
- •Калининград
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Краткие теоретические сведения. Микрофлора воды.
- •Санитарно-показательные организмы
- •1.1. Отбор и транспортировка проб воды в лабораторию.
- •1.2. Санитарно-бактериологические показатели качества воды.
- •Порядок выполнения работы. Определение микробного числа воды.
- •1.3. Определение кишечной палочки в воде. Характеристика кишечной палочки.
- •Определение титра кишечной палочки в воде.
- •1.3.1. Метод мембранных ультрафильтров.
- •1.3.2. Двухэтапный бродильный метод определения коли-титра воды.
- •Нестандартные методы санитарно-микробиологических исследований воды.
- •1.3.3. Трехэтапный бродильный метод
- •1.3.4. Бродильный метод по Звенигородской
- •1.3.5. Метод прямого посева (метод Марманна)
- •1.3.6.Ускоренный метод анализа воды (метод Рублевской водонапорной станции)
- •1.3.7. «Сигнальный» анализ хлорированной воды
- •1.4. Принципы обнаружения в воде патогенных микроорганизмов.
- •1.4.1. Ускоренные методы исследования воды
- •1.5. Необходимые материалы:
- •Способность бактерии расщеплять мочевину.
- •1.6. Контрольные вопросы:
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора воздуха
- •2.2. Отбор проб воздуха
- •2.3. Исследование воздуха на санитарно-показательную микрофлору
- •2.4. Порядок выполнения работы
- •2.4.1. Определение микробного числа методом Коха.
- •2.4.2. Исследование микрофлоры воздуха с помощью прибора Кротова
- •2.4.3. Необходимые материалы
- •2.4.4. Контрольные вопросы
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •3.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора почвы и ее самоочищение
- •3.2. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •3.2.1. Порядок выполнения работы
- •Подготовка образца почвы для анализа
- •3.2.2. Определение микробного числа почвы
- •3.2.3. Определение титра кишечной палочки почвы
- •3.3. Ускоренный метод исследования кишечной палочки в почве
- •3.3.1. Бродильный метод с использованием ттх
- •3.3.2. Метод мембранных фильтров
- •3.4. Полный санитарно - микробиологический анализ почвы
- •3.4.1. Определение титра Cl. Perfringens
- •3.4.2. Обнаружение в почве протеев
- •3.4.3. Определение e. Coli методом прямого посева.
- •3.4.4. Определение термофильных бактерий
- •3.4.5. Исследование почвы на наличие Cl. Tetani (возбудитель столбняка)
- •3.4.6. Исследование почвы на наличие Cl. Botulinum
- •3.5. Оценка санитарно-микробиологического состояния почвы
- •3.6. Необходимые материалы
- •3.7. Вопросы для самоконтроля
- •Раздел 2 дезинфекция и производственная санитария
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Дезинфекция и производственная санитария
- •2.2. Факторы, влияющие на эффективность мойки и дезинфекции
- •2.2.1. Степень загрязненности
- •2.2.2. Концентрация дезинфицирующего раствора и режим дезинфекции
- •2.2.3. Режим ополаскивания
- •2.2.4. Режим течения моющих растворов
- •2.2.5. Концентрация и температура моющего раствора
- •2.3. Свойства моющих препаратов
- •2.3.1. Моющие препараты
- •2.3.1.1. Щелочные моющие препараты
- •2.3.1.2.Синтетические моющие препараты
- •2.4. Дезинфицирующие вещества
- •2.4.1. Хлорсодержащие дезинфектанты
- •2.4.2. Универсальные препараты
- •2.5. Определение эффективности действия дезинфицирующих препаратов.
- •2.5.1. Порядок выполнения работы
- •2.5.2. Определение бактерицидных свойств растворов дезинфицирующих препаратов
- •2.5.3. Определение фенольного коэффициента
- •2.6. Необходимые материалы:
- •2.7. Вопросы для самопроверки:
- •Раздел 3. Санитарно-гигиенический контроль на пищевом предприятии Глава 3.1. Санитарно-микробиологические анализы на пищевом предприятии
- •3.1.1. Смыв с рук
- •Определение общей обсемененности ладони
- •3.1.2. Определение кишечной палочки
- •3.1.3. Определение золотистого стафилококка
- •3.2. Исследование микрофлоры санитарной одежды.
