
- •Калининград
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Краткие теоретические сведения. Микрофлора воды.
- •Санитарно-показательные организмы
- •1.1. Отбор и транспортировка проб воды в лабораторию.
- •1.2. Санитарно-бактериологические показатели качества воды.
- •Порядок выполнения работы. Определение микробного числа воды.
- •1.3. Определение кишечной палочки в воде. Характеристика кишечной палочки.
- •Определение титра кишечной палочки в воде.
- •1.3.1. Метод мембранных ультрафильтров.
- •1.3.2. Двухэтапный бродильный метод определения коли-титра воды.
- •Нестандартные методы санитарно-микробиологических исследований воды.
- •1.3.3. Трехэтапный бродильный метод
- •1.3.4. Бродильный метод по Звенигородской
- •1.3.5. Метод прямого посева (метод Марманна)
- •1.3.6.Ускоренный метод анализа воды (метод Рублевской водонапорной станции)
- •1.3.7. «Сигнальный» анализ хлорированной воды
- •1.4. Принципы обнаружения в воде патогенных микроорганизмов.
- •1.4.1. Ускоренные методы исследования воды
- •1.5. Необходимые материалы:
- •Способность бактерии расщеплять мочевину.
- •1.6. Контрольные вопросы:
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора воздуха
- •2.2. Отбор проб воздуха
- •2.3. Исследование воздуха на санитарно-показательную микрофлору
- •2.4. Порядок выполнения работы
- •2.4.1. Определение микробного числа методом Коха.
- •2.4.2. Исследование микрофлоры воздуха с помощью прибора Кротова
- •2.4.3. Необходимые материалы
- •2.4.4. Контрольные вопросы
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •3.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора почвы и ее самоочищение
- •3.2. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •3.2.1. Порядок выполнения работы
- •Подготовка образца почвы для анализа
- •3.2.2. Определение микробного числа почвы
- •3.2.3. Определение титра кишечной палочки почвы
- •3.3. Ускоренный метод исследования кишечной палочки в почве
- •3.3.1. Бродильный метод с использованием ттх
- •3.3.2. Метод мембранных фильтров
- •3.4. Полный санитарно - микробиологический анализ почвы
- •3.4.1. Определение титра Cl. Perfringens
- •3.4.2. Обнаружение в почве протеев
- •3.4.3. Определение e. Coli методом прямого посева.
- •3.4.4. Определение термофильных бактерий
- •3.4.5. Исследование почвы на наличие Cl. Tetani (возбудитель столбняка)
- •3.4.6. Исследование почвы на наличие Cl. Botulinum
- •3.5. Оценка санитарно-микробиологического состояния почвы
- •3.6. Необходимые материалы
- •3.7. Вопросы для самоконтроля
- •Раздел 2 дезинфекция и производственная санитария
- •2.1. Краткие теоретические сведения. Дезинфекция и производственная санитария
- •2.2. Факторы, влияющие на эффективность мойки и дезинфекции
- •2.2.1. Степень загрязненности
- •2.2.2. Концентрация дезинфицирующего раствора и режим дезинфекции
- •2.2.3. Режим ополаскивания
- •2.2.4. Режим течения моющих растворов
- •2.2.5. Концентрация и температура моющего раствора
- •2.3. Свойства моющих препаратов
- •2.3.1. Моющие препараты
- •2.3.1.1. Щелочные моющие препараты
- •2.3.1.2.Синтетические моющие препараты
- •2.4. Дезинфицирующие вещества
- •2.4.1. Хлорсодержащие дезинфектанты
- •2.4.2. Универсальные препараты
- •2.5. Определение эффективности действия дезинфицирующих препаратов.
- •2.5.1. Порядок выполнения работы
- •2.5.2. Определение бактерицидных свойств растворов дезинфицирующих препаратов
- •2.5.3. Определение фенольного коэффициента
- •2.6. Необходимые материалы:
- •2.7. Вопросы для самопроверки:
- •Раздел 3. Санитарно-гигиенический контроль на пищевом предприятии Глава 3.1. Санитарно-микробиологические анализы на пищевом предприятии
- •3.1.1. Смыв с рук
- •Определение общей обсемененности ладони
- •3.1.2. Определение кишечной палочки
- •3.1.3. Определение золотистого стафилококка
- •3.2. Исследование микрофлоры санитарной одежды.
- •3.3. Исследование микрофлоры технологического оборудования
- •3.3.1. Отбор и анализ смывов с тары для мелкой упаковки
- •3.3.2. Смывы с поверхности упаковочного материала
- •3.3.3. При производстве рыбы холодного и горячего копчения тару исследуют
- •3.4. Необходимые материалы
- •3.5. Вопросы для самопроверки.
