенных средах.
Вирулентны для морских свинок и кроликов (но не для мышей) при подкожной или внутрибрюшинной инъекции взвеси, содержащей 5*109 кл/мл.
1.1.3. Извитые бактерии
Порядок Spirochaetales
Тонкие, гибкие, спирально завитые одноклеточные бактерии длиной 3-5 мкм с одним или большим числом полных витков спирали. Могут встречаться в цепочках, объединенных внешней оболочкой, и могут принимать форму плоской волны. Размножаются поперечным делением. Клетка состоит из протоплазматического цилиндра, переплетенного с одной или более осевыми фибриллами, которые отходят в приблизительно равном числе от субтерминальных прикрепительных дисков, расположенных на обоих концах протоплазменного цилиндра. Протоплазменный цилиндр и осквик фибрилл заключены во внешнюю оболочку. Подвижны. Совершают движение 3-х типов: быстрое вращение вокруг длинной оси спирали, изгибание клеток, передвижение по волнообразному пути.
Спор не образуют. Клетки больших размеров. Грамотрицательны. Некоторые спирохеты имеют внутриклеточные включения. Расширение внешней оболочки может приводить к образованию концевых или центральных вздутий или спирохетных сфер, в которых протоплазменный цилиндр свернут кольцами внутри внешней оболочки.
Аэробы, анаэробы и факультативные анаэробы. Хемоорганотрофы. Свободноживущие, комменсалы или паразиты. Некоторые виды патогенны.
Мелкие формы лучше изучать в темнопольном или фазово-контрастном микроскопе.
Род Spirochaeta
Спиральные клетки (0,20-0,75*5,2-5,0 мкм) имеют осевые фибриллы, протоплазматический цилиндр обвивает эти фибриллы или извивается вместе с ними. Клетки не обладают ни концевыми крючками, ни поперечной исчерченностью. Подвижны, движутся с помощью осевых фибрилл. Свободноживущие, встречаются в иле, содержащем H2S, в сточных и загрязненных водах. Непатогенные. Хемоорганотрофы, облигатные или факультативные анаэробы, сбраживают углеводы с образованием кислот и газов. Один вид пигментирован. Свободнодвижущиеся.
Род Cristispira
Клетки одиночные, гибкие, 0,5-3,0 мкм толщиной, спирально свернутые или в форме плоской волны. Имеют до десяти полных витков. Концы клеток закруглены, суживаются или заострены и несут жесткую спикулу. Размножаются путем поперечного деления. Клетки могут содержать 30-80 лежащих друг за другом овальных включений неизвестного состава, так что на окрашенных препаратах имеют поперечную исчерченность. Подвижны. Могут образовываться центральные и терминальные вздутия.
Комменсалы. Широко распространены у морских и пресноводных двустворчатых и других моллюсков, обычно находятся в кристаллическом стебельке или в жидкости пищеварительного тракта, могут встречаться у иглокожих и у оболочников. Ни один вид не выращен в чистой культуре.
Род Treponema
Одноклеточные спиральные палочки длиной 5-20 мкм, толщиной 0,09-0,5 мкм образуют туго закрученные правильные или неправильные спирали. Клетки имеют одну или более осевых фибрилл, прикрепленных к обоим концам протоплазматического цилиндра. В старых культурах можно видеть вздутия и спирохетные формы. Подвижные. Грамотрицательные. Лучше всего наблюдаются в темнопольном и фазово-контрастном микроскопах. Хемоорганотрофы. Строгие анаэробы. Каталазо- и оксидазоотрицательные. Не гидролизуют мочевину, не восстанавливают нитраты, реакция Фогес-Проскауэра отрицательная, не ингибируются йодацетатом.
Встречаются в ротовой полости, пищеварительном тракте и половых органах человека и животных. Некоторые виды патогенны.
Род Borrelia
Клетки 0,2-0,5*3-20 мкм, спиральные, с тремя, десятью или более крупными, неровными, часто неправильными витками, некоторые витки могут образовывать тупые углы. Могут встречаться клетки толщиной до одного мкм и длиной до 25 мкм.
Электронная микроскопия выявляет пенистую эластичную оболочку и цитоплазматическую мембрану, между которыми лежит 15-20 параллельных фибрилл, обвивающих тело клетки. Подвижны. Движение происходит в виде прямых и обратных волн, а также путем изгибания и винтообразно. Грамотрицательные. Хорошо красятся анилиновыми красителями. Строгие анаэробы. Температурный оптимум 28-30С. Способны вызывать брожение. Патогенны. Вызывают возвратную лихорадку у человека.
Род Leptospira
Клетки одиночные, гибкие, спиральные, длиной 6-20 мкм или более, толщиной 0,1 мкм. Один или оба конца могут быть изогнуты под более или менее прямым углом к длинной оси или загнуты в виде крючка. У некоторых штаммов они могут терять крючковатую форму при пересевах на определенных средах. Подвижные. Движение трех основных видов: перемещение в любом направлении вдоль длинной оси, быстрое вращение вокруг длинной оси, изгибание. Плохо воспринимают красители. Хорошо наблюдаются в темнопольном микроскопе. Как показывает электронная микроскопия, тело клетки обвито вокруг аксистиля, оба эти элемента одеты общим внешним чехлом. Строгие аэробы. Хемоорганотрофы. Лучше размножаются в полужидких и жидких, но не плотных средах. Температурный оптимум 28-30С. Оптимум рН 7,2-7,4. Некоторые штаммы паразитируют у позвоночных и могут быть патогенными для них, другие - свободноживущие.