- •3.3. Исследование микрофлоры технологического оборудования
- •3.3.1. Отбор и анализ смывов с тары для мелкой упаковки
- •3.3.2. Смывы с поверхности упаковочного материала
- •3.3.3. При производстве рыбы холодного и горячего копчения тару исследуют
- •3.4. Необходимые материалы
- •3.5. Вопросы для самопроверки.
- •Раздел 4. Микробиология водного сырья
- •4.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора рыбы-сырца
- •4.2. Микрофлора нерыбных объектов морского промысла
- •4.2.1. Микрофлора свежевыловленных беспозвоночных
- •4.3. Микробиологический анализ рыбы-сырца.
- •4.3.1. Определение общей численности бактерий (мафам)
- •4.3.1.1. Определение общей обсемененности рыбы-сырца бактериями чашечным методом (метод предельных разведений, метод Коха)
- •4.3.1.2. Определение общей обсемененности методом микропластинок (метод Фроста)
- •4.3.1.3. Арбитражный метод определения количества аэробных микроорганизмов.
- •4.3.1.4. Определение бактерий р. Salmonella в рыбе и рыбной продукции
- •4.3.1.5. Определение бактерий группы Proteus по методу Шукевича
- •4.3.1.6. Определение коагулазоположительного стафилококка.
- •4.3.1.7. Определение Vibrio parahaemolyticus (галофильный вибрион)
- •4.3.1.8. Выделение Bacillus cereus
- •4.3.1.9. Выделение Listeria monocytogenes
- •4.3.1.10. Выявление дрожжей и плесневых грибов (гост 10444.12-88)
- •4.4. Необходимые материалы
- •4.5. Микробиологические методы исследования беспозвоночных
- •4.5.1. Порядок выполнения работы
- •Порядок выполнения работы
- •4.5.1.1. Определение общей микробной обсемененности
- •4.5.1.2. Прямые методы.
- •4.5.1.2.1. Рост микробов на предметных стеклах с питательным агаром
- •4.5.1.2.2. Определение санитарно-показательных и патогенных организмов
- •4.5.1.2.3. Энтерококки.
- •4.5.1.2.4. Патогенный стафилококк.
- •4.6. Обработка полученных данных
- •4.6.1. Определение процентного соотношения бактериальных форм в посевах с водного сырья.
- •4.6.2. Выделение бактерий в чистую культуру и определение вида бактерии.
- •4.6.3. Идентификация микроорганизмов
- •4.6.4. Определение морфологических, культуральных и физиолого-биохимических признаков бактерий
- •4.6.4.1. Культуральные признаки.
- •А. Рост на плотных питательных средах.
- •Б. Рост на жидких питательных средах.
- •4.6.4.2. Морфологические признаки
- •Метод Фонтана
- •Метод серебрения жгутиков по Морозову
- •4.6.4.3. Определение физиолого-биохимических признаков Отношение к кислороду
- •Отношение к температуре
- •Тест на окисление-брожение, или тест Хью-Лейфсона
- •Отношение к углеводам и пятиатомным спиртам
- •Д. Выявление индола и применяемые реактивы. А) Методы выявления
- •Б) Применяемые реактивы.
- •Е. Определение ферментов бактерий. А) Определение липазы
- •Б) Определение каталазы.
- •Ж. Выявление способности бактерий восстанавливать нитраты в нитриты.
- •З. Определение интенсивности кислотообразования.
- •И. Выявление аммиака.
- •4.7. Вопросы для самопроверки
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
- •5.1. Краткие теоретические сведения
- •5.2. Определение концентрации антибиотика в продуктах
- •5.2.1. Определение концентрации антибиотика методом бумажных дисков.
- •5.2.2. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом канавки
- •5.2.3. Определение хлортетрациклина в продуктах
- •Построение калибровочной кривой
- •5.3. Необходимое оборудование для одного студента
- •5.4. Вопросы для самопроверки
- •Рекомендуемая литература
- •Содержание:
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •Раздел 2. Дезинфекция и производственная санитария
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
2.4. Дезинфицирующие вещества
Дезинфицирующие препараты – Это однородные химические вещества или смесь нескольких химических веществ, к которым могут быть добавлены различные компоненты для усиления их бактерицидного действия.
