II. Изучение нативного препарата эякулята.

Изучение нативного препарата проводится с ориентировочной целью. При микроскопии нативного препарата можно приблизительно оценить количество сперматозоидов и их функциональную активность, а также можно обнаружить наличие элементов воспаления (лейкоцитов, слизи, эпителия) и флору.

Приготовление и микроскопия нативного препарата эякулята осуществляется аналогично приготовлению и микроскопии препарата секрета предстательной железы.

III. Подсчет количества сперматозоидов в эякуляте.

Подсчет количества сперматозоидов в эякуляте проводится с использованием камеры Горяева. Перед заполнением камеры эякулят разводят 1% раствором метиленового синего не для окрашивания биоматериала, а для обездвиживания сперматозоидов. К 0,4 мл красителя прибавляют 0,02 мл эякулята, перемешивают содержимое пробирки, в которой осуществлялось разведение и заполняют камеру Горяева. Сперматозоиды подсчитывают в 5-ти средних квадратах, разделенных на 16 малых и расположенных по диагонали сетки камеры Горяева. Сперматозоид считают относящимся к данному квадрату в том случае, если его головка лежит в пределах квадрата, при этом хвост может находится за пределами квадрата. Полученный при подсчете в камере Горяева результат умножают на 10⁹.

В норме количество сперматозоидов в эякуляте составляет 60 - 150х10⁹/л. Уменьшение количества сперматозоидов в эякуляте называется олигоспермия. Различают три степени олигоспермии.

При олигоспермии I степени количество сперматозоидов в эякуляте меньше 60х10⁹/л, но не менее 30х10⁹/л, при олигоспермии II ст. - меньше 30х10⁹/л, но не менее 10х10⁹/л, при олигоспермии III ст. - меньше 10x10⁹/л. Отсутствие сперматозоидов в эякуляте называется аспермия.

Олигоспермия и аспермия могут быть обусловлены врожденными аномалиями строения полового аппарата, гормональными нарушениями (гипофизарная или тестикулярная недостаточность), а так же воспалительными заболеваниями половых органов.

IV. Подсчет активно-подвижных, слабо-подвижных и неподвижных сперматозоидов.

Для подсчета неподвижных и слабо-подвижных сперматозоидов готовят разведение эякулята с изотоническим раствором хлорида натрия. В пробирку вносят 0,4 мл изотонического раствора хлорида натрия и прибавляют 0,02 мл эякулята, перемешивают содержимое пробирки и заполняют камеру Горяева.

Микроскопируют при увеличении х8, с закрытой диафрагмой. В 5-ти средних квадратах, разграфленных на 16 малых и расположенных по диагонали сетки камеры, подсчитывают, отдельно, неподвижные и слабо-подвижные сперматозоиды. Слабо-подвижными считаются сперматозоиды, совершающие маятникообразные движения - только головкой или только хвостиком.

Для подсчета общего числа сперматозоидов готовят разведение эякулята с 1% раствором метиленового синего и подсчитывают сперматозоиды как было описано в предыдущей методике.

Расчет количества активно-подвижных сперматозоидов делают по формуле:

X = А - (В + С), где

• X - количество активно-подвижных сперматозоидов;

• А - общее количество сперматозоидов в 5-ти квадратах сетки камеры Горяева;

• В - количество неподвижных сперматозоидов;

• С - количество слабо- подвижных сперматозоидов.

После этого рассчитывают процентное содержание каждого вида сперматозоидов в эякуляте, принимая за 100% общее количество сперматозоидов.

В норме активно-подвижные сперматозоиды составляют 70 % и более,

слабо­подвижные - 10-20 %,

неподвижные - не более 10 %.

Уменьшение количества активно-подвижных сперматозоидов в эякуляте называется астенозооспермия или астеноспермия. Такой симптом может наблюдаться при частичной обструкции семявыносящих протоков, а так же при тестостероновой недостаточности и при хронических орхитах или (и) эпидидимитах.