- •Раздел 4. Микробиология водного сырья
- •4.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора рыбы-сырца
- •4.2. Микрофлора нерыбных объектов морского промысла
- •4.2.1. Микрофлора свежевыловленных беспозвоночных
- •4.3. Микробиологический анализ рыбы-сырца.
- •4.3.1. Определение общей численности бактерий (мафам)
- •4.3.1.1. Определение общей обсемененности рыбы-сырца бактериями чашечным методом (метод предельных разведений, метод Коха)
- •4.3.1.2. Определение общей обсемененности методом микропластинок (метод Фроста)
- •4.3.1.3. Арбитражный метод определения количества аэробных микроорганизмов.
- •4.3.1.4. Определение бактерий р. Salmonella в рыбе и рыбной продукции
- •4.3.1.5. Определение бактерий группы Proteus по методу Шукевича
- •4.3.1.6. Определение коагулазоположительного стафилококка.
- •4.3.1.7. Определение Vibrio parahaemolyticus (галофильный вибрион)
- •4.3.1.8. Выделение Bacillus cereus
- •4.3.1.9. Выделение Listeria monocytogenes
- •4.3.1.10. Выявление дрожжей и плесневых грибов (гост 10444.12-88)
- •4.4. Необходимые материалы
- •4.5. Микробиологические методы исследования беспозвоночных
- •4.5.1. Порядок выполнения работы
- •Порядок выполнения работы
- •4.5.1.1. Определение общей микробной обсемененности
- •4.5.1.2. Прямые методы.
- •4.5.1.2.1. Рост микробов на предметных стеклах с питательным агаром
- •4.5.1.2.2. Определение санитарно-показательных и патогенных организмов
- •4.5.1.2.3. Энтерококки.
- •4.5.1.2.4. Патогенный стафилококк.
- •4.6. Обработка полученных данных
- •4.6.1. Определение процентного соотношения бактериальных форм в посевах с водного сырья.
- •4.6.2. Выделение бактерий в чистую культуру и определение вида бактерии.
- •4.6.3. Идентификация микроорганизмов
- •4.6.4. Определение морфологических, культуральных и физиолого-биохимических признаков бактерий
- •4.6.4.1. Культуральные признаки.
- •А. Рост на плотных питательных средах.
- •Б. Рост на жидких питательных средах.
- •4.6.4.2. Морфологические признаки
- •Метод Фонтана
- •Метод серебрения жгутиков по Морозову
- •4.6.4.3. Определение физиолого-биохимических признаков Отношение к кислороду
- •Отношение к температуре
- •Тест на окисление-брожение, или тест Хью-Лейфсона
- •Отношение к углеводам и пятиатомным спиртам
- •Д. Выявление индола и применяемые реактивы. А) Методы выявления
- •Б) Применяемые реактивы.
- •Е. Определение ферментов бактерий. А) Определение липазы
- •Б) Определение каталазы.
- •Ж. Выявление способности бактерий восстанавливать нитраты в нитриты.
- •З. Определение интенсивности кислотообразования.
- •И. Выявление аммиака.
- •4.7. Вопросы для самопроверки
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
- •5.1. Краткие теоретические сведения
- •5.2. Определение концентрации антибиотика в продуктах
- •5.2.1. Определение концентрации антибиотика методом бумажных дисков.
- •5.2.2. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом канавки
- •5.2.3. Определение хлортетрациклина в продуктах
- •Построение калибровочной кривой
- •5.3. Необходимое оборудование для одного студента
- •5.4. Вопросы для самопроверки
- •Рекомендуемая литература
- •Содержание:
- •Раздел 1. Санитарно-микробиологический анализ воды, воздуха, почвы.
- •Глава 1. Исследование микрофлоры воды.
- •Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
- •Глава 3. Санитарная микробиология почвы
- •Раздел 2. Дезинфекция и производственная санитария
- •Раздел 5. Использование антибиотиков в рыбной промышленности
1.6. Контрольные вопросы:
Что вам известно о микрофлоре воды?
Что необходимо учитывать при отборе проб воды для проведения анализа?
Как практически определить микробное число воды?
Что такое титр кишечной палочки воды?
Как определить титр кишечной палочки в воде методом мембранных ультрафильтров?
Расскажите, как определить титр кишечной палочки в воде методом бродильных проб.
Опишите ускоренные методы определения кишечной палочки в воде.
