- •Набор для иммуноферментного анализа (ифа) Учебное руководство
- •Как иммунная система защищает нас от болезней?
- •Как доктора используют наш иммунный ответ, чтобы защитить нас от болезней?
- •Каковы возможные пути передачи и распространения заболеваний?
- •Приведите пример болезней, атакующих человеческую иммунную систему
- •Какого рода бывают нарушения работы иммунной системы?
- •Почему при трансплантации органов необходимы иммунносупрессанты?
- •Почему важна быстрая диагностика заболеваний?
- •Как расшифровывается ифа?
- •Зачем в этом тесте используются ферменты?
- •Почему в тесте наряду с опытными образцами нужен положительный и отрицательный контроль?
- •Какие основанные на антителах тесты вы можете купить в аптеке?
- •1. Как иммунная система защищает нас от болезней?
- •2. Как доктора используют наш иммунный ответ, чтобы защитить нас от болезней?
- •3. Как вырабатываются антитела в вашем организме?
- •4. Как производятся антитела для ифа?
- •Зачем нужны быстрые тесты на наличие антигена?
- •6. Как расшифровывается ифа?
- •Зачем в этом тесте используются ферменты?
- •Почему в тесте наряду с опытными образцами нужен положительный и отрицательный контроль?
- •Какие основанные на антителах тесты вы можете купить в аптеке?
- •Как иммунная система защищает нас от болезней?
- •Как доктора используют наш иммунный ответ, чтобы защитить нас от болезней?
- •Приведите пример болезней, атакующих человеческую иммунную систему
- •Какого рода бывают нарушения работы иммунной системы?
- •Почему важно уметь определять антитела в крови людей, которые не выглядят больными?
- •Как расшифровывается ифа?
- •Зачем в этом тесте используются ферменты?
- •Почему в тесте наряду с опытными образцами нужен положительный и отрицательный контроль?
- •Содержал ли ваш образец сыворотки антитела к возбудителю болезни?
- •Если ваш анализ на антитела положительный, означает ли это, что вы больны?
- •Какие могут быть причины для положительного результата теста, когда вы на самом деле не больны?
- •Почему вы проводите анализ ваших образцов в трех повторностях?
Почему в тесте наряду с опытными образцами нужен положительный и отрицательный контроль?
Контроли необходимы для того, чтобы удостовериться, что эксперимент работает. Если у вас нет положительного контроля и ваш образец оказался отрицательным, вы не можете сказать, действительно ли он отрицательный, или просто весь ваш тест по какой-то причине не работает. И наоборот, без отрицательного контроля вы не можете быть уверены в том, что ваш тест не сработал по ошибке и не дал ложноположительный результат.
Вопросы к лабораторной работе
Содержал ли ваш образец антиген?
Ученики отвечают на вопрос, основываясь на своих результатах
Образцы, которые вы добавляете в лунки плашки, содержат множество разных белков, а также могут содержать или не содержать антиген. Что случится с белками в составе образца в лунке в случае, если образец содержит антиген? Если не содержит?
И в том и в другом случае, белки будут связываться с пластиком плашки.
Почему необходимо на каждом этапе промывать лунки?
При промывке удаляются все белки несвязавшиеся с лунками, а также все антитела, не связавшиеся со своими антигенами. Если бы несвязавшиеся реагенты оставались в растворе, они могли бы дать ложноположительные результаты.
Что происходит, когда вы добавляете первичные антитела к образцам, содержащим антиген? Не содержащим антиген?
Если образец содержит антиген, первичные антитела связываются с ним, и остаются прикрепленными к стенкам лунки. Если антигена нет, антитела остаются в растворе и вымываются при промывке.
Что происходит, когда вы добавляете вторичные антитела к образцам, содержащим антиген? Не содержащим антиген?
Если образец содержит антиген, вторичные антитела связываются с первичными антителами, ранее связавшимися с антигеном. Если образец не содержал антигена, в нем нет и первичных антител (они были удалены при промывке) и вторичные антитела остаются в растворе и в свою очередь вымываются.
Если ИФА дал отрицательный результат по агенту, вызывающему болезнь, означает ли это, что у вас нет данной болезни? По каким причинам результат может быть отрицательным в случае если вы на самом деле больны?
Отрицательный результат не обязательно означает, что вы не больны. Он может быть ложноотрицательным. ИФА может быть не настолько чувствительным, чтобы определить крайне низкий уровень антигена, присутствующий сразу после момента инфекции. Другой причиной может быть ошибка эксперимента, например, в лунку с вашим образцом случайно был помещен отрицательный контроль.
Почему вы проводите анализ ваших образцов в трех повторностях?
Проведение анализа в трех повторностях – это еще один контроль. Если вы не получили одинаковый (положительный или отрицательный) результат во всех трех лунках, значит, у вас проблемы с выполнением эксперимента. В клинической лаборатории этот анализ пришлось бы переделывать. В данной лабораторной работе ориентируйтесь на результат в двух совпадающих лунках, так как он скорее является правильным.