
- •Калининград
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Краткие теоретические сведения. Микрофлора воды.
- •Санитарно-показательные организмы
- •1.1. Отбор и транспортировка проб воды в лабораторию.
- •1.2. Санитарно-бактериологические показатели качества воды.
- •Порядок выполнения работы. Определение микробного числа воды.
- •1.3. Определение кишечной палочки в воде. Характеристика кишечной палочки.
- •Определение титра кишечной палочки в воде.
- •1.3.1. Метод мембранных ультрафильтров.
- •1.3.2. Двухэтапный бродильный метод определения коли-титра воды.
- •Нестандартные методы санитарно-микробиологических исследований воды.
- •1.3.3. Трехэтапный бродильный метод
- •1.3.4. Бродильный метод по Звенигородской
- •1.3.5. Метод прямого посева (метод Марманна)
- •1.3.6.Ускоренный метод анализа воды (метод Рублевской водонапорной станции)
- •1.3.7. «Сигнальный» анализ хлорированной воды
- •1.4. Принципы обнаружения в воде патогенных микроорганизмов.
- •1.4.1. Ускоренные методы исследования воды
- •1.5. Необходимые материалы:
- •Способность бактерии расщеплять мочевину.
- •1.6. Контрольные вопросы:
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора воздуха
- •2.2. Отбор проб воздуха
- •2.3. Исследование воздуха на санитарно-показательную микрофлору
- •2.4. Порядок выполнения работы
- •2.4.1. Определение микробного числа методом Коха.
- •2.4.2. Исследование микрофлоры воздуха с помощью прибора Кротова
- •2.4.3. Необходимые материалы
- •2.4.4. Контрольные вопросы
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •3.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора почвы и ее самоочищение
- •3.2. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •3.2.1. Порядок выполнения работы
- •Подготовка образца почвы для анализа
- •3.2.2. Определение микробного числа почвы
- •3.2.3. Определение титра кишечной палочки почвы
- •3.3. Ускоренный метод исследования кишечной палочки в почве
- •3.3.1. Бродильный метод с использованием ттх
- •3.3.2. Метод мембранных фильтров
- •3.4. Полный санитарно - микробиологический анализ почвы
- •3.4.1. Определение титра Cl. Perfringens
- •3.4.2. Обнаружение в почве протеев
- •3.4.3. Определение e. Coli методом прямого посева.
- •3.4.4. Определение термофильных бактерий
- •3.4.5. Исследование почвы на наличие Cl. Tetani (возбудитель столбняка)
- •3.4.6. Исследование почвы на наличие Cl. Botulinum
- •3.5. Оценка санитарно-микробиологического состояния почвы
- •3.6. Необходимые материалы
- •3.7. Вопросы для самоконтроля
- •Раздел 2 дезинфекция и производственная санитария
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Дезинфекция и производственная санитария
- •2.2. Факторы, влияющие на эффективность мойки и дезинфекции
- •2.2.1. Степень загрязненности
- •2.2.2. Концентрация дезинфицирующего раствора и режим дезинфекции
- •2.2.3. Режим ополаскивания
- •2.2.4. Режим течения моющих растворов
- •2.2.5. Концентрация и температура моющего раствора
- •2.3. Свойства моющих препаратов
- •2.3.1. Моющие препараты
- •2.3.1.1. Щелочные моющие препараты
- •2.3.1.2.Синтетические моющие препараты
- •2.4. Дезинфицирующие вещества
- •2.4.1. Хлорсодержащие дезинфектанты
- •2.4.2. Универсальные препараты
- •2.5. Определение эффективности действия дезинфицирующих препаратов.
- •2.5.1. Порядок выполнения работы
- •2.5.2. Определение бактерицидных свойств растворов дезинфицирующих препаратов
- •2.5.3. Определение фенольного коэффициента
- •2.6. Необходимые материалы:
- •2.7. Вопросы для самопроверки:
- •Раздел 3. Санитарно-гигиенический контроль на пищевом предприятии Глава 3.1. Санитарно-микробиологические анализы на пищевом предприятии
- •3.1.1. Смыв с рук
- •Определение общей обсемененности ладони
- •3.1.2. Определение кишечной палочки
- •3.1.3. Определение золотистого стафилококка
- •3.2. Исследование микрофлоры санитарной одежды.
- •3.3. Исследование микрофлоры технологического оборудования
- •3.3.1. Отбор и анализ смывов с тары для мелкой упаковки
- •3.3.2. Смывы с поверхности упаковочного материала
- •3.3.3. При производстве рыбы холодного и горячего копчения тару исследуют
- •3.4. Необходимые материалы
- •3.5. Вопросы для самопроверки.
