4.1.1. Использование гжх для изучения состава жирных кислот природных масел, жиров и липидов

Метод ГЖХ широко используют для анализа жирных кислот, раститель-ных масел и липидов, выделенных из продуктов питания. Этим методом могут быть определены кислоты, различные по структуре, а также их изомеры с числом углеродных атомов от 1 до 30.

Для эффективного решения проблемы, особенно при разделении жирных кислот в условиях низких температур, а также для получения точных данных при проведении анализа, липиды обычно анализируют в виде метиловых эфи-ров. Метиловые эфиры жирных кислот представляют собой продукты алкого-лиза глицеридов метанолом в присутствии щелочных катализаторов (алкоголя-тов натрия либо калия).

Качественная идентификация полученных на хроматограмме эфиров жир-ных кислот основана на сопоставлении объема или времени удерживания ана-лизируемых компонентов с объемом или временем удерживания компонентов стандартных образцов, которые при различных температурах опыта сведены в специальные таблицы и приводятся в соответствующих атласах.

Сигнал

Время, мин

Рис. 4.3. Хроматографические пики метиловых эфиров жирных кислот: С₁₆ – пальмитиновая; С₁₈ – стеариновая; С_18:1 – олеиновая; С_{18: 2} – линолевая; С_{18: 3} – линоленовая. τ_R (V_R) – исправленное время (объем) удерживания

Рис. 4.4. Зависимость логарифма относительного (по пальмитату) объема удерживания (lg ) от числа углеродных атомов в цепи для гомологических рядов метиловых эфиров жирных кислот: 1 – насыщенных, 2 – моно-, 3–ди- и 4 – триэтиленовых

Приведенная на рис. 4.3 хроматограмма представляет общий вид пиков, отвечающих метиловым эфирам различных жирных кислот льняного масла (пальмитат, стеарат, олеат, линолеат, линоленат).

Существуют также другие способы идентификации, в основе которых ле-жит линейная зависимость между объемом удерживания (V_R) или его десятич-ным логарифмом (lgV_R) от числа атомов углерода, содержащегося в молекуляр-ной цепи анализируемого компонента (см. рис. 4.4).

Для количественного определения жирных кислот чаще всего используют описанный выше метод внутренних стандартов (нормировки): т.е. сумму пло-щадей всех пиков принимают за 100%, и после вычисления площади компо-нента (S_i) определяют содержание -компонента по формуле:

, (4.10)

где κ_i – поправочный коэффициент, определяемый чувствительностью детек-тора к конкретному компоненту.

, (4.11)

где M_i – молекулярный вес – компонента;

Z_i – число атомов углерода в молекуле – компонента.

Для проведения анализа требуется наличие хроматографа с пламенно-ионизационным детектором, способным проводить контроль процесса при тем-пературе t = 220–290ºС [4].