Для получения положительного дезинфицирующего эффекта необходимо, чтобы оборудование было предварительно хорошо вымыто. Если после мойки на оборудовании сохранились остатки пищевых продуктов, то последующая его дезинфекция может оказаться малоэффективной из-за инактивации дез.средства остатками продукта.
2.4.1. Хлорсодержащие дезинфектанты
В пищевой промышленности в качестве дезинфектантов широкое распространение получили препараты, содержащие активный хлор, такие как хлорная известь, двутретиосновная соль гипохлорита кальция, гипохлорит натрия. Под активным хлором понимают хлор, который вытесняется из перечисленных соединений под воздействием кислот (например, соляной). В основе действия дез.препаратов, содержащих хлор, лежат окислительные процессы. При растворении в воде данные препараты, независимо от их химического строения, образуют хлорноватистую кислоту, которая затем разлагается на атомарный кислород и хлор. Атомарный кислород губительно действует на микробы, окисляя компоненты цитоплазмы клетки, а также в процессе дезинфекции. В процессе дезинфекции хлор отнимает электролиты от органических веществ, в том числе и от веществ, входящих в состав цитоплазмы клетки. Препараты, содержащие активный хлор, энергично реагируют с аминокислотами. В результате происходит денатурация белков микробной клетки, что приводит к ее гибели.
Хлорная известь (ГОСТ 1692-58) CaClOCl – сложная смесь, состоящая из гипохлорида, хлорида и гидроокиси кальция. Хлорная известь представляет собой белый зернистый порошок с резким запахом, в зависимости от состава более или менее гигроскопичный. Качество хлорной извести оценивают по количеству свободного хлора, который может выделяться при воздействии на нее соляной кислоты. Количество активного хлора выражают в процентах ко всей массе вещества. Обычно в технической извести его содержание достигает 30-38%.
Хлорную известь получают, пропуская газообразный хлор через сухую гашеную известь (пушенку).
На открытом воздухе хлорная известь взаимодействует с влагой и СО2 и постепенно разлагается, превращаясь в полужидкую или комковатую массу. В присутствии воздуха, солнечного света, тепла и влаги, а также органических примесей и металлов, действующих каталитически, известь разлагается. С органическими веществами сухая хлорная известь реагирует бурно, реакция сопровождается вспышкой и взрывом.
Хлорная известь, поступающая в продажу, должна содержать не менее 25% свободного хлора. Для дезинфекции оборудования рекомендуется использовать осветленный раствор хлорной извести с содержанием хлора 150-200 мг/л активного хлора. Для приготовления осветленного раствора используют сухую хлорную известь, содержащую не менее 20% активного хлора.
Бесспоровые формы микробов погибают под воздействием водных взвесей хлорной извести с концентрацией активного хлора 4 - 12 мг/л в сравнительно короткий срок. Стойкие споровые формы также погибают в растворах хлорной извести, но несколько большей концентрации (более 12 мг/л). В кислой среде бактерицидное и спороцидное действие хлорной извести значительно усиливается. Для дезинфекции рекомендуется применять растворы с температурой не выше 250С, т.к. при более высокой температуре уменьшается растворимость хлора в воде, а гипохлориты превращаются в хлориды, не обладающие бактерицидной активностью.
Хранение хлорной извести допускается только в стандартной упаковке, в закрытых затемненных и хорошо вентилируемых помещениях при температуре не выше 20-250С и влажности воздуха не более 20%. Не допускается хранение в одном помещении с хлорной известью взрывчатых и огнеопасных веществ, смазочных масел, пищевых продуктов, металлических изделий и баллонов со сжатыми газами.
Лица, работающие с хлорной известью, должны быть обеспечены спецодеждой (резиновыми сапогами, перчатками, резиновым фартуком, защитными очками, респираторами).
Хлорная известь сильно раздражает дыхательные пути и глаза, иногда вызывает у рабочих бронхиальную астму.
Гипохлорит кальция Са(OCl)2 (капорит, кальциевая соль хлорноватистой кислоты) – кристаллический порошок желтоватого цвета с запахом хлора. Содержит 80-90% активного хлора. Соединение химически чрезвычайно активное. В кислых средах выделяет свободный хлор, в щелочных, в присутствии катализатора – свободный кислород, хорошо растворяется в воде. Растворы обладают сильными окисляющими свойствами. Гипохлорит кальция при хранении является более стойким, чем хлорная известь. Действие гипохлорита в 2,2 раза сильнее, чем хлорной извести. Гипохлорит кальция первого сорта содержит52%активного хлора, второго – не более 47%. Для дезинфекции оборудования применяют растворы с содержанием 150-200 мг/л активного хлора, экспозиция 3-5 минут при температуре 20-250С.
