2.4. Механическая стерилизация (фильтрование).

Этот способ применяют для стерилизации жидкостей в тех случаях, когда их нельзя нагревать (сыворотка, некоторые лекарственные вещества). Жидкости фильтруют через специальные фильтровальные приборы, которые имеют настолько мелкие поры, что на своей поверхности задерживают все механические, взвешенные в жидкости частицы, в том числе и микробов. Для фильтрации в микробиологии применяют различные приборы.

В фильтрах Зейтца (рис. 5) используют асбестовые пластинки. Их выпускают двух степеней пористости: фильтрующие Ф и стерилизующие СФ. В лабораториях для стерилизации материала используют асбестовые пластинки марки СФ. Диаметр пластинок—от 35 до 140 мм. Малый и средний фильтры Зейтца состоят из верхней части — цилиндра без дна (приемник) и нижней — воронкообразного тубуса со снимающейся сеткой, на которую и накладывают асбестовую пластинку. Одна поверхность асбестовой пластинки гладкая, другая шероховатая. Закладывают пластинку между металлическими частями, которые плотно скрепляются винтами. Прибор вставляют через резиновую пробку в колбу Бунзена с боковым тубусом. Смонтированный прибор стерилизуют в автоклаве при 0,1 МПа в течение 20...30 мин.

С

Рис.6

Фильтроваль­ные свечи

Рис. 5 Фильтр Зейтца

вечи Шамберлана (с глазурной головкой) — это цилиндрические полые сосуды, изготов­ленные из мелкопористых веществ (каолина с примесью кварцевого песка). Свечи Шамберлана выпускают семи типов по размерам и девяти степеней по пористости (рис. 6). По пористости свечи Шамберлана обозначаются Li, Li(bis), L₃, Ls(F), L₇(B), L₉, Li i , Li₃. Настоящими бактериологическими фильтрами, пригодными для освобождения от бактерий, считают свечи от L5 и выше, имеющие наиболее мелкие поры. Свечи с обозначением Li пропускают все бактерии, Li(bis) задерживают только крупные микробные клетки, L₃ имеют поры диаметром 2,7мкм, задерживают, например, возбудителя дифтерии.

Свечи Мандлера состоят из массы, содержащей 60...80 % инфузорной земли, 10...30 асбеста и 10... 15 % гипса. Фильтры Мандлера марки Р пропускают все бактерии, марки R проходят клетки малых размеров, а марки F задерживают все бактерии, проходят только вирусы.

Свечи Беркефельда по пористости обозначают W, N, V, они имеют соответственно размеры пор (мкм): 3...4, 5...7, 8...12. Свечи Беркефельда (с металлической головкой) изготовлены из инфузорной земли. Фильтровальные свечи укрепляют при помощи резиновой прокладки в колбах Бунзена или цилиндрах.

Соответствие размеров пор свечей Шамберлана, Беркефельда, Мандлера следующее:

Свечи Шамберлана L_b Li(bis) L3, Ls(F) L₇(B), L₁₃ Свечи Беркефельда V N W

Свечи Мандлера Р R F

Фильтры ВГНКИ обозначают Ф-1, Ф-2, Ф-3, Ф-5, Ф-7 и Ф-11. Величина пор фильтра ВГНКИ в основном соответствует величине пор свечей Шамберлана (табл. γ)

Таблица 1. Размер пор фильтров ВГНКИ и свечей Шамберлана

Фильтры ВГНКИ	Свечи Шамберлана	Размер пор, мкм	Фильтры ВГНКИ	Свечи Шамберлана	Размер пор, мкм
Ф-1	L,	4,5...7	Ф-5	Ls(F)	1,3...1,9
Ф-2	Li(bis)	2,4.„4,5	Ф-7	L7(B)	0,9... 1,3
Ф-3	L3	1,9...2,7	Ф-11	L,3	До 0,9

Чем больше номер фильтра, тем меньше размер пор. Определяют размеры пор фильтров по скорости фильтрации воды при разрежении воздуха в Сосуде до 0,004 МПа (30 мм рт. ст.).

Перед употреблением свечи стерилизуют в автоклаве при температуре 120 °С в течение 20...30 мин. Для повторного использования свечи кипятят в течение 1 ч в воде, а затем после просушивания прокаливают в муфельной печи.

Свечи Шамберлана, Беркефельда, Мандлера и фильтры ВГНКИ монтируют на колбах с тубусом, из которых при фильтрации удаляют насосом воздух, или помещают в специальный аппарат, где фильтрация через свечу происходит при повышенном давлении. Для контроля стерилизации фильтрованием фильтрат высевают на питательные среды, которые затем помещают в термостат и выдерживают в аэробных и анаэробных условиях. Отсутствие роста на питательных средах указывает на правильность стерилизации.