- •Раздел 4. Микробиология водного сырья
- •4.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора рыбы-сырца
- •4.2. Микрофлора нерыбных объектов морского промысла
- •4.2.1. Микрофлора свежевыловленных беспозвоночных
- •4.3. Микробиологический анализ рыбы-сырца.
- •4.3.1. Определение общей численности бактерий (мафам)
- •4.3.1.1. Определение общей обсемененности рыбы-сырца бактериями чашечным методом (метод предельных разведений, метод Коха)
- •4.3.1.2. Определение общей обсемененности методом микропластинок (метод Фроста)
- •4.3.1.3. Арбитражный метод определения количества аэробных микроорганизмов.
- •4.3.1.4. Определение бактерий р. Salmonella в рыбе и рыбной продукции
- •4.3.1.5. Определение бактерий группы Proteus по методу Шукевича
- •4.3.1.6. Определение коагулазоположительного стафилококка.
- •4.3.1.7. Определение Vibrio parahaemolyticus (галофильный вибрион)
- •4.3.1.8. Выделение Bacillus cereus
- •4.3.1.9. Выделение Listeria monocytogenes
- •4.3.1.10. Выявление дрожжей и плесневых грибов (гост 10444.12-88)
- •4.4. Необходимые материалы
- •4.5. Микробиологические методы исследования беспозвоночных
- •4.5.1. Порядок выполнения работы
- •Порядок выполнения работы
- •4.5.1.1. Определение общей микробной обсемененности
- •4.5.1.2. Прямые методы.
- •4.5.1.2.1. Рост микробов на предметных стеклах с питательным агаром
- •4.5.1.2.2. Определение санитарно-показательных и патогенных организмов
- •4.5.1.2.3. Энтерококки.
- •4.5.1.2.4. Патогенный стафилококк.
- •4.6. Обработка полученных данных
- •4.6.1. Определение процентного соотношения бактериальных форм в посевах с водного сырья.
- •4.6.2. Выделение бактерий в чистую культуру и определение вида бактерии.
- •4.6.3. Идентификация микроорганизмов
- •4.6.4. Определение морфологических, культуральных и физиолого-биохимических признаков бактерий
- •4.6.4.1. Культуральные признаки.
- •А. Рост на плотных питательных средах.
- •Б. Рост на жидких питательных средах.
- •4.6.4.2. Морфологические признаки
- •Метод Фонтана
- •Метод серебрения жгутиков по Морозову
- •4.6.4.3. Определение физиолого-биохимических признаков Отношение к кислороду
- •Отношение к температуре
- •Тест на окисление-брожение, или тест Хью-Лейфсона
- •Отношение к углеводам и пятиатомным спиртам
- •Д. Выявление индола и применяемые реактивы. А) Методы выявления
- •Б) Применяемые реактивы.
- •Е. Определение ферментов бактерий. А) Определение липазы
- •Б) Определение каталазы.
- •Ж. Выявление способности бактерий восстанавливать нитраты в нитриты.
- •З. Определение интенсивности кислотообразования.
- •И. Выявление аммиака.
- •4.7. Вопросы для самопроверки
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
- •5.1. Краткие теоретические сведения
- •5.2. Определение концентрации антибиотика в продуктах
- •5.2.1. Определение концентрации антибиотика методом бумажных дисков.
- •5.2.2. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом канавки
- •5.2.3. Определение хлортетрациклина в продуктах
- •Построение калибровочной кривой
- •5.3. Необходимое оборудование для одного студента
- •5.4. Вопросы для самопроверки
- •Рекомендуемая литература
- •Содержание:
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •Раздел 2. Дезинфекция и производственная санитария
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
2.4.4. Контрольные вопросы
1. Какая микрофлора характерна для воздуха?
2. Назовите патогенные стрептококки, встречающиеся в воздухе, опишите методики их выделения.
3. Назовите и опишите патогенные стафилококки, встречающиеся в воздухе.
4. Опишите выделение патогенных стафилококков из воздуха.
5. Опишите санитарно-микробиологический анализ воздуха методом Коха.
6. Расскажите об исследовании микрофлоры воздуха методом Кротова.