Глава 2. Санитарно-бактериологический анализ воздуха
Цель работы – знакомство с методами исследования микрофлоры воздуха
2.1. Краткие теоретические сведения. Микрофлора воздуха
Воздух является неблагоприятной средой для развития микроорганизмов. Однако, микрофлора в воздухе присутствует постоянно. Она попадает туда с пылью из почвы, с различными выделениями живых организмов. Микробы в воздухе находятся во взвешенном – аэрозольном состоянии. Общепринято, что микробы переносятся током воздуха, но в нем не размножаются, однако, это мнение оспаривается. Некоторые ученые полагают, что мельчайшие капли жидкости (туман) адсорбируются органическими веществами. Бактерии, находящиеся в воздухе, могут питаться за их счет и размножаться, но это не может значительно повлиять на численность микрофлоры в воздухе.
В воздухе городов микрофлоры больше, чем в воздухе лесов или полей. Над окультуренной, богатой органическими веществами почвой, микробов больше, чем над почвой пустынь, в одной и той же местности до дождя их больше, чем после дождя.
Загрязненность воздуха с высотой уменьшается, на высоте 500 м над Москвой в 1 л обнаружено не более 2-3 микробов, на высоте 1000 – немного более 1, на высоте 2000 м – менее одного. При удалении от города на одной и той же высоте обнаруживается в 3-4 раза меньше микробов, чем непосредственно над городом.
Максимальное количество микробов в воздухе обнаруживается в июне-августе, а минимальное – в декабре-январе.
Количество микробов в воздухе помещений обычно больше, чем в воздухе открытых мест. В 1 м3 воздуха учебных заведений может содержаться до 100 000 микробных клеток. Чем больше людей в помещении, чем больше пыли, чем хуже проводится уборка, тем выше содержание микробов. Естественно, что некоторые патогенные микробы, выделяющиеся со слюной и мокротой при кашле и чихании, могут находиться в воздухе и служить причиной заболеваний.
В воздухе обнаруживаются самые разнообразные виды бактерий. Особенно часто в воздухе встречаются кокковые формы, сарцины. В довольно большом количестве в воздухе встречаются клетки споровых аэробов, споры плесневых грибов, дрожжевые клетки, в воздухе лечебных учреждений обнаруживаются патогенные кокки.
Возможность выживания микроорганизмов в воздухе определяется устойчивостью данного микроба к высушиванию и ультрафиолетовому излучению. Так, возбудители туберкулеза, сибирской язвы, различные стафилококки погибают медленно, с другой стороны, менингококк, холерный вибрион погибают в этих условиях сравнительно быстро.
Механизм очищения воздуха от микрофлоры состоит в оседании бактериальных аэрозолей под действием гравитационных сил. Скорость оседания аэрозолей зависит от их размера:
Таблица 10
Зависимость скорости оседания аэрозолей от их размера
Диаметр капли, мкм |
Скорость оседания, см/сек. |
1,0 |
0,003 |
5,0 |
0,076 |
10,0 |
0,305 |
50,0 |
7,6 |
100,0 |
30,5 |
500,0 |
760,0 |
Осевшие на землю бактерии соединяются с пылью и превращаются в пылевую фазу аэрозоля. В 1 г пыли находится свыше 1 миллиона микроорганизмов. Бактериальная пыль из-за большого веса реже поднимается в воздух и потому имеет меньше эпидемиологическое значение, чем другие фазы бактериального аэрозоля.
Важным фактором самоочищения воздуха является его постоянное перемешивание. В подвижном воздухе возрастает вероятность столкновения бактериальных аэрозолей, что ведет к их слипанию, удельный вес частички возрастает, что облегчает их осаждение под действием силы тяжести. По этой же причине способствует самоочищению воздуха и повышенная влажность.
Хорошо известно губительное воздействие на микрофлору ультрафиолетового излучения, интенсивность воздействия ультрафиолета обратно пропорциональна степени запыленности воздуха, в запыленном воздухе бактерицидность ультрафиолетовых лучей резко падает.
Наконец, большинство бактериальных аэрозолей увлекается осадками – дождь, снег, которые образно называют промывными водами атмосферы.
Санитарно-микробиологическое исследование воздуха проводят в основном по двум направлениям:
А) определение микробного числа воздуха – количества микробов, находящихся в 1 м3 воздуха;
Б) исследование воздуха на наличие санитарно-показательных микроорганизмов (β – гемолитического, α – зеленящего стрептококка и гемолитического стафилококка) в том же объеме воздуха.
При выполнении анализа методом Коха при экспозиции чашки 20 мин на ней не должно вырастать более 200 колоний бактерий, а при просасывании 100 дм3 на приборе Кротова – не более 150 колоний.
Количество колоний плесневых грибов – не более 20 на среде Сабуро при анализе методом Коха и не более 15 при прососе 100 дм3 на приборе Кротова.