
- •Методичні вказівки до лабораторних робіт з біохімії (заочне відділення)
- •Техніка безпеки при роботі у біохімічній лабораторії
- •Забороняється з метою уникнення травм, опіків, нещасних випадків:
- •Перша домедична допомога
- •Заняття 1 Тема: Якісні (кольорові) реакції на амінокислоти та білки
- •ХIд роботи
- •Заняття 2 Тема: Властивості білків
- •ХIд роботи
- •Заняття 4 Тема: Властивості вуглеводів
- •Хід роботи
- •Заняття 5 Тема: властивості лІпІдІв
- •Хід роботи
- •Заняття 6 Тема: властивості нуклеопротеЇдІв
- •Хід роботи
- •Заняття 7 Тема: загальні властивості ферментів
- •Хід роботи
- •Заняття 8 Тема: Якісні реакції на водорозчинні і жиророзчинні вітаміни
- •Хід роботи
- •ВодоРозчинні вітаміни
- •ЖироРозчинні вітаміни
- •Заняття 10 Тема: Визначення молочної кислоти у біологічному матеріалі
- •Хід роботи
- •У пробірки відміряють послідовно, відповідно таблиці, біологічну рідину і робочі розчини. Для зменшення похибки аналізу рекомендується притримуватися обговореного порядку змішання розчинів.
- •Заняття 12 Тема: Визначення концентрації загального холестерину у біологічних рідинах (за методом Ілька)
- •Хід роботи
- •Хід роботи:
- •Питання до іспиту з біохімії
- •Рекомендована література Основна:
- •Додаткова:
Заняття 5 Тема: властивості лІпІдІв
Мета заняття: вивчити властивості жирів і жироподібних речовин.
Хід роботи
Практичне значення роботи: За допомогою якісних реакцій визначають у біологічних рідинах продукти розщеплення ліпідів.
Матеріали і реактиви: колба ємністю 50 мл, піпетки, спиртівка, сірники; рослинна олія, 50%-ий спиртовий розчин калій гідроксиду, концентрована хлоридна кислота, 5%-ий розчин барій хлорид, 5%-ий розчин плюмбум ацетат, кристалики калій гідросульфату, гліцерол, хлороформний розчин холестеролу, концентрована сульфатна кислота.
Дослід 1. Омилення жиру (проводиться попередньо).
Принцип методу: Жири під впливом лугів гідролізуються з утворенням мила і гліцеролу.
Хід роботи: У колбу з 1 мл рослинної олії додають 20 мл спиртового розчину калій гідроксиду, суміш перемішують і кип'ятять. Щоб перевірити відбувся гідроліз чи ні, відбирають у пробірку декілька крапель даного розчину і додають 1 мл дистильованої води. При наявності жирових крапель гідроліз продовжують далі.
Після омилення, розчин розводять до об’єму 20 мл дистильованою водою, і таким чином одержують розчин калієвого мила, з якого виконують досліди 2-4 для визначення наявності в ньому гліцеролу, жирних кислот і одержання нерозчинних мил.
Дослід 2. Одержання вільних жирних кислот.
Принцип методу: При додаванні до мила концентрованої соляної кислоти утворюються вільні жирні кислоти.
Хід роботи: У пробірку з 2 мл розчину калієвого мила додають 0,5 мл концентрованої хлоридної кислоти. Жирні кислоти, що утворюються, нерозчинні у воді тому будуть збиратися на її поверхні.
Дослід 3. Якісна реакція на гліцерол (акролеїнова реакція).
Принцип методу: При нагріванні гліцеролу з гідросульфатом калію відбувається дегідратація, у результаті якої гліцерин перетворюється в акролеїн-ненасичений альдегід етилового ряду зі специфічним запахом.
Хід роботи: На дно двох пробірок кладуть декілька кристаликів калій гідросульфату, потім в одну пробірку вносять 5 крапель розчину, отриманого в досліді 1, а в другу – 5 крапель гліцеролу, нагрівають у полум'ї пальника.
Утворення акролеїну визначають за характерним запахом альдегіду – запах горілого сала.
Дослід 4. Одержання нерозчинних мил.
Принцип методу: При додаванні до розчину калієвого мила розчину солей барію і плюмбуму утворюються нерозчинні солі жирних кислот.
Хід роботи: У 2 пробірки з 2 мл розчину калієвого мила вносять відповідно по 1 мл розчину барій хлориду і плюмбум ацетату. Спостерігають утворення білих осадів нерозчинних барієвого і свинцевого мил.
Дослід 5. Якісна реакція на холестерол (реакція Сальковського).
Принцип методу: Реакції якісного виявлення холестеролу засновані на його спроможності перетворюватися з вторинного спирту в ненасичений вуглеводень.
Хід роботи: У суху пробірку вносять 0,5 мл розчину холестеролу в хлороформі, додають 0,5 мл концентрованої сульфатної кислоти і обережно струшують. Після розшарування фаз спостерігають за зміною фарбування: верхній прошарок, що містить холестерол у хлороформі, забарвлюється в пурпурно-червоний колір, а нижній (прошарок сульфатної кислоти) – у темно-червоний колір із зеленою флуоресценцією. Забарвлення згодом переходить у фіолетове, потім зелене і, нарешті, у жовте.
Результати дослідів вносять у таблицю такої форми:
№ з/п |
Назва досліду |
Реактиви, які застосовують |
Що спостерігається |
Висновок |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
|
|
|
|
В кінці лабораторної роботи зробити загальний висновок.