Гипохлорит натрия NaClO (ТУ 6-01-691-72) получают путем действия на хлорную воду раствором кальцинированной соды. Это жидкость с запахом хлора, мыльная на ощупь, хорошо смешивается с водой. Соединение малоустойчиво, хотя и обладает сильным дезинфицирующим действием. Для приготовления гипохлорита натрия 100 г хлорной извести растворяют в 3 литрах воды и смешивают с раствором, приготовленным из 200 г кальцинированной соды в 1,5 л воды. Бактерицидное действие гипохлорита натрия проявляется при 20-250С и экспозиция 3-5 мин.
Гипохлор. Это прозрачная, бесцветная или слегка зеленоватая жидкость со слабым запахом хлора, получаемая путем насыщения газообразным хлором до концентрации 2, 2,5, 5,0, 10% активного хлора водных растворов жидкого или твердого каустика или кальцинированной соды с последующим добавлением 1,5-2,0% антикоррозийного препарата – метасиликата натрия (силикатного клея).
Гипохлор обладает широким спектром микробоцидного действия, а также отбеливающим и дезорирующим свойствами.
Хлорамины – хлорпроизводные аммиака или органических аминосоединений, в которых атом хлора непосредственно соединен с атомом азота. Антисептическим действием обладают хлорамины органической природы. Их получают в результате взаимодействия газообразного хлора или хлорноватистой кислоты с органическими аминами и их солями. Они обладают дезинфицирующей способностью, т.к. под действием влаги разлагаются на исходный амин и хлорноватистую кислоту, которая в свою очередь, разлагается с выделением атомарного кислорода.
Хлорамин Б – С6H5SO2N · NaCl · 3H2O-N – хлорбензолсульфамиднатрий тригидрат . Он представляет собой мелкий кристаллический порошок со слабым запахом хлора, разлагающийся при нагревании со вспышкой. 1 часть хлорамина Б растворяется в 10 частях воды, раствор мутный, при кипячении не разлагается. В хлорамине Б содержится 20-25% активного хлора. Растворы хлорамина устойчивее, чем растворы хлорной извести, обладают меньшим запахом. Хлорамин в бактерицидных концентрациях содержит от 60 до 90 мг/л активного хлора, с повышением температуры раствора до 500С его бактерицидные свойства снижаются. Фенольный коэффициент хлорамина очень высок и составляет 200-300. Хлорамин хранят в плотно укупоренной стеклянной или деревянной таре, в этом случае первоначальное содержание хлора в препарате не изменяется.
Трихлоризоциануровая кислота С3О3N3Cl3 – желтоватый кристаллический порошок со слабым запахом хлора, устойчив при хранении, содержание активного хлора 86-91%, в воде растворяется очень плохо, обладает высоким антимикробным действием.
Натриевая соль изоциануровой кислоты С3О3N3Cl2Na·2H2O. Это порошок белого или слегка кремового цвета с незначительным запахом хлора. Препарат содержит не менее 52% активного хлора, хорошо растворяется в воде. Бактерицидные концентрации натриевой соли изоциануровой кислоты в два раза ниже, чем хлорамина Б.
Трихлоризоциануровую кислоту и ее соли вводят в состав моющих средств для придания им дезинфицирующих свойств.
Кроме названных препаратов для дезинфекции используют дихлоргидантоин, препараты гр. Бакто и др.
Иодофоры – это сложные соединения синтетических моющих веществ, в которых иод непрочно соединен с молекулой поверхностно-активного вещества. Для усиления бактерицидных свойств и улучшения стабильности к иодофору добавляют фосфорную кислоту, при этом бактерицидная активность иода усиливается, исчезает характерный запах иода, исключается его окрашивающая способность и раздражающее действие. При растворении в воде иодофоры образуют желтоватые растворы. Благодаря сочетанию моющих и дезинфицирующих свойств иодофоры можно использовать для одновременной мойки и дезинфекции оборудования.
Иодонаты – иодофоры, в которых в качестве носителя иода используется не фосфорная кислота, смесь алкилсуьфатов натрия.