Испытание на подлинность

1. ИК-спектры поглощения – сравнивают со спектром СО или рисунком ИК-спектра СО, который приводится в НД.

2. УФ-спектрометрия. Все вещества поглощают свет в УФ – области спектра (ядро хинолина – ароматическое и дополнительные хромофоры – ароматическая группа; -С=О группа; группа в 4 положении фторхинолонов)

Снимают УФ-спектры фторхинолонов либо в 0,1 М НСl либо в 0,1 М NaOH (ломефлоксацин) и сравнивают с УФ-спекторм СО или рисунком УФ-спектра СО (max и min спектра испытуемого образца и СО должны совпадать)

Амфотерные свойства этих лекарственных веществ обусловливают их различную диссоциацию и специфику их спектров поглощения в УФ-области в растворах кислот и щелочей. НД на хлорхинальдол предусматривает определение УФ-спектра поглощения вещества в 0,5 М НСl (max при 330 и 357 нм) и в 0,5 М NaOH (max при 267 нм)

3. ТСХ – на пластинках, покрытых силикагелем, после хроматографирования и высушивания, просматриваются в УФ-свете при 254 и 366 нм.

Интенсивность и величина основного пятна на хроматограмме испытуемого раствора должен соответствовать интенсивности и величине основного пятна на хроматограмме раствора СО.

4. ВЭЖХ – для фторхинолонов

Химические методы идентификации

1. На гетероциклический атом азота с осадительными общеалкалоидными реактивами и реакция Файгля – пурпурно-красное окрашивание (третичный азот).

2. Для солей – выделение осадков оснований под действием NaOH, осадки растворяются в избытке реактива.

3. Для производных 8-оксихинолина – на фенольный гидроксил

а) с - хинозол, нитроксолин – синевато-зеленое окрашивание; хлорхинальдол – сине-фиолетовое.

б) реакция образования азокрасителя с диазореактивом (кроме хлорхинальдола), с реактивом Марки, образование индофенола, реакция галоидирования.

в) реакция образование комплексной соли. За счет кислотных свойств по фенольному гидроксилу образуются хелатные комплексные соли с солями магния, меди и других металлов.

Комплексы очень прочные, не разрушаются разбавленными минеральными кислотами

Препараты группы 4-хинолона образуют хелатные комплексные соли с темно-красного цвета.

4. Для фторхинолонов – обнаружение ковалентно связанного атома F – сжигание в колбе с кислородом, поглощающий раствор – вода, в результате получается раствор HF, раствор фильтруют, к фильтрату прибавляют смесь, состоящую из равных объемов ализаринового красного С и нитрата циркония, имеющую красный цвет. Красный цвет раствора переходит в светло-желтый

5. Производные 8-оксихинолина восстанавливают цинковой пылью до дигидропроизводных, которые пергидролем или бромной водой окисляются до соединений хиноидной структуры, имеющих красно-фиолетовую окраску.

Частные реакции.

1. Хинозол. Реакция с раствором - доказательство амфотерных свойств – образующийся желтый осадок основания хинозола растворяется в избытке реактива:

2. Реакция на сульфат ион с раствором в растворе HCl

Нитроксолин – на ароматическую группу, образование азокрасителя

1)

2) с ДФА в конц. - синее окрашивание

3) с р. NaOH – красно-оранжевое окрашивание (образование ацисоли)

Хлорхинальдол –на ковалентно связанный атом хлора

а) проба Бельштейна

б) после минерализации обнаруживают ионы хлора с раствором в р.

Ципрофлоксацин, ломефлоксацин – реакция на ионы хлора в остатке хлороводородной кислоты

Примеси.

1. рН водных растворов потенциометрически ( хинозол, ципрофлоксацин, ломефлоксацин)

2. потеря в массе при высушивании (ломефлоксацин, офлоксацин не более 0,5% и 0,2% соответственно)

Вода (ципрофлоксацин) – метод Фишера (4,7-6,7%).

3. Сульфатная зола, тяжелые металлы.

4. Посторонние примеси, продукты разложения – во фторхинолонах – метод ВЭЖХ

5. ТСХ на пластинках «Силуфол – УФ-254» -определяется примесь 5-нитрозо-8-оксихинолина в 5-NOK.

Количественное определение

1. Ципрофлоксацин, хлорхинальдол, офлоксацин – кислотно–основное титрование

а) в среде ледяной уксусной кислоте в присутствии - ципрофлоксацин Э=Мм.

б) в среде уксусного ангидрида – офлоксацин, хлорхинальдол; с добавлением HCOOH – нитроксолин. Титрант 0,1 М раствор . КТТ – потенциометрически Э=Мм.

2. ВЭЖХ – для ломефлоксацина по НД (и для других фторхинолонов). Расчет по площади пиков испытуемого вещества и СО

площади пиков испытумого образца и СО ; растворов в мкг/мл

Р – чистота исп. СО в %

3. Нитроксолин - кислотно–основное титрование как вещества кислого характера.

1) индикатор тимоловый синий. Э=Мм.

2) в среде и НСООН. Индикатор – малахитовый зеленый

3) Нитритометрия после восстановления цинковой пылью в растворе HCl при t. Э=М.м.

4. Хлорхинальдол. Меркуриметрия – после сжигания в колбе с кислородом. Э=М/2

5. Алкалиметрия – для солей в присутствии спирто-хлороформной смеси (1:2) 0,1 М NaOH. Индикатор ф/ф.

Хинозол (по НД) Э=М/2, ципрофлоксацин, ломефлоксацин (Э=М.м.)

6. Для гидрохлоридов – аргентометрия, меркуриметрия. Э=М.м

7. УФ-спектрофотометрия – для всех (в лекарственных формах заводского изготовления)