2.2. Дробная стерилизация.
Стерилизацию текучим паром проводят в аппаратах Коха или текучепаровых апаратах (кипятильниках Коха).
Аппарат Коха (рис. 2) представляет собой металлический цилиндр, обшитый снаружи плохо проводящим тепло материалом — линолеумом или асбестом, с двойным дном и неплотно закрывающейся крышкой. Дно имеет термометр, кран для спуска воды и водомерное стекло. Внутри цилиндра (в нижней части) на стенках имеются выступы или металлические планки, на которые ставят дырчатые ведерки стерилизуемыми предметами. Воду наливают на дно цилиндра с таким расчетом, чтобы при кипении она не касалась дна ведерка. Аппарат ставят на газовую горелку.
Во включенном аппарате вода закипает, образующийся пар выходит через края неплотно закрытой крышки. Время стерилизации отсчитывают с того момента, когда температура пара достигнет 100 °С и он начнет выходить непрерывной струёй из отверстия верхней части аппарата.
Рис 2 Аппарат
Коха
Стерилизацию проводят при температуре 100 °С (температура пара) по 30...60 мин в течение 3 сут с промежутками в 18...20 ч, во время которых материал выдерживают в термостате или при комнатной температуре.
основе метода дробной стерилизации положен следующий принцип: при нагревании до 100 °С в течение 30...60 мин погибают все вегетативные формы микроорганизмов, споры остаются жизнеспособными, а в промежутке между стерилизацией прорастают в вегетативную форму. Через сутки проводят повторную стерилизацию. Обычно после третьей стерилизации достается полное обеспложивание объекта.
Стерилизовать текучим паром можно и в автоклаве. Крышку автоклава не привинчивают, выпускной кран оставляют открытым, пар свободно выходит наружу.
Время стерилизации отмечают с момента выхода пара непрерывной струёй и по достижении его температуры100°С.
Текучим паром стерилизуют питательные среды, не выдерживающие температуры выше 100 °С (желатин, молоко, углеводные среды).
Т
индализация
— это дробная стерилизация при низкой
температуре, предложенная Тиндалем
для объектов, не переносящих температуру
100 °С (среды с кровью, кровяной сывороткой,
яичным белком). Их нагревают в течение
5...6
сут подряд при температуре 56...58 °С по
1 ч ежедневно (в первые сутки — в течение
2
ч).
В промежутках между прогреванием
стерилизуемую жидкость хранят в
термостате. При этом оставшиеся в живых*
споры прорастают в вегетативные клетки,
которые погибают при последующем
нагревании. Тиндализацию проводят в
специальных приборах с терморегулятором
или на водяных банях (рис. 3).
Рис.
3 Водяные бани
Сухая стерилизация.
Прокаливание на огне, т. е. обжигание поверхности (фламбирование), — очень быстрый и надежный способ стерилизации. Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки применяют при стерилизации бактериологических петель, игл перед посевами, мелкого металлического инструмента (пинцетов, скальпелей), предметных стекол.
Стерилизацию сухим жаром (сухим нагретым воздухом) проводят в особых аппаратах — печах Пастера или сушильных шкафах.
П
Рис. 4 Печь Пастера
ечь Пастера (рис. 4) представляет собой металлический шкаф или ящик с двойными стенками. Наружная стенка его покрыта асбестом для уменьшения теплоотдачи. В верхней стенке имеются отверстия для термометра и вентиляции (отвода продуктов горения). Шкаф подогревается с помощью электронагревательного прибора. Горячий (нагретый) воздух поднимается снизу между стенками и через отверстия сверху попадает внутрь шкафа, свободно циркулирует в нем, обтекая стерилизуемые предметы, находящиеся на полках, а затем через отверстия внизу попадает в межстенное пространство и из него через отверстия в верхней наружной стенке шкафа выходит наружу.Недостаток печей Пастера — это неравномерное распределение температуры (внизу и около стенок она
выше, чем в середине).
Сухим жаром стерилизуют стеклянную посуду, пипетки, чашки Петри. Посуду перед стерилизацией высушивают и заворачивают в бумагу, пробирки и колбы закрывают ватными пробками. Это делают для того, чтобы после стерилизации их не обсеменять (не загрязнять) микробами из воздуха.
Продолжительность стерилизации сухим жаром при температуре 150 °С составляет '1.. ,1,5 ч.
По окончании стерилизации печь открывают только после того, как она остынет (в противном случае вследствие резкой разницы температур стеклянные предметы могут лопнуть).