Глава 3. Санитарная микробиология почвы
3.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора почвы и ее самоочищение
Содержание и видовой состав микрофлоры почвы зависят от типа почвы. Почвы, богатые органическим веществом, содержат больше микроорганизмов. Численность микробов в почве определяется не только количеством, содержащегося в ней органического вещества, но также его количеством и доступностью для микробов. В почве присутствуют как аэробные , так и анаэробные бактерии, которые развиваются в глубине почвенных частиц или в симбиозе с аэробами, потребляющими кислород. Наличие в почве газообразного азота позволяет развиваться в ней азотфиксирующим бактериям. Размножение микробов в почве возможно только при достаточной влажности. Оптимальная для микробов влажность составляет 55 - 65% общей влагоемкости почвы. С повышением или понижением влажности жизнедеятельность микроорганизмов затрудняется. В относительно сухих почвах приспособились существовать актиномицеты и микроскопические грибы. Численность микробов в разных видах почвы составляет: огородная – 5,3ּ109 кл/г, пашня – 0,44ּ109, травяное болото – 0,71ּ109 кл/г, заболоченный луг – 0,55ּ109, подзол – 0,5ּ109 кл/г. В почве обитают микроскопические грибы, простейшие, водоросли, обнаруживаются вирусы, однако преобладают в почве бактерии. Основная масса микробов обнаруживается в слое почвы 10 - 20 см, на глубине 1 м находят тысячи клеток в грамме, на глубине 2 м - единицы, а на глубине 4 - 5 м почва практически стерильна.
Микроорганизмы почвы принимают участие в круговороте углерода, азота и других элементов. Органические вещества, проходя через почву, подвергаются химическому разложению. Углеводы окисляются или сбраживаются, жиры подвергаются гидролизу и дальнейшему окислению до СО2 и Н2О, белки гидролизуются до аминокислот, в дальнейшем они распадаются до аммиака и различных органических радикалов, которые в конце концов минерализуются. Окрашенные жидкости, проходя через почву, обесцвечиваются, мутные – просветляются, дурно пахнущие теряют свой запах. Эти свойства почвы широко используются на практике.
Почва принимает на себя максимальное количество загрязнений: в результате фекального загрязнения почва обогащается представителями микрофлоры кишечника –E. coli, p. Enterococcus, Cl. perfringens и др. Эти бактерии становятся практически постоянными обитателями почв, на которых осуществляется деятельность человека. Установлена прямая зависимость между степенью обсеменения почвы возбудителями столбняка и заболеваемостью, вызванной этим микробом. В почвах необитаемых районов патогенные анаэробы совершенно отсутствуют.
С фекалиями больных животных в почву могут попадать возбудители сибирской язвы. Они образуют в почве споры и длительное время сохраняются в ней. Во время выпаса на таких лугах скот заражается кишечной формой сибирской язвы, в свою очередь, загрязняет почву сибирской язвой. Так в прошлые времена образовались «проклятые поля». В почве неоднократно находили возбудителей холеры, брюшного тифа, дизентерии, кишечные вирусы, патогенных кокков и др.
Интенсивность бактериального загрязнения почвы определяется самоочисткой почвы от накапливающихся в ней нечистот, мусора, отбросов, характером самих загрязнений, природой микробов, находящихся в нечистотах, их устойчивостью к действию неблагоприятных факторов внешней среды, периодичностью загрязнения.
Для полного обезвреживания почвой отбросов требуется время и определенные условия. При систематическом и частом загрязнении почва не успевает обезвредить отбросы и микрофлора отбросов становится в почве господствующей, создаются условия для выживания патогенных микробов.
Во время дождей, таяния снега микрофлора поверхностных слоев почвы заносится в водоемы, так создаются условия для заражения источников водоснабжения.
Самоочищение почвы очень сложный процесс, он определяется рядом факторов, одним из которых является адсорбирующая способность почвы. Способность почвы к адсорбции микроорганизмов определяется как ее механической раздробленностью, так и свойствами адсорбируемого организма. Максимально адсорбирующей способностью обладают те частицы почвы, величина которых приближается к размеру микроорганизмов.
Bac. mycoides, Bact. prodigiosum поглощаются почвой на 80-90%, а E. coli – только на 10-20%. В супесчаной и глинистой почве кишечная палочка адсорбируется слабее, чем паратифозная. Грамположительные подвижные микроорганизмы адсорбируются в большей степени, чем малоподвижные и Грамотрицательные.
Каждому физико-химическому составу почвы присущ определенный микробный биоценоз, по разному влияющий на патогенные микробы, попадающие в почву, так возбудители брюшного тифа быстрее погибают в перегнойных почвах, это связано с тем, что в таких почвах интенсивно развиваются сапрофитные бактерии, которые являются антагонистами патогенных форм.
Интенсивность антагонизма между микробами зависит также от температуры почвы, влажности и др.
Самоочищение самых верхних слоев почвы происходит под действием солнечных лучей. Определенное значение имеет поедание микробов простейшими, лизис под влиянием бактериофагов, уничтожение бактерий бделловибрионами. Губительное влияние высушивания, рН почвы – это факторы, влияющие на процессы самоочистки почвы.